大批量樣本的提取,選擇適宜的核酸提取方法十分重要。MP在構(gòu)思和開(kāi)發(fā)新一代的土壤樣本DNA純化方法的過(guò)程中,針對(duì)土壤樣本核酸純化的三大難題:腐植酸含量高、微生物裂解難,難以高通量提取,給出了針對(duì)性的解決方案:MagBeads FastDNATM Kit for Soil。PART.01,磁珠法土壤基因組DNA提取試劑盒。產(chǎn)品名稱(chēng):MagBeads FastDNATM Kit for Soil、MagBeads FastDNATM Kit for Soil (Sample)。包裝規(guī)格:50 preps、5 preps。貨號(hào):1165**050、11**61*05在線詢(xún)價(jià)MP土壤DNA提取。浙江土壤微生物土壤DNA提取咨詢(xún)問(wèn)價(jià)
加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,70℃加熱3分鐘;上磁力架吸附1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 以上所述*為本發(fā)明的具體實(shí)施方式而已,并不用于限制本發(fā)明,對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō),本發(fā)明可以有各種更改和變化;凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。閔行區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取咨詢(xún)報(bào)價(jià)網(wǎng)上訂購(gòu)?fù)寥繢NA提取的官網(wǎng)。
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;
DNA Spin Kit,按照植物DNA提取protocol進(jìn)行。FastDNA Spin Kit(11**40**0)。艱難樣本:植物組織或堅(jiān)硬、有韌性的樣本組織,采用介質(zhì)A。介質(zhì)A中含有石榴石和氧化鋯珠,能夠有效的破碎植物組織,釋放微生物。去雜提純:植物中含葉綠素、多糖、多酚等抑制物,試劑盒中即有針對(duì)植物樣本DNA提取而設(shè)計(jì)的裂解液CLS-VF及雜質(zhì)去除劑PPS及漂洗液,能夠很好的去除影響DNA純化及下游實(shí)驗(yàn)的抑制劑。解決方案2:當(dāng)作微生物樣本看待,選擇SPINeasy D上海益啟生物的聯(lián)系電話(huà)。
土壤樣品總DNA,經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳(0.5×TAE)結(jié)果如下:1. 西紅柿栽盆 2. 淤泥3. 沙土 4. 松樹(shù)下 5. 棕櫚樹(shù)下 6. 花園7. 尼羅河百合花栽盆 8. 草坪 9. 檸檬樹(shù)下 10. 鱷梨樹(shù)。產(chǎn)品詳情:產(chǎn)品名稱(chēng):FastDNA? SPIN土壤試劑盒。規(guī)格:50次。貨號(hào):11***02*0。訂購(gòu):立即訂購(gòu)。新品|吃土青年,你們心心念念的柱膜法土壤基因組DNA提取試劑盒上市啦!編者語(yǔ):土壤是環(huán)境樣本中**常見(jiàn)的類(lèi)型,土壤樣本種類(lèi)眾多,含有豐富的微生物,但這些微生物會(huì)與土壤益啟生物提供專(zhuān)業(yè)的土壤DNA提取。虹口區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取聯(lián)系電話(huà)
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樣本,5-6m/s,研磨20-40s,難裂解樣本研磨2個(gè)循環(huán),增加研磨力度,提取按土壤試劑盒提取protocol進(jìn)行?!ぽ^軟的樣本,仍然可以采用介質(zhì)E,提高裂解的劇烈程度,增加研磨速度和時(shí)間,增加研磨次數(shù)。不僅如此,我們還有文獻(xiàn)支持。參考文獻(xiàn)1:·樣本類(lèi)型:葡萄枝·樣本粉碎:使用液氮和攪拌機(jī)將植物材料在無(wú)菌鋼瓶中粉碎。·樣本裂解:FastPrep-24TM 5G,介質(zhì)E裂解?!颖綝NA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取。·下游實(shí)驗(yàn):細(xì)菌16S rD浙江土壤微生物土壤DNA提取咨詢(xún)問(wèn)價(jià)