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現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷類似物，但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見，在細(xì)胞增殖時能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比，更簡單，更快速，更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

EdU細(xì)胞增殖方法簡單，方便，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記，以檢測細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用，東寰生物提供多種染料供選擇，覆蓋常用檢測通道，方便您輕松選擇適合的染料，比較大限度地擴(kuò)展第三方染色的適用范圍，比較大限度地滿足您的檢測儀器要求，完全解決您的實驗難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢？

EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。

這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測靈敏度不是很高，通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。你知道EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的特點嗎？

注：1）培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2）孵育時間至少2小時，可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進(jìn)行細(xì)胞固定；2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來配置，避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過用10：1去離子水稀釋10×反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1×EU反應(yīng)緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的作用是什么？上海東寰告訴您。天津品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

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4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃預(yù)冷20min)。d,封閉液。e,／LPBS緩沖液。2、染色方法a,取出培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片，用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛試問固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min，PBS洗兩次，5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室溫封閉30min-1h。e.去封閉液，直接加入一抗，37℃孵育1h或4℃過夜?？贵w以mo/LPBS稀釋(理想的抗體濃度需經(jīng)試驗而定)。，10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗，37℃，孵育1h。，10min/次，用濾紙吸干。(PBS配制)封片。j.免疫熒光顯微鏡下觀察，或于4℃避光保存。免疫熒光雙標(biāo)記方法免疫熒光的雙標(biāo)記是指同時標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)兩種蛋白質(zhì)分子，當(dāng)懷疑某種配體與已知受體結(jié)合后可用此方法加以證明。此方法稍微復(fù)雜一些，應(yīng)注意所用的一抗是來自不同種屬動物的兩種特異性抗體(例如：A抗體為多克隆抗體，來自家兔；B抗體為單克隆抗體，來自小鼠)。其次，兩種二抗所帶熒光素的發(fā)射光不應(yīng)重疊，且盡量遠(yuǎn)離，通?？梢赃x擇FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5，或Cy3和Cy5等來組合。通常情況下，染色時兩種一抗可以同時孵育，然后可以同時孵育兩種二抗。但當(dāng)染色結(jié)果一種顏色非常弱，而另一種顏色比較強時，應(yīng)考慮先孵育顏色較弱的二抗。江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家