酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后，需用一些蛋白酶，如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解，得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種：動物蛋白酶（如胰蛋白酶，胃蛋白酶），植物蛋白酶（如木瓜蛋白酶，菠蘿蛋白酶），微生物蛋白酶（如堿性蛋白酶，中性蛋白酶）。在對酶法水解膠原蛋白的研究中，以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進(jìn)行限制性降解，即將末端肽切割下來，由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的，末端肽被切下后，含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來。用酶處理，可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽，提高膠原蛋白的產(chǎn)率；而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)，保持其特性。影響酶提取的因素有很多，如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中，大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白，較多的是使用胃蛋白酶提取，有機(jī)酸多為乙酸。 作用營養(yǎng)性、修復(fù)性、保濕性、親和性。北京牡蠣膠原蛋白液體飲品
膠原有三種類型的抗原分子：首先類是膠原肽鏈非螺旋的端肽，在天然和變性膠原中均存在。由于2個不同種類的哺乳動物中間的膠原蛋白，其整個氨基酸序列變化不是很大，而且膠原蛋白的三螺旋區(qū)域有高度的進(jìn)化穩(wěn)定性，但在非螺旋的末端區(qū)域中有很大的變化性，在這區(qū)域中幾乎50%以上的氨基酸殘基表現(xiàn)出種屬性變化，大量的研究和生產(chǎn)都集中在如何完全去除端肽，只要去除端肽就認(rèn)為是安全的。第二類是膠原的三股螺旋的構(gòu)象，只存在于天然膠原分子中，即位于天然膠原蛋白的三螺旋結(jié)構(gòu)中的抗原決定簇，會在分離和純化過程中暴露出來，尤其是含α1和α2單鏈暴露出的中間端情況下更為明顯。第三類是α-鏈螺旋區(qū)的氨基酸順序，只出現(xiàn)在變性膠原中。湖北深海鱈魚膠原蛋白廠家這些食物中的膠原蛋白分子量非常大，極不容易被人體吸收。
化學(xué)方法比物理方法改。聯(lián)度高，且能獲得均勻一致的交聯(lián)，對調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原，以提高其交聯(lián)度、力學(xué)性能及生物相容性?；瘜W(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等，其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑，大量實驗證明：戊二醛能提供有效交聯(lián)，但有細(xì)胞毒性，且其用量難以控制。另外，隨著交聯(lián)度的增加，吸水能力和膨脹度卻會降低。?；B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等，不會引入明顯的毒性，且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報道中，多使用單一交聯(lián)劑對膠原蛋白交聯(lián)改性，但也有使用混合交聯(lián)劑的，如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題，篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法，可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動物實驗表明，經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測試為陰性，符合臨床應(yīng)用。
有人對海參膠原研究發(fā)現(xiàn)，刺參體壁含蛋白，其中70%為膠原蛋白。氨基酸分析，膠原富含丙氨酸和羥脯氨酸，但羥賴氨酸含量較少，SDS電泳及SP凝膠柱分析發(fā)現(xiàn)其膠原組成為(α1)2α2。還有人從仿刺參（）提取膠原蛋白，利用EDTA和Tris-HCl浸泡溶漲，用氫氧化鈉除去雜質(zhì)和非膠原蛋白，采用胃蛋白酶促溶提取粗制膠原，通過鹽析和透析獲取精致膠原蛋白，并進(jìn)一步利用SephacrylS-300HR凝膠過濾和DEAE-52陰離子交換除去多糖，獲取膠原蛋白純品。SDS-PAGE電泳表明膠原分子的組成為(α1)3，且α鏈類似于脊椎動物Ⅰ型膠原的α1鏈，熱收縮溫度為57℃，低于牛皮膠原5℃。還有人對采自日本Senzaki海灣的Stomolopusmeleagri水母的外傘組織進(jìn)行了分析。整個中膠層被分成三部分，利用醋酸首先將凍干的水母中膠層分為酸溶性蛋白和酸不溶性物質(zhì)，利用NaCl溶液將酸溶性蛋白分為酸溶性膠原蛋白和酸溶性非膠原蛋白，而不溶入醋酸的中膠層經(jīng)胃蛋白酶處理后大多變?yōu)榭扇苄缘哪z原質(zhì)。然后利用氨基酸分析儀對分離得到的三部分的組成分別進(jìn)行分析。發(fā)現(xiàn)該水母外傘中膠原蛋白含量很高，大約占干重的。經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析其膠原蛋白是由三個獨特α鏈組成。 ！膠原蛋白與膠原肽均具有保濕的作用。
由于氨基酸組成和交聯(lián)度等方面的差異，使得水產(chǎn)動物尤其是其加工廢棄物——皮、骨、鱗中所含有的豐富的膠原蛋白具有很多牲畜膠原蛋白所沒有的優(yōu)點，另外來源于海洋動物的膠原蛋白在一些方面明顯優(yōu)于陸生動物的膠原蛋白，比如具有低抗原性、低過敏性等特性。因此水產(chǎn)膠原蛋白可能逐步替代陸生動物膠原蛋白。膠原蛋白種類較多，常見類型為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅴ型和Ⅺ型。膠原蛋白因具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性，因此在食品、醫(yī)藥、組織工程、化妝品等領(lǐng)域獲得比較廣的應(yīng)用。氨基酸分子進(jìn)入人體后，合成膠原蛋白，較終被人體吸收。吉林海參膠原蛋白哪個牌子好
羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。北京牡蠣膠原蛋白液體飲品
酸法處理時，反應(yīng)強(qiáng)烈，水解徹底，多生成氨基酸混合物，而且使用酸提取時，根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同，可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞，絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞，且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因此，酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時間等影響因素。由于各種不足，酸法很少單獨使用，一般和酶法配合。比如以豬皮為原料，在檸檬酸（）和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加（）處理一段時間，然后再用NaCL鹽析，現(xiàn)在提取率為，提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料，在，在4℃，20000r條件下離心20min，現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析，之后透析，再用NaCL鹽析，現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。 北京牡蠣膠原蛋白液體飲品
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