北京紡錘體實時成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿

來源: 發(fā)布時間:2024-10-24

在生殖醫(yī)學領域,卵母細胞的冷凍保存技術一直是研究的熱點之一。尤其是針對卵母細胞內(nèi)部高度復雜且精細的紡錘體結構,其冷凍過程中的穩(wěn)定性與完整性直接關系到解凍后卵母細胞的存活率及發(fā)育潛能。紡錘體作為卵母細胞內(nèi)部的關鍵結構,由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成,具有雙折射性。這種特性使得紡錘體在偏振光下能夠呈現(xiàn)出獨特的形態(tài)和特征,從而被Polscope等偏振光顯微鏡捕捉并觀察。雙折射性紡錘體的形態(tài)、穩(wěn)定性和完整性對于卵母細胞的正常減數(shù)分裂及胚胎發(fā)育至關重要。紡錘體在細胞分裂末期逐漸解體,為細胞質(zhì)分裂做準備。北京紡錘體實時成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿

北京紡錘體實時成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿,紡錘體

在生殖醫(yī)學領域,卵母細胞的冷凍保存技術一直是研究的熱點之一,旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而,傳統(tǒng)紡錘體觀察方法往往需要對卵母細胞進行固定和染色,這不僅破壞了細胞的活性,還限制了對其發(fā)育潛能的進一步評估。傳統(tǒng)紡錘體觀察方法,如免疫熒光染色技術,雖然能夠清晰地展示紡錘體的形態(tài),但其缺點在于需要對細胞進行固定和染色處理,這一過程不可避免地會對細胞造成損傷,影響后續(xù)的實驗結果和臨床應用。而Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)則通過利用紡錘體微管結構的雙折射性,實現(xiàn)了對無需染色紡錘體的直接觀察。這一技術創(chuàng)新不僅保留了細胞的活性與完整性,還提高了觀察的實時性和動態(tài)性,為卵母細胞冷凍研究提供了更為準確和可靠的評估手段。美國偏光成像紡錘體紡錘體微管網(wǎng)絡的復雜性保證了染色體分離的準確性。

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液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術結合起來的成像系統(tǒng),能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結構,如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統(tǒng)無需對細胞進行固定和染色,因此能夠評估卵母細胞的質(zhì)量與紡錘體、透明帶等的相關性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統(tǒng)可用于實時監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統(tǒng)評估紡錘體的恢復情況和穩(wěn)定性,從而篩選出高質(zhì)量的卵母細胞進行后續(xù)操作。

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應用

我們知道,成熟的卵母細胞排出***極體。IVF加入精子后,精子會穿透層層障礙**終進入卵子,隨著時間的推移,卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,進而排出第二極體,再往后大約加精后9-16小時,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標志。但是對于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時間窗,發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,因為沒有受精的卵子會在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們在加精后的4-6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。

當然,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行ICSI補救,實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個紡錘體,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI。結果發(fā)現(xiàn),使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。 紡錘體微管的動態(tài)變化受到細胞周期蛋白的調(diào)控。

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在卵母細胞冷凍保存過程中,紡錘體的形態(tài)變化是評估冷凍效果的重要指標之一。傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要將卵母細胞固定并進行免疫熒光染色,這不僅破壞了細胞的活性,還限制了進一步觀察其發(fā)育潛能的機會。而偏光成像技術則能夠在不解凍、不染色的情況下,直接觀察紡錘體的形態(tài)變化。通過Polscope系統(tǒng),研究者可以實時監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍保護劑對紡錘體的保護效果,以及解凍后紡錘體的恢復情況。冷凍后的卵母細胞紡錘體及染色體異常率增高,這將直接影響解凍后卵母細胞的減數(shù)分裂進程和胚胎的染色體正常性。利用偏光成像技術,研究者可以準確評估冷凍前后紡錘體的異常率,包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等參數(shù)。通過對比分析,可以明確冷凍過程對紡錘體的具體影響,為優(yōu)化冷凍保存條件提供科學依據(jù)。紡錘體在細胞分裂過程中展現(xiàn)出驚人的自我組裝能力。香港無需染色紡錘體

紡錘體在細胞分裂中的功能受到嚴格的時間和空間控制。北京紡錘體實時成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿

在核移植過程中,紡錘體的穩(wěn)定性是首要考慮的問題。冷凍和解凍過程中的溫度變化和冷凍保護劑的毒性都可能對紡錘體造成損傷,導致染色體分離異常,進而影響胚胎發(fā)育。因此,如何在冷凍過程中保持紡錘體的穩(wěn)定性,是核移植紡錘體卵冷凍研究面臨的重要挑戰(zhàn)。體細胞核在移入去核卵母細胞后,需要經(jīng)歷復雜的重新編程過程,以獲得全能性。然而,這一過程受到多種因素的調(diào)控,包括表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄因子表達等。在冷凍過程中,這些調(diào)控機制可能受到干擾,導致重新編程失敗或異常,從而影響胚胎發(fā)育。北京紡錘體實時成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿

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