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染色的一般原則：因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號較強(qiáng)；檢測某些弱表達(dá)的抗原，推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

染色試劑盒：GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase)，是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶，屬水解酶類，相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同，可以選擇三種檢測方法：組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法（靈感度為分光光度檢測法較高）。其中較為常用的是組織化學(xué)法。浙江品質(zhì)好的糖原染色試劑盒進(jìn)貨價動物材料取用時需對動物施以麻醉，常用的麻醉劑有氯仿和。

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化，產(chǎn)生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無色品紅結(jié)合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時過濾，加1mmol/L鹽酸20ml，再冷卻至25℃左右，加偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗處24h，無色即可放冰箱中保存，呈微紅色，則加活性炭1～2g，吸附過濾使成無色液體，放冰箱中保存。若溶液變紅，即不能再用。（2）10g/L過碘酸水溶液：過碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用，一般可用3個月，變黃則失效

試劑盒：JC-1是一種陽離子脂質(zhì)熒光染料，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級，有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性。原理：JC-1染料在正常細(xì)胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi)，形成多聚體，發(fā)紅色熒光；而在凋亡細(xì)胞內(nèi)，由于線粒體膜電位的破壞，不能聚集到線粒體內(nèi)，以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)，在低濃度時以單體的形式存在，高濃度時以多聚體形式存在，兩者的發(fā)射光譜不同，但均可在流式細(xì)胞儀綠色（FL-1）通道檢測出綠色熒光，JC-1可透過正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi)。多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。

臨床意義：1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細(xì)胞PAS染色多呈陽性反應(yīng)，陽性率高，反應(yīng)強(qiáng)；成熟紅細(xì)胞有時亦可為陽性；急性淋巴細(xì)胞白血病的原、幼淋巴細(xì)胞PAS染色多為紅色顆粒或塊狀陽性反應(yīng)；急性粒細(xì)胞白血病的原粒細(xì)胞呈陰性或胞質(zhì)呈彌漫淡色陽性反應(yīng)；急性早幼粒細(xì)胞白血病異常早幼粒細(xì)胞的PAS染色為陽性反應(yīng)；急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞PAS染色陽性反應(yīng)呈彌漫分布的紅色細(xì)顆粒，巨核細(xì)胞白血病原巨核細(xì)胞PAS染色呈陽性或強(qiáng)陽性反應(yīng)，表現(xiàn)為紅色顆?；驂K狀。2.各類貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血（曾稱地中海貧血）的幼紅細(xì)胞PAS染色多為陰性反應(yīng)，有時可出現(xiàn)陽性反應(yīng)；巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒哪里買

無水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

注意事項：染色前：①切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。②撈片時，較好一張玻片撈一個組織，組織較好位于玻片的中間，美觀的同時也利于脫蠟（有時二甲苯的液面低于組織片的時候，達(dá)不到脫蠟的目的）。③石蠟切片脫蠟到水時，一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底（脫蠟時間不能太少）以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面，在染色時染色液未能充分與組織接觸，較終導(dǎo)致染色效果不佳，甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙，以避免脫蠟時把標(biāo)簽紙也浸沒，致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上，造成染色不佳。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

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