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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;上海益啟品牌土壤DNA提取規(guī)格。楊浦區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取咨詢問價(jià)
實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況,提取DNA的純度過低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,希望可以幫到大家,在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1:土壤樣品含水量過高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過濕,可先將樣本10,000 x g,離心30s,盡可能多的去除液體。問題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】上海土壤微生物土壤DNA提取訂購土壤DNA提取的占地面積小嗎?
。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細(xì)胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次?!?】減少樣本用量。問題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?!は礈觳桓蓛簦涸黾酉礈齑螖?shù)。問題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加
PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,土壤DNA提取的報(bào)價(jià)具體是多少呢?
直接應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)。多:完美配合自動(dòng)化核酸提取儀,實(shí)現(xiàn)高通量提取。廣:多種環(huán)境土壤均能有效提取,適用性廣,***匹配市面上大多數(shù)核酸提取儀和工作站。安:不使用酚、氯仿等有毒試劑,安全環(huán)保。PART.02。多重?cái)?shù)據(jù)表明提取效果。MagBeads FastDNATM Kit for Soil用于提取不同類型土壤DNA,可直接用于PCR、酶切、測序等下游實(shí)驗(yàn)。提取不同類型土壤DNA收率及純度結(jié)果:A260/A280比值在1.7~2.0范圍視為提取效果良好,A260/A230比值大于土壤DNA提取哪家靠譜?崇明區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取代理價(jià)
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顆粒緊密結(jié)合,很難分離,經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致菌體裂解不完全,DNA條帶彌散;并且土壤中還存在大量抑制劑,如腐殖酸等,導(dǎo)致提取的DNA純度差,洗脫液有顏色。這些難題,選擇MP Biomedicals***產(chǎn)品土壤基因組DNA提取試劑盒——SPINeasy DNA Kit for Soil,幫你輕松解決,讓我們看看TA到底有什么神奇之處吧……1.四大絕招攻克土壤樣本DNA提取難題。產(chǎn)品名稱:SPINeasy DNA Kit for Soil、SPINeasy DNA Kit for Soil (Sample) 5 preps。包裝規(guī)格:50 preps、5p楊浦區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取咨詢問價(jià)