北京牛精子分析LIN

美國(guó)HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。選擇合適的CASA檢測(cè)原理和設(shè)備，確保幀率要求，避免因設(shè)備問題影響檢測(cè)結(jié)果?。北京牛精子分析LIN

CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)應(yīng)用中的功能要求和參數(shù)設(shè)置CASA是將現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)技術(shù)和先進(jìn)的圖象處理技術(shù)應(yīng)用于精子質(zhì)量的臨床檢驗(yàn)，通過對(duì)精子動(dòng)（靜）態(tài)圖象中精子特性的***分析，為臨床提供有關(guān)精子質(zhì)量各項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計(jì)算機(jī)軟件支持系統(tǒng)幾個(gè)部分：（1）相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術(shù)板（Makler板、Macro板或MicroCell計(jì)數(shù)池等）；（2）高速、高分辨率的攝像機(jī)和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng)；（3）計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)及打印機(jī)打印輸出。計(jì)數(shù)精子分析頻閃光源男性精液檢測(cè)主要依賴計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses，CASA)。

精液顯微鏡檢查精子計(jì)數(shù)：正常人精子計(jì)數(shù)為0．6×1012～1．5×0.012/L，相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106～600×106。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值＜20×106/ml或一次排精總數(shù)＜100×106為精子減少，超過致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷，是導(dǎo)致少精或無精的重要原因，也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后，連續(xù)檢查無精子，說明手術(shù)成功，如果結(jié)扎兩個(gè)月后，精液中仍有精子，說明手術(shù)不成功。

**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測(cè)方法。目前我國(guó)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室普遍使用人工方法進(jìn)行分析，結(jié)果缺少準(zhǔn)確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法，但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對(duì)精子的活率和活力的分級(jí)主要依賴檢驗(yàn)者的經(jīng)驗(yàn)和主觀判斷，不同的技術(shù)人員分析的結(jié)果有時(shí)相差甚遠(yuǎn)，對(duì)精子運(yùn)動(dòng)能力的判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。因此應(yīng)用一種統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)和快速的檢測(cè)方法替代人工方法十分必要。計(jì)算機(jī)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測(cè)中的應(yīng)用49中國(guó)衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析（Computer-aidedSpermAnalysis,CASA）系統(tǒng)逐步取代了人工操作，在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術(shù)彌補(bǔ)了人工方法進(jìn)行**分析的不足。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動(dòng)識(shí)別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù)，減少了人工操作的誤差。

精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí)，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能。精子分析，直線速率（VSL）?：精子頭在開始檢測(cè)時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。香港水生動(dòng)物精子分析ALH

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，擺動(dòng)性（WOB）?：實(shí)際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動(dòng)值。北京牛精子分析LIN

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。北京牛精子分析LIN