斑馬魚cdx模型平臺

中國斑馬魚技術(shù)產(chǎn)業(yè)應(yīng)用史，就是環(huán)特生物的發(fā)展史。憑借在斑馬魚PDTX技術(shù)及科研服務(wù)方面逾20年的深厚積累，環(huán)特生物以斑馬魚轉(zhuǎn)基因、基因敲除、敲入，尤其是國際帶動的基因置換技術(shù)為關(guān)鍵，專注于提供各種遺傳工程斑馬魚的定制、斑馬魚基因編輯技術(shù)及斑馬魚疾病模型開發(fā)等專業(yè)技術(shù)服務(wù)，不僅可以實(shí)現(xiàn)構(gòu)建復(fù)雜基因敲入，包括點(diǎn)突變、條件性敲除等難度較高斑馬魚基因編輯技術(shù)服務(wù)，而且可以通過斑馬魚基因編輯可視化技術(shù)，實(shí)現(xiàn)可視化基因型篩選，減少其它動物模型中大量的基因型篩選和鑒定工作，比較大化發(fā)揮斑馬魚模型未來的應(yīng)用優(yōu)勢。斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)簡單，卻有規(guī)律跳動，是心血管研究的好對象。斑馬魚cdx模型平臺

環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務(wù)，利用CRISPR/Cas9技術(shù)快速在斑馬魚模型中驗(yàn)證人類遺傳病、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等，主要研究領(lǐng)域?yàn)閶胗變喊l(fā)育畸形、罕見病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦的血管疾病、血液病、生殖缺陷等。相較于哺乳動物基因編輯的試驗(yàn)周期長（一般1年以上）、表型不直觀（一般需染色）、研究成功率低等缺點(diǎn)，斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢有：1.實(shí)驗(yàn)周期快，快可在2周內(nèi)進(jìn)行疾病相關(guān)的表型觀察（F0代高效瞬時(shí)敲降），3個(gè)月內(nèi)完成穩(wěn)定品系構(gòu)建（雜合子F1代3個(gè)月，純合子F2代6個(gè)月，子代數(shù)量多）；2. 直觀、多維度地活的動態(tài)觀察（可對特定organ組織細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記，利用透明斑馬魚活的觀察和成像，哺乳動物上很難實(shí)現(xiàn))；3. 研究成功率高（與哺乳動物相比較，斑馬魚基因編輯效率高，樣本數(shù)量多，可同時(shí)測試多個(gè)相關(guān)基因，比較大化保證研究的成功率）。斑馬魚衰老模型造模光照周期會影響斑馬魚的生物鐘，進(jìn)而改變其行為。

水生環(huán)境日益惡化，斑馬魚Cdx環(huán)境監(jiān)測技術(shù)化身靈敏哨兵，守護(hù)水域生態(tài)平衡。斑馬魚生存與水環(huán)境緊密相連，Cdx基因作為應(yīng)激響應(yīng)關(guān)鍵樞紐，對溫度波動、化學(xué)污染、病原體入侵等脅迫反應(yīng)迅速。水溫驟變時(shí)，Cdx環(huán)境監(jiān)測技術(shù)顯示Cdx基因上調(diào)熱休克蛋白基因表達(dá)，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定；若水體遭受重金屬、有機(jī)污染物污染，Cdx基因jihuo肝臟、腎臟jiedu酶基因，科研人員通過實(shí)時(shí)定量PCR、基因芯片等技術(shù)監(jiān)測Cdx及相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平變化，量化污染程度。

斑馬魚 cdx 實(shí)驗(yàn)為解析基因功能提供了一條行之有效的途徑。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面，研究人員可以利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚技術(shù)，將帶有特定標(biāo)記的 cdx 基因構(gòu)建體導(dǎo)入斑馬魚胚胎中，從而在活的狀態(tài)下追蹤 cdx 基因的表達(dá)模式和動態(tài)變化。同時(shí)，結(jié)合基因編輯工具，如 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)，創(chuàng)建 cdx 基因突變體斑馬魚品系，觀察其在多個(gè)發(fā)育階段與野生型斑馬魚的差異。從細(xì)胞層面來看，通過免疫熒光染色等技術(shù)，可以檢測與 cdx 基因相關(guān)的細(xì)胞信號通路中關(guān)鍵蛋白的分布和活性變化，進(jìn)而多面地解析 cdx 基因在細(xì)胞增殖、分化以及組織organ形成過程中的功能，為理解相關(guān)基因在脊椎動物發(fā)育中的保守性和特異性奠定基礎(chǔ)。斑馬魚具有群居性，群體游動時(shí)，行為模式有一定的協(xié)調(diào)性。

斑馬魚實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ驮谒幬镅邪l(fā)過程中具有明顯的優(yōu)勢，為藥物篩選和評價(jià)提供了高效、快速和經(jīng)濟(jì)的平臺。其繁殖速度快、子代數(shù)量多的特點(diǎn)使得能夠在短時(shí)間內(nèi)對大量化合物進(jìn)行高通量篩選。在藥物篩選實(shí)驗(yàn)中，將斑馬魚胚胎或幼魚暴露于不同的藥物或化合物中，通過觀察斑馬魚的生長發(fā)育、生理功能、行為變化以及疾病模型中的表型改善情況等指標(biāo)，來評估藥物的有效性和安全性。例如，在抗癲癇藥物研發(fā)中，可以利用斑馬魚癲癇模型，觀察候選藥物對斑馬魚癲癇發(fā)作的抑制作用。如果一種藥物能夠明顯減少斑馬魚的癲癇發(fā)作頻率和強(qiáng)度，并且對斑馬魚的正常生長發(fā)育沒有明顯的不良影響，那么該藥物就具有進(jìn)一步開發(fā)的潛力。它在水中的呼吸依靠鰓部，水流經(jīng)鰓時(shí)完成氣體交換。斑馬魚cdx模型平臺

斑馬魚的壽命較短，一般為 2 - 3 年，利于世代研究。斑馬魚cdx模型平臺

斑馬魚功效評價(jià)體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察，進(jìn)而評估功效，如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試，如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量，也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實(shí)驗(yàn)●基于行為學(xué)通過對斑馬魚的運(yùn)動情況對一些功效進(jìn)行評價(jià)，如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評價(jià)體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚cdx模型平臺