不同分子量分布膠原蛋白溶液的黏度與溶質(zhì)濃度、溶劑、pH、溫度和外加電解質(zhì)有關(guān)。在等電點(diǎn)時(shí)膠原蛋白溶液的黏度比較低,pH值低于或高于等電點(diǎn)時(shí),膠原蛋白及多肽均將帶一定電荷,溶液的黏度相應(yīng)增大,離等電點(diǎn)越遠(yuǎn),溶液的黏度越大;不同分子量分布膠原蛋白及多肽溶液的黏度均隨溫度升高而下降。膠原蛋白分子量越大,濃度越大,溶液的黏度越高,高分子量膠原蛋白溶液的黏度隨濃度增加呈指數(shù)上升,而低分子量膠原蛋白溶液的黏度則隨濃度增加近似直線上升;在膠原蛋白及多肽溶液中加入電解質(zhì)會(huì)導(dǎo)致其黏度明顯上升。膠原蛋白的水解產(chǎn)物含有多種氨基酸,其中以甘氨酸較為豐富。其次為丙氨酸、谷氨酸和精氨酸,半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及蛋氨酸等必需氨基酸含量低,因此,膠原蛋白屬不完全蛋白質(zhì)。水解豬皮膠原所得的肽類產(chǎn)物中含有19種氨基酸,其中包括7種成人必需氨基酸和2種幼兒必需的半必需氨基酸;而且氨基酸總量高達(dá)90%以上。在八種人體必需氨基酸中含有六種:異亮氨酸(Ile)為,亮氨酸(Leu)和苯丙氨酸(Phe)為,纈氨酸(Val),蘇氨酸(Thr)為,賴氨酸(Lys)為。膠原三肽的用途化妝品中的作用保濕、滋養(yǎng)、亮膚、緊膚、防皺、修復(fù)。四川深海鱈魚膠原蛋白肽
所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d,現(xiàn)在得到無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白,提取率為11.87%。注意,無(wú)論酸法或堿法,均可有效地提取膠原蛋白,有人分別采用醋酸-鹽酸的混合酸液(pH3.0)和NaOH溶液(pH12.0)提取骨膠原蛋白,提取率基本相當(dāng)。但是,這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物活性,而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理,以避免對(duì)環(huán)境造成污染。山東牡蠣膠原蛋白功效和作用采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中。
膠原蛋白在身體中含量非常多,在強(qiáng)度上、結(jié)構(gòu)上和彈性上都起到重要作用,例如在皮膚、骨骼和筋膜中。從分子水平上來(lái)說(shuō),膠原蛋白有獨(dú)特的三螺旋結(jié)構(gòu),每一個(gè)蛋白質(zhì)分子由三個(gè)分開的肽鏈組 成。通過(guò)復(fù)雜的化學(xué)活性,這些結(jié)構(gòu)可以組成原纖維,到纖維束,***成為組織。
傷口被描述為“對(duì)組織的解剖或生理功能的破壞”。 在損傷發(fā)生時(shí),一系列涉及膠原的復(fù)雜活動(dòng)啟動(dòng),**終進(jìn)行組織修復(fù)(見上文)。 除了理解上述活動(dòng)之外,對(duì)于臨床醫(yī)生來(lái)說(shuō),了解膠原基質(zhì)與傷口的附著情況非常重要,它可以成為新組織生長(zhǎng)的模板,高效支持新組織生長(zhǎng)。
隨著年齡的增長(zhǎng),彈性蛋白的生物合成不僅會(huì)減慢,皮膚中現(xiàn)有的彈性纖維也會(huì)開始退化,并且會(huì)在現(xiàn)有的彈性蛋白中積聚。這意味著你的皮膚會(huì)失去反彈能力。另外外在的太陽(yáng)損傷(光損傷或光老化)會(huì)加劇了彈性蛋白的降解,導(dǎo)致大多數(shù)彈性蛋白纖維在皮膚中出現(xiàn)異常,這就是為什么老化的皮膚看起來(lái)皺紋,松弛和松散。而且皮膚失去的膠原蛋白和彈性蛋白越多,皮膚上出現(xiàn)的皺紋和細(xì)紋就越多,這就是為什么提高皮膚中的膠原蛋白和彈性蛋白水平非常重要的原因。膠原蛋白肽是一種細(xì)胞外蛋白質(zhì)。
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,對(duì)骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進(jìn)行了試驗(yàn)研究。結(jié)果表明:以胃蛋白酶對(duì)骨膠原的提取率比較高(),其次是胰蛋白酶(),接下來(lái)是中性蛋白酶(),現(xiàn)在是堿性蛋白酶()。并且通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)對(duì)胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明,胃蛋白酶提取的比較好條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,在,然后在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,現(xiàn)在骨膠原的回收率為,骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時(shí)對(duì)四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%、、3%)的試樣取樣檢測(cè),采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進(jìn)程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過(guò)程,現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時(shí)間提取率比較大。還有人用以新鮮豬皮為原料,在50-52℃的條件下用胰酶進(jìn)行水解,在酶用量為5000:1~10000:1,pH值為9,反應(yīng)2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解。結(jié)果表明:總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。由二個(gè)或二個(gè)以上氨基酸組成--蛋白肽。云南小分子膠原蛋白肽廠家
分子量大約在3000道爾頓,膠原蛋白肽可促進(jìn)骨的形成。四川深海鱈魚膠原蛋白肽
采用酶法提取膠原蛋白時(shí),必須嚴(yán)格控制提取條件:首先,酶作用時(shí)間必須適當(dāng)。如果時(shí)間過(guò)短,膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中,影響提取率;如果酶作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng),膠原蛋白會(huì)水解過(guò)度,產(chǎn)生過(guò)多的苦味小分子低聚肽,不僅會(huì)增加分離純化的難度,也會(huì)影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。其次,酶解溫度要適宜。溫度過(guò)低,酶的作用效果不明顯;溫度過(guò)高會(huì)引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報(bào)道,當(dāng)介質(zhì)pH略低于中性時(shí),膠原蛋白的變性溫度為40~41℃,當(dāng)介質(zhì)pH為酸性時(shí),膠原蛋白的變性溫度為38~39℃,而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7~12℃。所以,如果要使提取的膠原蛋白具有良好的生物活性,在提取過(guò)程中應(yīng)使提取溫度低于變性溫度。第三,需選用適當(dāng)?shù)拿?。一般從陸生哺乳?dòng)物組織中提取膠原蛋白時(shí),采用胃蛋白酶在其較適作用溫度下進(jìn)行提取是合理的,但對(duì)于魚類等水生動(dòng)物,由于其膠原蛋白的變性溫度比陸生哺乳動(dòng)物低,因此許多蛋白酶便不適用,如果在這些酶的較適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中。四川深海鱈魚膠原蛋白肽
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