所以，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白，很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多，一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下，魚(yú)骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h，再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白，用10%的異丙醇溶液去除脂肪，0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d，現(xiàn)在得到無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白，提取率為11.87%。注意，無(wú)論酸法或堿法，均可有效地提取膠原蛋白，有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液（pH3.0）和NaOH溶液（pH12.0）提取骨膠原蛋白，提取率基本相當(dāng)。但是，這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性，而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理，以避免對(duì)環(huán)境造成污染。膠原蛋白，就選海南省華上生物科技有限公司，有需求可以來(lái)電咨詢！山東海鯛魚(yú)膠原蛋白液體飲品
膠原蛋白的熱變性溫度可以通過(guò)測(cè)定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來(lái)確定。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中，并配制成一定濃度的溶液，然后用烏式黏度計(jì)測(cè)量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時(shí)間后的增比黏度，以增比黏度對(duì)溫度作圖，當(dāng)增比黏度變化50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過(guò)拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測(cè)定。有人測(cè)得鱸魚(yú)、鯽魚(yú)和鳙魚(yú)魚(yú)皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃，它們的棲息水溫分別為26～27、29和32℃，亞氨基酸含量分別為、，與3種魚(yú)皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成，即[α1(Ⅱ)]3，富含羥賴氨酸，并且糖化率高，含糖量可達(dá)4%，是軟骨中的主要膠原。另外，即使同一生物，皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一，像來(lái)自日本海鱸、鮐魚(yú)、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃，而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時(shí)的溶解度不同。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。河北海鯛魚(yú)膠原蛋白液體飲品海南省華上生物科技有限公司致力于提供膠原蛋白，有想法可以來(lái)我司咨詢！
將膠原蛋白和聚乙烯吡咯烷酮溶在檸檬酸緩沖液里制得膠原蛋白-PVP聚合物（C-PVP），用于受傷骨骼的加固不僅效果好，安全性也高，即使長(zhǎng)周期的連續(xù)用藥，不管是實(shí)驗(yàn)還是臨床試驗(yàn)都不表現(xiàn)出淋巴腫大、DNA損傷，不會(huì)引起肝和腎的代謝紊亂，也不誘發(fā)人體產(chǎn)生抗C-PVP的抗體。有人研究了膳食銅缺乏與老鼠心臟膠原蛋白含量之間的關(guān)系。通過(guò)SDS-PAGE分析，再用考馬斯亮藍(lán)染色，結(jié)果表明檢測(cè)改變了的膠原蛋白的額外代謝特征可預(yù)測(cè)銅缺乏；由于肝臟纖維化可減少蛋白質(zhì)含量，因此還可通過(guò)測(cè)定肝臟中膠原蛋白的含量來(lái)預(yù)測(cè)肝臟纖維化。Anoectochilusformosanus的水提取物（AFE）則可降低CCl4誘發(fā)的肝臟纖維化，降低肝臟膠原蛋白的含量。膠原蛋白還是鞏膜的主要成分，對(duì)眼睛的作用也非常重要，如果鞏膜中膠原蛋白的合成減少而降解增加就會(huì)導(dǎo)致近視。
可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法，其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白，實(shí)際操作都是通過(guò)復(fù)合法來(lái)達(dá)到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl；離心法常選用制備型低溫超速離心機(jī)；電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE），該法既可用于膠原蛋白的分離純化，還可用來(lái)測(cè)定膠原蛋白分子的相對(duì)分子質(zhì)量。像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì)，然后往沉淀中10%的胃蛋白酶，在4℃的條件下消化24h，以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL，使它終濃度達(dá)到，靜止過(guò)夜，再離心，現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白。膠原蛋白能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測(cè)試為陰性，符合臨床應(yīng)用。
在實(shí)際提取過(guò)程中，不同提取方法之間往往相互結(jié)合，可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對(duì)原料給予高壓處理一段時(shí)間，使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性，便于分離提取。熱水提取法是將原料經(jīng)過(guò)除雜蛋白等前處理之后，在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或膠原蛋白水解物，使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。膠原蛋白的提取一般有三種方法：一是高壓輔助的物理方法；二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法，根據(jù)溶劑的不同，可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法；三是用酶的生物化學(xué)法。一般來(lái)說(shuō)，高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取，而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取，但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。海南省華上生物科技有限公司是一家專業(yè)提供膠原蛋白的公司。黑龍江玻尿酸膠原蛋白飲品
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