EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的價(jià)格是多少?江蘇品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
本試劑盒包含EdU法檢測(cè)所需要的所有組份,同時(shí)提供了藍(lán)色細(xì)胞核染料Hoechst33342,可以用來(lái)復(fù)染所有細(xì)胞核,也可用于細(xì)胞周期分析。使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè),也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對(duì)6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞(每孔500μl的Click反應(yīng)液)、96孔板培養(yǎng)的細(xì)胞(每孔50μl的Click反應(yīng)液)、每管細(xì)胞數(shù)量為10-100萬(wàn)的流式細(xì)胞儀檢測(cè)(每管500μl的Click反應(yīng)液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(cè)(每個(gè)樣品100-200μl的Click反應(yīng)液)浙江如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。
這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過(guò)程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。
這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案,整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。此外,該方法適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織切片,可用流式細(xì)胞術(shù)分析檢測(cè)EdUFlowCytometryKit594(BCK-FC594-100);可進(jìn)行HCS分析或進(jìn)行細(xì)胞裂解液微孔板檢測(cè)EdUHTSKit594(BCK-HTS594-20);也可適用于培養(yǎng)中的細(xì)胞,或通過(guò)注射方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的小動(dòng)物樣本,進(jìn)行體內(nèi)成像分析InVivoEdUClickKit594(BCK594-IV-IM-M)、流式細(xì)胞檢測(cè)或HCS高通量檢測(cè)。(共有488、555、594、647四種熒光染料可選)。使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。浙江如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
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該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。江蘇品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)