Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的,初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液,在低血清含量下時,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養(yǎng),如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,使用更為較廣。Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液,在低血清含量下時,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)。廣西RPMI-1640細胞培養(yǎng)基
Grace’s昆蟲培養(yǎng)基是由Grace改良的Wyatt培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基與昆蟲血淋巴的化學成分更為相近,Grace使用這種培養(yǎng)基成功建立了***個昆蟲連續(xù)細胞系。Grace’s昆蟲培養(yǎng)基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細胞的培養(yǎng),適當補充添加劑后,Grace’s昆蟲培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)各種昆蟲細胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲的細胞。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。Grace’s補充昆蟲細胞培養(yǎng)基**初設計用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)的細胞生長。Grace’s補充昆蟲培養(yǎng)基目前***用于草地貪夜蛾細胞Sf9和Sf21的生長。Sf9和Sf21細胞常規(guī)使用于桿狀病毒表達載體系統(tǒng)(BEVS)表達重組蛋白。本產(chǎn)品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。Grace’s補充昆蟲培養(yǎng)基含有Grace’s昆蟲細胞培養(yǎng)基(PM152011)中不常見的水解乳蛋白和酵母粉,此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。 廣東DMEM細胞培養(yǎng)基檢測DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。
無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質(zhì)細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。DMEM 由 Eagle 培養(yǎng)基改良而來,氨基酸、維生素濃度高,為細胞生長供能助力 。
Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間,減少傳代次數(shù),即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。天津DMEM細胞培養(yǎng)基供應商家
RPMI RPMI 1640 培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。廣西RPMI-1640細胞培養(yǎng)基
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設計用于培養(yǎng)原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。 廣西RPMI-1640細胞培養(yǎng)基
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