筑夢青春,實踐啟航——贛州市前沿職業(yè)技術(shù)學(xué)校暑期思政課社會實
熱血青春,軍訓(xùn)終章 —— 贛州市前沿職業(yè)技術(shù)學(xué)校2024級新
開學(xué)***天:你好,新同學(xué)!
青春追光,篤行致遠(yuǎn)!前沿職校2023秋季學(xué)期開學(xué)儀式暨新生軍
關(guān)于中小學(xué)生暑假安全知識
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矢志傳承浙大西遷精神,精英教育鑄造求是高地,贛州市前沿職業(yè)技
恭祝!全國無人機行業(yè)產(chǎn)教融合共同體成立 我校當(dāng)選為副理事長單
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實驗,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等。其價格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,性價比還可以。無錫正規(guī)RNA提取試劑廠家
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實驗,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等長沙RNA提取試劑生產(chǎn)廠家RNA提取試劑注意事項:TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用
拭子RNA提取試劑的選擇?1、產(chǎn)品價格。價格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實驗如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構(gòu)建等,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒的價格較為便宜,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高。因而,對于以上實驗建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數(shù)實驗,特別是下游需要PCR擴(kuò)增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,而在價格方面,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經(jīng)費充足,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經(jīng)費不多或下游主要做PCR或分子雜交等實驗,可考慮選擇性價比較高的國產(chǎn)品牌。當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題。
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備。可用下列裝置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機械勻漿器(Polytron,Tekmar或類似產(chǎn)品),打開開關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過夜,高壓消毒30分鐘。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品。電泳槽,雙蒸水沖洗。離心機和加樣器,無需處理。6.戴手套。注意某些實驗如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,須較全仔細(xì)清洗實驗器具和實驗區(qū)域。若比值較低,說明有殘余蛋白質(zhì)存在;比值太高,則提示RNA有降解。RNA提取試劑直銷廠家
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點:試劑盒可用于哺乳動物細(xì)胞或者組織樣品的提取。無錫正規(guī)RNA提取試劑廠家
miRNA是一類內(nèi)源性的約22個核苷酸的非編碼RNA分子,可參與轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控。在細(xì)胞的分化和發(fā)育,細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和對傳染的應(yīng)答等生物學(xué)過程中,miRNA發(fā)揮了重要作用。成熟的miRNA主要通過翻譯壓制來調(diào)控內(nèi)源性基因的表達(dá)。miRNA的應(yīng)用有miRNA模擬物和壓制劑。miRNA模擬物是化學(xué)合成的雙鏈RNA分子,通過傳染到細(xì)胞中,模擬成熟的內(nèi)源性miRNA分子;miRNA壓制劑是單鏈經(jīng)過修飾的RNA分子,通過傳染到細(xì)胞中,特異性的壓制miRNA的功能。miRNA模擬物和壓制劑可以用于研究單個miRNA錯誤調(diào)節(jié)所造成的生物學(xué)影響,也能用于確定某個miRNA分子的特異性靶標(biāo)基因。同時有研究發(fā)現(xiàn)miR-143可調(diào)控KRAS原病基因,為病癥的醫(yī)治提供了新的靶點和醫(yī)治方法。無錫正規(guī)RNA提取試劑廠家