所以，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白，很少采用此方法。有關(guān)單獨采用堿法提取膠原蛋白的報道不多，一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下，魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h，再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白，用10%的異丙醇溶液去除脂肪，0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d，現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白，提取率為11.87%。注意，無論酸法或堿法，均可有效地提取膠原蛋白，有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液（pH3.0）和NaOH溶液（pH12.0）提取骨膠原蛋白，提取率基本相當。但是，這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性，而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進行適當處理，以避免對環(huán)境造成污染。膠原蛋白能保持較好的組織穩(wěn)定性和機械抗張強度、免疫原性測試為陰性，符合臨床應用。牡蠣膠原蛋白固體飲料
在實際提取過程中，不同提取方法之間往往相互結(jié)合，可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對原料給予高壓處理一段時間，使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性，便于分離提取。熱水提取法是將原料經(jīng)過除雜蛋白等前處理之后，在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或膠原蛋白水解物，使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。膠原蛋白的提取一般有三種方法：一是高壓輔助的物理方法；二是用溶劑預處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學方法，根據(jù)溶劑的不同，可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法；三是用酶的生物化學法。一般來說，高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取，而低溫抽提和酶法針對膠原的提取，但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。 湖北海參膠原蛋白原料廠家膠原蛋白分子經(jīng)水解后主要形成相對分子量較小的膠原多肽。
膠原的相對分子質(zhì)量大，電泳圖有3條泳帶，在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈，在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對分子質(zhì)量可達100kD，1個膠原分子相對分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測定方法常用SDS-PAGE，凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過濾色譜法測定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時間質(zhì)譜法測定比目魚皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在～。動物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2～7kD，比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測定其在水系中纖維的熱收縮溫度（Ts），或溶液中分子的熱變性溫度（Td）。Ts和Td之差一般在20～25℃，而Ts值較Td值容易測定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度，另外還與其亞氨基酸（脯氨酸和羥脯氨酸）的含量有關(guān)，尤其是羥脯氨酸含量，它們之間存在正相關(guān)，冷水性魚類的羥脯氨酸含量比較低，所以冷水性魚類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚類，而又都低于陸生動物。但魚皮膠原蛋白與魚肉膠原蛋白相比，其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右，這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測定了多種魚皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。
膠原蛋白是生物高分子，動物結(jié)締組織中的主要成分，也是哺乳動物體內(nèi)含量較多、分布較廣的功能性蛋白，占蛋白質(zhì)總量的25%～30%，某些生物體甚至高達80%以上。 畜禽源動物組織是人們獲取天然膠原蛋白及其膠原肽的主要途徑，但由于相關(guān)畜類疾病和某些宗教信仰限制了人們對陸生哺乳動物膠原蛋白及其制品的使用，現(xiàn)今正在逐步轉(zhuǎn)向海洋生物中開發(fā)。歐洲食品安全局（EFSA）已證實了即使是動物骨骼來源的膠原蛋白也不存在傳染瘋牛病和其它相關(guān)疾病的可能。補充膠原三肽，能更有效的將皮膚細胞撐起，結(jié)合保濕和抑制皺紋的作用。
交聯(lián)指使膠原分子內(nèi)部和分子間通過共價健結(jié)合提高膠原纖維的張力和穩(wěn)定性的方法。該法又分為物理方法、化學方法和低溫等離子體法，生物學方法；其中物理方法、化學方法是較常用的交聯(lián)改性方法，生物學方法改性膠原蛋白主要在研究有關(guān)動物老化的生命現(xiàn)象中涉及，在研制膠原基生物醫(yī)學材料中少見報道。[74][127]物理方法通過物理手段對膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水、λ射線照射和熱交聯(lián)等方法。膠原溶液如被紫外線等照射，將在分子間產(chǎn)生交聯(lián)，粘度增加，生成凝膠。常用的紫外線交聯(lián)膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上，距離254nm紫外燈20cm高度，照射1～5h。對紫外線照射的膠原膜進行力學性能和膠原酶試驗表明：交聯(lián)膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均明顯高于未交聯(lián)膠原膜。[128]重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法，該法是通過脫水導致膠原分子間交聯(lián)，從而增加變性溫度，改善膠原的性能。改性后膠原膜生物相容性提高，降低了水溶性，影響了膜與成骨細胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的優(yōu)點是可避免外源性有毒化學物質(zhì)進入膠原內(nèi)，缺點是膠原膜交聯(lián)度低，且難以獲得均勻一致的交聯(lián)。 作用營養(yǎng)性、修復性、保濕性、親和性。山東大豆膠原蛋白飲品
膠原蛋白保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性，改善皮膚細胞生存環(huán)境和促進皮膚組織的新陳代謝。牡蠣膠原蛋白固體飲料
在水產(chǎn)動物體內(nèi)膠原蛋白含量高于陸生動物，如鰱魚、鳙魚和草魚魚皮的蛋白質(zhì)含量分別為、，均高于各自相應魚肉的蛋白質(zhì)含量：、。而魚皮中的膠原含量比較高可超過其蛋白質(zhì)總量的80%，較魚體的其它部位要高許多，有研究報道真鯛魚皮中膠原蛋白占粗蛋白的，鰻鱺則高達。如此高的含量意味著得率也高，如小鮪鰹；日本海鱸；香魚；黃海鯛；竹莢魚（均以干重計）。但膠原蛋白的種類要少得多，已從魚類中分離鑒定出的膠原類型有：比較廣分布在真皮、骨、鱗、鰾、肌肉等處的I型、軟骨和脊索的Ⅱ型和Ⅺ型以及肌肉的V型。而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。此外，還發(fā)現(xiàn)ⅩⅧ型膠原，然而哺乳動物中含量比較豐富的Ⅲ型膠原，在水產(chǎn)動物中尚未發(fā)現(xiàn)。其中只有Ⅰ型膠原蛋白的價格人們才可以接受；其它類型的膠原如Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等只在研究中制備，由于價格昂貴都不宜于大量生產(chǎn)。 牡蠣膠原蛋白固體飲料
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