化學(xué)方法比物理方法改。聯(lián)度高,且能獲得均勻一致的交聯(lián),對(duì)調(diào)節(jié)、控制膠原的各性質(zhì)均有效。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原,以提高其交聯(lián)度、力學(xué)性能及生物相容性?;瘜W(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián)、側(cè)鏈的修飾、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛、己異二氰酸酯、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑,大量實(shí)驗(yàn)證明:戊二醛能提供有效交聯(lián),但有細(xì)胞毒性,且其用量難以控制。另外,隨著交聯(lián)度的增加,吸水能力和膨脹度卻會(huì)降低。?;B氮化物、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等,不會(huì)引入明顯的毒性,且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見(jiàn)報(bào)道中,多使用單一交聯(lián)劑對(duì)膠原蛋白交聯(lián)改性,但也有使用混合交聯(lián)劑的,如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問(wèn)題,篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法,可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機(jī)械抗張強(qiáng)度、免疫原性測(cè)試為陰性,符合臨床應(yīng)用。在這些酶的較適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。湖北大豆膠原蛋白肽
膠原的相對(duì)分子質(zhì)量大,電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對(duì)分子質(zhì)量可達(dá)100kD,1個(gè)膠原分子相對(duì)分子質(zhì)量為300kD。多肽分子量的測(cè)定方法常用SDS-PAGE,凝膠色譜法以及質(zhì)譜法。有人采用凝膠過(guò)濾色譜法測(cè)定脫鉻革屑中膠原水解產(chǎn)物分子量分布在。飛行時(shí)間質(zhì)譜法測(cè)定比目魚(yú)皮膠原寡肽分子量的分布主要集中在~。動(dòng)物蛋白酶水解后的膠原多肽的分子量在2~7kD,比植物蛋白酶水解的膠原多肽分子量范圍更廣。膠原的熱穩(wěn)定性是指測(cè)定其在水系中纖維的熱收縮溫度(Ts),或溶液中分子的熱變性溫度(Td)。Ts和Td之差一般在20~25℃,而Ts值較Td值容易測(cè)定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度,另外還與其亞氨基酸(脯氨酸和羥脯氨酸)的含量有關(guān),尤其是羥脯氨酸含量,它們之間存在正相關(guān),冷水性魚(yú)類的羥脯氨酸含量比較低,所以冷水性魚(yú)類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚(yú)類,而又都低于陸生動(dòng)物。但魚(yú)皮膠原蛋白與魚(yú)肉膠原蛋白相比,其真皮的Td要比肌肉的低1℃左右,這與肌肉膠原中脯氨酸的羥基化率較真皮膠原高有關(guān)。有人測(cè)定了多種魚(yú)皮可溶性膠原蛋白的氨基酸組成。山東骨膠原蛋白口服液改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝。
膠原蛋白肽的功效與作用:
1、鎖水美白:魚(yú)類膠原蛋白肽可豐滿真皮層中的膠原蛋白曾,將皮膚細(xì)胞支撐起來(lái),能***鎖住水分,防止水分流失,保持皮膚濕潤(rùn)嫩滑,并且含有大量的羥基,不僅可以改善皮膚的亮度,還具有增白作用;2、預(yù)防、淡化色斑:魚(yú)膠原蛋白肽中的多肽可以讓皮膚細(xì)胞之間的粘結(jié)更加緊密,不給皮膚黑色素、***有藏身之地,并且膠原蛋白還可以阻止絡(luò)氨酸轉(zhuǎn)化成黑色素,有效防止黑色素的沉淀,讓皮膚色斑得到改善。3、延緩衰老:保養(yǎng)胸部:可以修復(fù)破損老化的彈性纖維網(wǎng),恢復(fù)皮膚的彈性,使胸部更具彈性。另外,膠原蛋白可以消除體內(nèi)的自由基,防止氧化并減少皮膚老化。
酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過(guò)程中色氨酸也會(huì)全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時(shí)間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。膠原蛋白保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝。
隨著年齡的增長(zhǎng),彈性蛋白的生物合成不僅會(huì)減慢,皮膚中現(xiàn)有的彈性纖維也會(huì)開(kāi)始退化,并且會(huì)在現(xiàn)有的彈性蛋白中積聚。這意味著你的皮膚會(huì)失去反彈能力。另外外在的太陽(yáng)損傷(光損傷或光老化)會(huì)加劇了彈性蛋白的降解,導(dǎo)致大多數(shù)彈性蛋白纖維在皮膚中出現(xiàn)異常,這就是為什么老化的皮膚看起來(lái)皺紋,松弛和松散。而且皮膚失去的膠原蛋白和彈性蛋白越多,皮膚上出現(xiàn)的皺紋和細(xì)紋就越多,這就是為什么提高皮膚中的膠原蛋白和彈性蛋白水平非常重要的原因。人體的吸收是以肽的方式進(jìn)行,食用蛋白肽的吸收利用率可達(dá)100%。吉林大豆膠原蛋白原料廠家
膠原蛋白肽是**適宜人體吸收的分子量。湖北大豆膠原蛋白肽
交聯(lián)指使膠原分子內(nèi)部和分子間通過(guò)共價(jià)健結(jié)合提高膠原纖維的張力和穩(wěn)定性的方法。該法又分為物理方法、化學(xué)方法和低溫等離子體法,生物學(xué)方法;其中物理方法、化學(xué)方法是較常用的交聯(lián)改性方法,生物學(xué)方法改性膠原蛋白主要在研究有關(guān)動(dòng)物老化的生命現(xiàn)象中涉及,在研制膠原基生物醫(yī)學(xué)材料中少見(jiàn)報(bào)道。[74][127]物理方法通過(guò)物理手段對(duì)膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水、λ射線照射和熱交聯(lián)等方法。膠原溶液如被紫外線等照射,將在分子間產(chǎn)生交聯(lián),粘度增加,生成凝膠。常用的紫外線交聯(lián)膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上,距離254nm紫外燈20cm高度,照射1~5h。對(duì)紫外線照射的膠原膜進(jìn)行力學(xué)性能和膠原酶試驗(yàn)表明:交聯(lián)膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均明顯高于未交聯(lián)膠原膜。[128]重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法,該法是通過(guò)脫水導(dǎo)致膠原分子間交聯(lián),從而增加變性溫度,改善膠原的性能。改性后膠原膜生物相容性提高,降低了水溶性,影響了膜與成骨細(xì)胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的優(yōu)點(diǎn)是可避免外源性有毒化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入膠原內(nèi),缺點(diǎn)是膠原膜交聯(lián)度低,且難以獲得均勻一致的交聯(lián)。湖北大豆膠原蛋白肽
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