醫(yī)療檢測數(shù)字ELISA微量樣本

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測

珠子以兩種不同的方式讀出。首先，在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時(shí)后，用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷（RGP），一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上，檢測限為15fMofS阝G（圖2）。其次，將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中，單個(gè)酶的信號被允許在反應(yīng)室中積累，并每30秒獲取一次熒光圖像。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)獲取陣列的白光圖像以識別含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光與空井不同）。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶（從時(shí)間變化的熒光圖像中強(qiáng)度增加）。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對數(shù)-對數(shù)圖。檢測到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾（zM），并通過外推信號等于的酶濃度計(jì)算得出的檢測限（LOD）。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，極速檢測，快15min就能完成的單分子免疫檢測！醫(yī)療檢測數(shù)字ELISA微量樣本

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動力學(xué)上，對于200,000個(gè)微球分散在100μL中，珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA（分別為17.3和30kDa）的蛋白質(zhì)將在不到1min的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明，在2小時(shí)的孵育過程中，蛋白質(zhì)分子的捕獲不會受到限制動力學(xué)上。其次，必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個(gè)珠子加載到50,000孔陣列中，通常會導(dǎo)致20,000–30,000個(gè)微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球（見下文），這種裝載導(dǎo)致背景信號為200-300個(gè)活性微球檢測到，對應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)（CV）為6-7%。第三，過高的微球濃度可能導(dǎo)致：a）非特異性結(jié)合增加，降低信噪比；以及b）分析物與微球的比例過低，導(dǎo)致活性微球的比例過低，從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿；可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時(shí)，為了獲得可接受的背景信號（1%）和泊松噪聲）。 科研場景用數(shù)字ELISA靈活芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品，微量檢測，使用微量樣本就能測試；

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA；使用新型 的fg級超敏免疫檢測simoa單分子產(chǎn)品原理；

它是一種DVD大小的圓盤，由24個(gè)陣列組成，每個(gè)陣列包含240微米大小的微孔，這些微孔呈徑向排列，以便使用藍(lán)光制造工藝和儀器內(nèi)的液體處理并行處理。圖2B顯示了集成陣列及其相關(guān)流體通道的設(shè)計(jì)。每個(gè)陣列由216,000個(gè)40飛升大小的微孔組成，以六邊形緊密排列模式排列在平面表面的3×4毫米區(qū)域內(nèi)。每個(gè)微孔的標(biāo)稱尺寸為4.25μm直徑、3.25μm深度和8μ米中心間距。流體通道深0.5毫米，通道和流體入口端口的總體積為74μLto，可容納珠子和密封油溶液。通道中包含一個(gè)收縮部分以減少液體回流。微珠的分級是西莫亞技術(shù)的關(guān)鍵要求，微孔的幾何形狀足以容納單個(gè)微珠（2.7μmdiameter；以下簡稱珠子）。西莫亞圓盤由環(huán)烯烴共聚物（COP）制造，因其具有高通量注塑成型的適應(yīng)性，且成本低廉。具有良好的化學(xué)、生物和光學(xué)性能

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測

單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性，我們通過將400,000個(gè)帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶（S阝G）混合，創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見，生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的。互補(bǔ)DNA。[我們注意到，該實(shí)驗(yàn)不應(yīng)被視為敏感的DNA檢測；該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制，如補(bǔ)充圖2所示，這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品，低成本單分子檢測；

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景：適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。

在前列腺切除術(shù)后患者中，能夠準(zhǔn)確量化PSA水平的能力，即使在非常低的濃度(<300fM或10pg/mL）下，也應(yīng)提供如果PSA水平升高，早期提示復(fù)發(fā)17,29。圖4顯示PSA水平使用數(shù)字ELISA在30名接受治理性前列腺切除術(shù)且術(shù)后至少6周采集血液的患者血清中進(jìn)行測量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商業(yè)檢測限采用PSA數(shù)字ELISA（圖3A)對全血清樣本進(jìn)行稀釋1：4后測定，成功檢測到所有30例患者中PSA，濃度范圍為14fg/mL至9.4pg/mL，平均濃度為1.5pg/mL。需要進(jìn)一步的臨床研究來確定在RP患者中測量PSAfg/mL水平的診斷益處。 數(shù)字化ELISA芯片，幫您數(shù)字化高靈敏檢測，且微量樣本多重指標(biāo)檢測；科研場景用數(shù)字ELISA靈活

芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品，少至可以進(jìn)行8孔、4孔的靈活檢測。醫(yī)療檢測數(shù)字ELISA微量樣本

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個(gè)酶產(chǎn)生的熒光團(tuán)限制在極小范圍內(nèi)，從而能夠檢測到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積（~50fL），導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實(shí)現(xiàn)這種定位，在第二步中，將珠子加載到一個(gè)陣列為離散的微升大小的孔（圖1C）。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個(gè)孔，孔徑為μm，孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下，用橡膠密封圈密封。Rissin等人，第3頁將每個(gè)微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物（圖1D）。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時(shí)間變化熒光圖像，可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球（“開啟”孔）和不與酶相關(guān)的微球（“關(guān)閉”孔）；補(bǔ)充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個(gè)免疫復(fù)合物同時(shí)檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計(jì)算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)（圖1D）。使用SiMoA，濃度是因此，我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個(gè)免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 醫(yī)療檢測數(shù)字ELISA微量樣本