人類(lèi)精子冷凍保存和儲(chǔ)存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類(lèi)精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開(kāi)儲(chǔ)存;對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序;所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng),以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位,傳感器應(yīng)連接警報(bào)器,可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無(wú)污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無(wú)菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統(tǒng),不需要無(wú)菌的液氮。Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報(bào)告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。馬精子分析VCL
精子分析儀工作原理以灰度識(shí)別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù),通過(guò)顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù),對(duì)采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析,由計(jì)算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對(duì)1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)分析,2-3分鐘即可完成檢測(cè)[1]。優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,用量少,檢測(cè)速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè),并且能夠快速、準(zhǔn)確的測(cè)定精子密度、活力、精子分級(jí)等,還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點(diǎn):影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計(jì)數(shù)池的相對(duì)準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。美國(guó)水生動(dòng)物精子分析BCF?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。
精液一般檢查(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見(jiàn)于生殖系統(tǒng)炎癥、結(jié)核、和**,黃色膿樣精液,見(jiàn)于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開(kāi)始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,可能是精子數(shù)量減少,見(jiàn)于生殖系統(tǒng)炎癥,精液不凝固見(jiàn)于精囊阻塞或損傷;如果精液1小時(shí)后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活動(dòng)力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動(dòng)和代謝,不利于受孕。
HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對(duì)分析根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對(duì)新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià),從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購(gòu)儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對(duì)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果:兩臺(tái)儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測(cè)所有參數(shù)均能符合比對(duì)要求,檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性;對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器的檢測(cè)結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對(duì)預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評(píng)價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測(cè)的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對(duì)分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過(guò)比對(duì)分析,得出兩臺(tái)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測(cè)結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。Hamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。
精液檢查前有什么注意事項(xiàng)?一、留精液前,病人應(yīng)停止**4~7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時(shí),可用軟皂或石蠟油做**按摩,將標(biāo)本收集在無(wú)菌的試管中;也可用避孕套(沖洗干凈,不含殺精子藥物)或采用**中斷法收集精液,但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液,可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿,檢查沉渣中有無(wú)精子。不要將精液暴露在過(guò)熱和過(guò)冷的環(huán)境中。及時(shí)交給醫(yī)生備查,不得超過(guò)30分鐘。冷天要注意保暖,送檢時(shí)可放在內(nèi)衣口袋里保溫。二、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)先沖洗、消毒尿道口,再將精液收集在無(wú)菌試管中。夫妻同居3年以上,沒(méi)有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥,在雙方未進(jìn)行檢查前,不能盲目懷疑某一方,更不能認(rèn)為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實(shí)現(xiàn)受孕,男方的精液含量應(yīng)正常,形態(tài)和動(dòng)力也應(yīng)正常。女方能正常排卵,精子和卵子能結(jié)合成受精卵,這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植。上述的幾個(gè)環(huán)節(jié)中的某一個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生障礙,都可引起不孕。三、如果上述檢查結(jié)果精液是正常的,女方也應(yīng)去醫(yī)院檢查,包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),直線性(LIN)?:曲線軌跡的直線性。馬精子分析VCL
在精子研發(fā)的歷程中,計(jì)算機(jī)輔助精子檢測(cè)經(jīng)歷了黑白圖像機(jī)、彩色圖像檢測(cè)。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測(cè)。馬精子分析VCL
定量測(cè)定是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)***版及以后版本[1]?對(duì)有關(guān)男科的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。對(duì)計(jì)算機(jī)輔助精子分析進(jìn)行質(zhì)量管理包括:計(jì)算機(jī)本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動(dòng)力變量?其質(zhì)量包括所測(cè)得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯(cuò)和數(shù)據(jù)的正確性及確認(rèn)?以及分析中的標(biāo)準(zhǔn)[2]。CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實(shí)驗(yàn)室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點(diǎn):⑴在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測(cè)定精子運(yùn)動(dòng)的方法;⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評(píng)估較困難;⑶WHO標(biāo)準(zhǔn)是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ);⑷今后應(yīng)加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)。馬精子分析VCL