Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的即用型預(yù)混液,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及低濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測靈敏度。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽性??焖俜磻?yīng):支持快速qPCR程序,可在短時間內(nèi)完成檢測,提高實驗效率。操作簡便:2×預(yù)混液設(shè)計,只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過探針法實現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標(biāo)基因。Cas9 NLS與CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的gRNA兼容,可以進(jìn)行位點特異性的DNA切割 。AciI限制性內(nèi)切酶
在生物技術(shù)的微觀世界里,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程中不可或缺的工具,而AflII便是其中一位“精細(xì)剪刀手”。它是一種能夠特異性識別并切割DNA的酶,憑借其高度的特異性和精細(xì)的切割能力,在現(xiàn)代替物技術(shù)中發(fā)揮著重要作用。AflII的識別序列是“C^TTAAG”,這意味著它會在DNA雙鏈上尋找這一特定序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式會產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會暴露出一段互補的單鏈區(qū)域。這種特性使得AflII在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。在基因工程中,AflII的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家們可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,就像從一幅巨大的拼圖中精確地取出需要的那一塊。隨后,通過DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而AflII的黏性末端特性正好滿足了這一需求。AflII的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察AflII對不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit:有效、便捷的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種基于SYBR Green I染料的一步法實時熒光定量PCR試劑盒,為RNA模板的定量檢測而設(shè)計。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中,簡化了實驗操作,降低了污染風(fēng)險,同時提高了檢測效率。產(chǎn)品特點操作簡便:RT和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,無需反復(fù)開蓋或移液,減少了操作步驟和污染風(fēng)險。高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的反應(yīng)體系和熱啟動Taq DNA聚合酶,確保高效的逆轉(zhuǎn)錄和特異的qPCR擴(kuò)增。防污染設(shè)計:部分產(chǎn)品包含dUTP/UDG防污染系統(tǒng),可有效消除PCR產(chǎn)物污染。適用范圍廣:適用于多種RNA模板,包括總RNA、mRNA和RNA病毒等,尤其適合微量目標(biāo)基因的檢測。兼容性強:適用于多種qPCR儀器,如ABI、Bio-Rad、Agilent等。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:快速定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測:適用于RNA病毒的定量檢測,如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測,尤其在臨床檢測和大規(guī)模樣本分析中表現(xiàn)出色。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而 Cfr42I(SacII)便是其中一位“精細(xì)導(dǎo)航儀”。它以其獨特的識別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。Cfr42I(SacII)的識別序列是“CCGCGG”,這一序列在基因組中相對罕見,使得它能夠在特定位置進(jìn)行切割。它會在識別序列的中心位置切斷 DNA 鏈,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 Cfr42I(SacII)在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。黏性末端可以與其他具有互補序列的 DN片段通過堿基配對結(jié)合,再利用 DNA 連接酶進(jìn)行連接,從而構(gòu)建出新的重組 DNA 分子。在基因工程中,Cfr42I(SacII)的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割和連接能力使得 Cfr42I(SacII)成為基因工程中比較常用的工具酶之一。Cfr42I(SacII)的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 Cfr42I(SacII)對不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。SpCas9-NLS的N端和C端都融合了SV40 T抗原的核定位信號,這使得Cas9蛋白與gRNA形成的復(fù)合物。
5× RNA Loading Buffer:RNA電泳中的關(guān)鍵試劑5× RNA Loading Buffer 是一種為RNA凝膠電泳設(shè)計的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于RN片段的分離和分析。它通過添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使RNA樣品在電泳過程中更容易沉降并被觀察,是RNA研究中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點高密度與染料標(biāo)記:5× RNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使RNA樣品在電泳時沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時,其中的染料(如溴酚藍(lán)或二甲苯藍(lán))可以指示RNA遷移的位置,便于實時觀察電泳進(jìn)程。即用型設(shè)計:無需額外配制,直接與RNA樣品混合即可使用,簡化了實驗操作。兼容性強:適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、mRNA、小RNA等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無需特殊處理。應(yīng)用場景RN片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析RN片段,如轉(zhuǎn)錄本大小分析、RNA降解產(chǎn)物檢測等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為RN片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。RNA回收:在RNA回收實驗中,幫助定位目標(biāo)條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標(biāo),其PAM序列為5'-TTN-3',與Cas9的PAM序列不同。MunI (MfeI)限制性內(nèi)切酶
去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化蛋白上的泛素鏈,使泛素分子得以回收和再利用。AciI限制性內(nèi)切酶
Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計。它通過結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來實現(xiàn)熱啟動功能。在室溫下,抑制劑與酶結(jié)合,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時,抑制劑釋放,酶活性被啟動,確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,同時減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無需額外的高溫啟動步驟,簡化了實驗操作。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場景,包括常規(guī)PCR、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義??傊?,Hot-Start Taq DNA Polymerase 通過其獨特的熱啟動機(jī)制,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。AciI限制性內(nèi)切酶