采用酶法提取膠原蛋白時，必須嚴(yán)格控制提取條件：首先，酶作用時間必須適當(dāng)。如果時間過短，膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中，影響提取率；如果酶作用時間過長，膠原蛋白會水解過度，產(chǎn)生過多的苦味小分子低聚肽，不僅會增加分離純化的難度，也會影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次，酶解溫度要適宜。溫度過低，酶的作用效果不明顯；溫度過高會引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報道，當(dāng)介質(zhì)pH略低于中性時，膠原蛋白的變性溫度為40～41℃，當(dāng)介質(zhì)pH為酸性時，膠原蛋白的變性溫度為38～39℃，而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7～12℃。所以，如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性，在提取過程中應(yīng)使提取溫度低于變性溫度。第三，需選用適當(dāng)?shù)拿?。一般從陸生哺乳動物組織中提取膠原蛋白時，采用胃蛋白酶在其較適作用溫度下進(jìn)行提取是合理的，但對于魚類等水生動物，由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動物低，因此許多蛋白酶便不適用，如果在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產(chǎn)物中。 需要的膠原蛋白，其實是一種由3個氨基酸分子組成的膠原蛋白即“膠原三肽”。四川大豆膠原蛋白功效和作用
膠原蛋白的熱變性溫度可以通過測定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來確定。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中，并配制成一定濃度的溶液，然后用烏式黏度計測量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時間后的增比黏度，以增比黏度對溫度作圖，當(dāng)增比黏度變化50%時所對應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測定。有人測得鱸魚、鯽魚和鳙魚魚皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃，它們的棲息水溫分別為26～27、29和32℃，亞氨基酸含量分別為、，與3種魚皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成，即[α1(Ⅱ)]3，富含羥賴氨酸，并且糖化率高，含糖量可達(dá)4%，是軟骨中的主要膠原。另外，即使同一生物，皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一，像來自日本海鱸、鮐魚、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃，而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時的溶解度不同。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。 安徽海鯛魚膠原蛋白廠家右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu)，使膠原具有很高的拉伸強度。
將膠原蛋白和聚乙烯吡咯烷酮溶在檸檬酸緩沖液里制得膠原蛋白-PVP聚合物（C-PVP），用于受傷骨骼的加固不僅效果好，安全性也高，即使長周期的連續(xù)用藥，不管是實驗還是臨床試驗都不表現(xiàn)出淋巴腫大、DNA損傷，不會引起肝和腎的代謝紊亂，也不誘發(fā)人體產(chǎn)生抗C-PVP的抗體。有人研究了膳食銅缺乏與老鼠心臟膠原蛋白含量之間的關(guān)系。通過SDS-PAGE分析，再用考馬斯亮藍(lán)染色，結(jié)果表明檢測改變了的膠原蛋白的額外代謝特征可預(yù)測銅缺乏；由于肝臟纖維化可減少蛋白質(zhì)含量，因此還可通過測定肝臟中膠原蛋白的含量來預(yù)測肝臟纖維化。Anoectochilusformosanus的水提取物（AFE）則可降低CCl4誘發(fā)的肝臟纖維化，降低肝臟膠原蛋白的含量。膠原蛋白還是鞏膜的主要成分，對眼睛的作用也非常重要，如果鞏膜中膠原蛋白的合成減少而降解增加就會導(dǎo)致近視。
天然高分子材料中相當(dāng)有代表性的是天然蛋白質(zhì)和天然多糖，多糖主要有軟骨素、HA（透明質(zhì)酸）、殼聚糖、肝素等，多糖復(fù)合材料比較集中于可吸收性外科縫線、藥物釋放的載體、皮膚替代物、透析膜、止血劑、醫(yī)用引導(dǎo)組織再生材料、骨替代材料、組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架。膠原作為醫(yī)用生物材料，較重要的特點在于其低免疫原性，與其它具有免疫原性的蛋白質(zhì)相比，膠原蛋白的免疫原性非常低。人們甚至曾認(rèn)為膠原不具有抗原性，研究表明：膠原具有低免疫原性，不含端肽時免疫原性尤其低。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解，但能被動物膠原酶斷裂。
氨基酸分析表明，，每1000個氨基酸殘基含有309個甘氨酸，其次為谷氨酸、脯氨酸和丙氨酸，分別為98、82和82個殘基，羥基脯氨和羥基賴氨酸數(shù)也較較高別為40和27。外傘中高的膠原蛋白含量表明水母資源是一個潛在的膠原蛋白源。Ⅰ型膠原分子長度約300nm，直徑約，呈棒狀，由三條肽鏈組成，其中有兩條α(Ⅰ)鏈，一條Ⅰ型膠原蛋白的電泳圖譜[29]α(Ⅱ)鏈。對機體功能作用較強。α(Ⅰ)鏈和α(Ⅱ)鏈之間的氨基酸序列只有微小的差異。有人利用Ⅰ型膠原蛋白的電腦模型來模擬結(jié)締組織的外基質(zhì)結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，用其它一些基團取代Ⅰ型膠原蛋白兩條鏈上氨基乙酸就會導(dǎo)致骨合成異常。第3條α鏈多存在于絕大多數(shù)真骨魚類，尤其是魚皮，其他陸生脊椎動物沒有。由3條異種α鏈形成的單一型雜分子α1(Ⅰ)α2(Ⅰ)α3(Ⅰ)組成，而非[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)。有人研究了黑石首魚和羊頭海鯛的骨和鱗的酸性膠原蛋白(ASC)的電泳類型，發(fā)現(xiàn)在電泳譜帶上可以清楚地看到β、γ、α1和α2組分，且α1的分子量為130kD，α2的分子量為110kD。因此，在某些魚類中，與其他組織，如肌肉和膀胱相比較，魚皮膠原蛋白中的α3(Ⅰ)鏈更適宜傳遞。 膠原蛋白分子經(jīng)水解后主要形成相對分子量較小的膠原多肽。云南小分子膠原蛋白口服液
而且膠原蛋白對環(huán)境的污染也較小。四川大豆膠原蛋白功效和作用
免疫學(xué)分析和研究結(jié)果表明，使用膠原加完全弗氏佐劑，能對膠原產(chǎn)生多克隆和單克隆抗體。由T細(xì)胞啟動的對膠原蛋白免疫反應(yīng)的證據(jù)是，位于重要組織相容性（H-2）部位上ⅠA或ⅠB亞區(qū)的免疫反應(yīng)基因已被鑒定。膠原蛋白免疫原性的臨床評價通常是皮膚過敏性測試（細(xì)胞免疫指數(shù)，遲發(fā)性Ⅳ型反應(yīng)）和由反應(yīng)型抗體的存在（體液免疫指數(shù)）來確定的。實踐證明，在患者身上進(jìn)行這兩種評價是合理的。在治好前，用過敏劑量的植入性膠原對患者進(jìn)行皮試，大約3%有潛在的反應(yīng)，反復(fù)多次處理的患者，大約1%～2%會產(chǎn)生遲發(fā)性過敏性的臨床病狀。典型的癥狀包括局部水腫和紅斑反應(yīng)，有的還伴有硬化和瘙癢，持續(xù)時間4～6個月，個別甚至可達(dá)1年以上。四川大豆膠原蛋白功效和作用
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