商業(yè)可用糖尿病細(xì)胞模型慢病毒載體構(gòu)建方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-03-12

根據(jù)嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞獲得的數(shù)據(jù),葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC2A2被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素,而后來(lái)的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細(xì)胞中,GLK被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β細(xì)胞系。EndoC-βH1是通過(guò)將表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)到人類胎兒胰腺芽中來(lái)開(kāi)發(fā)的。隨后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi),生成的表達(dá)SV40LT的細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。人源胰島B細(xì)胞模型對(duì)于與胰島相關(guān)的代謝疾病研究,包括糖尿病,糖尿病炎癥, 針對(duì)GLP-1R的Exendin4等類似藥物開(kāi)發(fā)有重要作用。通過(guò)干細(xì)胞誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生的胰島B細(xì)胞存在純度較低,缺乏成熟胰島B細(xì)胞功能等問(wèn)題。通過(guò)捐贈(zèng)組織的胰腺B細(xì)胞提取,存在供應(yīng)量較低,明顯批次效應(yīng),耗時(shí)較長(zhǎng)等問(wèn)題。使用糖尿病動(dòng)物模型進(jìn)行研究會(huì)比糖尿病細(xì)胞模型成本更高昂,周期更長(zhǎng)。更多關(guān)于Human Cell Design相關(guān)產(chǎn)品信息可以咨詢官網(wǎng)代理商AlibioBuy!表達(dá) EndoC-BH5 的 HLA-A2表示了免疫學(xué)研究的一個(gè)有價(jià)值的模型和潛在篩選方案。商業(yè)可用糖尿病細(xì)胞模型慢病毒載體構(gòu)建方法

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EndoC-βH1細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)可以逆轉(zhuǎn)化學(xué)誘導(dǎo)的糖尿病,EndoC-βH1細(xì)胞每百萬(wàn)細(xì)胞含有0.48μg胰島素,至少80代穩(wěn)定表達(dá)許多特異性β細(xì)胞標(biāo)記物,沒(méi)有任何其他胰腺細(xì)胞類型標(biāo)記物的大量表達(dá)。EndoC-βH1有潛力成為深入研究人類β細(xì)胞和藥物篩選的獨(dú)特工具,同時(shí)也是測(cè)試糖尿病替代細(xì)胞療法的有用臨床前模型。糖尿病細(xì)胞模型,EndoC-βH1、EndoC-βH3、EndoC-βH5等細(xì)胞dai biao了大規(guī)模藥物發(fā)現(xiàn)的獨(dú)特工具,為糖尿病細(xì)胞替代療法提供了臨床前模型。更多關(guān)于Human Cell Design相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!福建人胎兒胰腺外植體糖尿病細(xì)胞模型糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞在迄今為止測(cè)試的所有功能測(cè)定中均表現(xiàn)良好。

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在胰島細(xì)胞刺激中,基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過(guò)應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開(kāi)放劑二氮嗪(100mM),驗(yàn)證了胰島素分泌對(duì)D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加,從0mMD-葡萄糖時(shí)的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時(shí)的679.2±39.5ng/h/106細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細(xì)胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過(guò)多輪次優(yōu)化改良,獲得的功能胰腺B細(xì)胞,無(wú)限接近天然人源胰島B細(xì)胞,其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似,基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上(左圖),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)(右圖),對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑, Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋, 且可實(shí)現(xiàn)批量化生成,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。
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EndoC-βH1使用慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移從人類胎兒胰腺中產(chǎn)生功能性β細(xì)胞,這些胰腺處于發(fā)育的早期階段,即9至11周,這段時(shí)間與β細(xì)胞分化的開(kāi)始相吻合(33)。整合的轉(zhuǎn)基因SV40LT受大鼠胰島素啟動(dòng)子控制,在胰島素陽(yáng)性細(xì)胞中特異性表達(dá)。通過(guò)使用這種靶向方法,SV40LT在新形成的β細(xì)胞中表達(dá),同時(shí)這些細(xì)胞頭次產(chǎn)生胰島素。因此,我們成功地模仿了用于產(chǎn)生功能性嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞系的轉(zhuǎn)基因方法(7,8,34),用于從人胎兒胰腺中開(kāi)發(fā)功能性人β細(xì)胞系。human cell design的糖尿病細(xì)胞模型好不好用?EndoC-BH1糖尿病細(xì)胞模型無(wú)菌環(huán)境操作

EndoC-B h1是一種永生細(xì)胞系,可進(jìn)行反復(fù)的復(fù)蘇凍融,有效節(jié)約成本。商業(yè)可用糖尿病細(xì)胞模型慢病毒載體構(gòu)建方法

Human Cell Design 的產(chǎn)品不僅限于人源胰島β細(xì)胞模型,還包括各種配套的細(xì)胞培養(yǎng)試劑和實(shí)驗(yàn)方案。這些產(chǎn)品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制和驗(yàn)證,確保在各種實(shí)驗(yàn)條件下都能表現(xiàn)出色。通過(guò)與科研機(jī)構(gòu)和生物醫(yī)藥企業(yè)的緊密合作,HCD 不斷改進(jìn)其產(chǎn)品和服務(wù),以滿足不斷變化的研究需求,推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步??偨Y(jié)來(lái)說(shuō),Human Cell Design 以其技術(shù)和創(chuàng)新能力,在人源細(xì)胞模型領(lǐng)域樹(shù)立了榜樣。其開(kāi)發(fā)的人源胰島β細(xì)胞模型不僅為糖尿病研究提供了強(qiáng)有力的支持,還為藥物開(kāi)發(fā)和細(xì)胞治療帶來(lái)了新的希望。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用的不斷擴(kuò)展,HCD 將繼續(xù)致力于推動(dòng)人源細(xì)胞模型的前沿研究,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。更多詳細(xì)信息,歡迎咨詢AlibioBuy!商業(yè)可用糖尿病細(xì)胞模型慢病毒載體構(gòu)建方法