有人以豬骨為原料，用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝，對骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進(jìn)行了試驗(yàn)研究。結(jié)果表明：以胃蛋白酶對骨膠原的提取率比較高（），其次是胰蛋白酶（），接下來是中性蛋白酶（），現(xiàn)在是堿性蛋白酶（）。并且通過單因素和正交試驗(yàn)對胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明，胃蛋白酶提取的比較好條件是，胃蛋白酶的濃度是1%，在，然后在濃度為10%（w/v）的NaCL溶液中鹽析24h，現(xiàn)在骨膠原的回收率為，骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白，分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時(shí)對四種不同胃蛋白酶用量（分別為1%、2%、、3%）的試樣取樣檢測，采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進(jìn)程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程，現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時(shí)間提取率比較大。還有人用以新鮮豬皮為原料，在50-52℃的條件下用胰酶進(jìn)行水解，在酶用量為5000：1～10000：1，pH值為9，反應(yīng)2－3h，原料：水為1：2的條件下酶解。結(jié)果表明：總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。膠原蛋白肽是膠原或明膠經(jīng)蛋白酶降解處理后制成的，具有較高的消化吸收性。北京玻尿酸膠原蛋白液體飲品
所以，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白，很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多，一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下，魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h，再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白，用10%的異丙醇溶液去除脂肪，0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d，現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白，提取率為11.87%。注意，無論酸法或堿法，均可有效地提取膠原蛋白，有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液（pH3.0）和NaOH溶液（pH12.0）提取骨膠原蛋白，提取率基本相當(dāng)。但是，這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性，而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理，以避免對環(huán)境造成污染。湖南復(fù)合膠原蛋白飲品膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會(huì)兒的奶白色雞湯。
堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白，堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等，用氫氧化鈉浸提時(shí)效果較好。一般的是把樣品勻漿后，用堿溶液多次溶脹后，再離心提取。但由于易引起蛋白質(zhì)變性，如膠原肽鍵水解，含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞；所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低，天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼幔玫降乃猱a(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問題，若比較嚴(yán)重的話，還會(huì)產(chǎn)生D、L-型氨基酸消旋混合物，若D型氨基酸含量高過L型氨基酸，則會(huì)抑制L-型氨基酸的吸收，有些D型氨基酸有毒，甚至有致ai、致畸和致突變的作用。而且堿法提取的含量較低，用氫氧化鈉從魷魚皮中提取堿溶性膠原蛋白，其得率只有3%（以濕基計(jì)）。所以，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白，很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多，一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下，魚骨用，再用，用10%的異丙醇溶液去除脂肪，，現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白，提取率為。
膠原蛋白已經(jīng)逐漸獲得了大家的認(rèn)可，并把膠原蛋白作為護(hù)膚產(chǎn)品的優(yōu)先。一般來說，在選購膠原蛋白產(chǎn)品時(shí)應(yīng)該，一看技術(shù)，膠原蛋白有多肽和寡肽之分，從吸收上講寡肽膠原更容易直接被皮膚真皮層所吸收;二看含量:人體每天需要補(bǔ)充5-7g的膠原，大多數(shù)的膠原品牌都在3g左右，難以達(dá)到人體所需;三看原料:應(yīng)注意選擇從深海魚皮中提取的膠原，與人體組織**接近**適宜人體吸收，也可以避免動(dòng)物*****，確保產(chǎn)品的天然純凈;四看純度:高純度的膠原服用更安全，消費(fèi)者在選擇時(shí)，一定要選擇無任何添加的產(chǎn)品;五看認(rèn)證:具備各項(xiàng)進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫標(biāo)準(zhǔn)，且要選擇通過QS認(rèn)證企業(yè)的產(chǎn)品，以確保品質(zhì)。皺紋及細(xì)小皺紋的產(chǎn)生與膠原蛋白的自然流失有關(guān)，補(bǔ)充膠原蛋白肽后可直接滲透到皮膚真皮層。
膠原蛋白的熱變性溫度可以通過測定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來確定。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中，并配制成一定濃度的溶液，然后用烏式黏度計(jì)測量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時(shí)間后的增比黏度，以增比黏度對溫度作圖，當(dāng)增比黏度變化50%時(shí)所對應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測定。有人測得鱸魚、鯽魚和鳙魚魚皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃，它們的棲息水溫分別為26～27、29和32℃，亞氨基酸含量分別為、，與3種魚皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成，即[α1(Ⅱ)]3，富含羥賴氨酸，并且糖化率高，含糖量可達(dá)4%，是軟骨中的主要膠原。另外，即使同一生物，皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一，像來自日本海鱸、鮐魚、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃，而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時(shí)的溶解度不同。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。膠原蛋白保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性。廣東復(fù)合膠原蛋白肽口服液
膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)中*重要的組成部分。北京玻尿酸膠原蛋白液體飲品
在實(shí)際提取過程中，不同提取方法之間往往相互結(jié)合，可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對原料給予高壓處理一段時(shí)間，使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性，便于分離提取。熱水提取法是將原料經(jīng)過除雜蛋白等前處理之后，在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或膠原蛋白水解物，使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。膠原蛋白的提取一般有三種方法：一是高壓輔助的物理方法；二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法，根據(jù)溶劑的不同，可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法；三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說，高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取，而低溫抽提和酶法針對膠原的提取，但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。北京玻尿酸膠原蛋白液體飲品
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