在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、基因拷貝數(shù)變異研究等領(lǐng)域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit憑借其產(chǎn)品特點(diǎn)和性能,為科研工作者提供了一種高效、可靠的解決方案,極大地推動(dòng)了相關(guān)研究的進(jìn)展。一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用獨(dú)特的一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在一個(gè)反應(yīng)體系中。這種設(shè)計(jì)極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,減少了人為操作誤差和樣本污染的風(fēng)險(xiǎn)。相比傳統(tǒng)的兩步法,一步法節(jié)省了時(shí)間和人力成本,還提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性,尤其適合高通量樣本的檢測(cè)。(二)高靈敏度與特異性該試劑盒采用了先進(jìn)的探針技術(shù),結(jié)合優(yōu)化的酶體系和反應(yīng)緩沖液,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)低豐度靶標(biāo)基因的高靈敏度檢測(cè)。其特異性探針設(shè)計(jì)確保了與目標(biāo)序列結(jié)合,避免了非特異性擴(kuò)增的干擾,從而為定量分析提供了準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)支持。無(wú)論是對(duì)微量樣本中的基因表達(dá)進(jìn)行定量,還是對(duì)低濃度病原體進(jìn)行檢測(cè),One Step RT-qPCR Probe Kit都能表現(xiàn)出性能。Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過(guò)重組DNA技術(shù)。Recombinant Human VEGF165 Protein
Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl):高效去除尿嘧啶的分子生物學(xué)工具Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一種來(lái)源于大腸桿菌的重組酶,能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或短于6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。產(chǎn)品特點(diǎn)UDG酶的主要特點(diǎn)是能夠在PCR反應(yīng)中有效防止產(chǎn)物污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中摻入dUTP替代dTTP,生成含有dU的DNA產(chǎn)物,UDG可以特異性降解這些含dU的DNA,從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外,UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性,適pH為8.0,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子。應(yīng)用場(chǎng)景UDG酶廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR產(chǎn)物防污染:通過(guò)降解含dU的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測(cè):用于檢測(cè)基因組中的單核苷酸變異。基因編輯與位點(diǎn)特異性突變:用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究:通過(guò)去除尿嘧啶,研究DNA修復(fù)機(jī)制。在PCR反應(yīng)中,UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl,通常在反應(yīng)體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外,UDG酶在RT-PCR中需謹(jǐn)慎使用,因?yàn)槠淇赡芟潞铣傻腸DNA。一步法sgRNA合成試劑盒由于Pfu DNA Polymerase 對(duì)引物的質(zhì)量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯(cuò)誤導(dǎo)致的非目標(biāo)突變。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTPSetSolution中的每種核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)濃度均為100mM,純度超過(guò)99%,經(jīng)HPLC驗(yàn)證,無(wú)DNase和RNase污染。這種高純度的dNTP溶液能夠有效減少實(shí)驗(yàn)中的非特異性擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。獨(dú)立包裝與靈活使用該套裝將四種dNTP分別獨(dú)立包裝,便于用戶(hù)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確調(diào)整每種dNTP的濃度,從而優(yōu)化反應(yīng)條件。這種靈活性對(duì)于復(fù)雜的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)尤為重要,例如多重PCR和高保真PCR。適用性dNTPSetSolution適用于多種分子生物學(xué)應(yīng)用,包括但不限于PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、RT-PCR、cDNA合成和DNA標(biāo)記。其超純的成分和穩(wěn)定的性能使其能夠兼容各種DNA聚合酶,包括高保真酶和熱啟動(dòng)酶。二、性能優(yōu)勢(shì)高效擴(kuò)增在PCR反應(yīng)中,dNTP的純度和濃度直接影響擴(kuò)增效率。dNTPSetSolution能夠支持長(zhǎng)達(dá)20kb的DNA片段擴(kuò)增,表現(xiàn)出色的擴(kuò)增能力和穩(wěn)定性。此外,其高純度特性可以減少非特異性產(chǎn)物的生成,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進(jìn)的熱啟動(dòng)Taq酶技術(shù),通過(guò)化學(xué)修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應(yīng)的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴(kuò)增,顯著提高了反應(yīng)的靈敏度,即使對(duì)于低豐度的靶基因,也能實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。例如,在檢測(cè)稀有突變基因時(shí),其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準(zhǔn)確識(shí)別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨(dú)特的緩沖體系經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結(jié)合過(guò)程。在反應(yīng)過(guò)程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時(shí)增強(qiáng)引物與目標(biāo)模板的特異性結(jié)合能力。這使得在復(fù)雜的基因組背景下,目標(biāo)基因得以高效擴(kuò)增,從而顯著提高了qPCR反應(yīng)的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測(cè)中,這種高特異性?xún)?yōu)勢(shì)尤為明顯,能夠避免因引物錯(cuò)配導(dǎo)致的非目標(biāo)基因擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種極為重要的預(yù)混液試劑,它為PCR反應(yīng)提供了一種效率、便捷且直觀(guān)的解決方案,廣應(yīng)用于基因擴(kuò)增、疾病診斷和遺傳研究等領(lǐng)域。Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種預(yù)先配制好的2倍濃度的反應(yīng)混合液,其中包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs、反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料。這種預(yù)混液的設(shè)計(jì)簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行PCR反應(yīng),避免了手動(dòng)配制反應(yīng)體系時(shí)可能出現(xiàn)的誤差,提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和可靠性。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點(diǎn)。它能夠在PCR過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析。此外,Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye) 的熱穩(wěn)定性高,能夠在高溫條件下保持活性,確保PCR反應(yīng)的高效進(jìn)行。其反應(yīng)體系能夠適應(yīng)多種復(fù)雜的模板,如高GC含量的DNA片段或低豐度基因,進(jìn)一步提升了實(shí)驗(yàn)的成功率。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。Recombinant Human PAH (D415N) Protein,His Tag
這種預(yù)混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,還通過(guò)添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀(guān)的監(jiān)測(cè)手段。Recombinant Human VEGF165 Protein
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及低濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽(yáng)性。快速反應(yīng):支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。Recombinant Human VEGF165 Protein