湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān)，比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等，但是檢測(cè)細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測(cè)遺傳物質(zhì)DNA的合成，這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號(hào)通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比，EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度上海東寰告訴您什么是EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí)，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。湖南EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些？

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過(guò)基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。

以及酶或熒光偶聯(lián)二抗，檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過(guò)免疫熒光檢測(cè)，后者通過(guò)熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記，且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)，操作安全簡(jiǎn)便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞，冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測(cè)法不同，EdU-Click檢測(cè)，如EdU-Click594（BCK-EDU594）無(wú)需進(jìn)行DNA變性來(lái)檢測(cè)摻入的EdU，而是通過(guò)一次快速、高度特異性的點(diǎn)擊反應(yīng)，將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過(guò)EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性，從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案，準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案，整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成，在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面，堪比多重分析方法。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何去使用呢？

EdU細(xì)胞增殖方法簡(jiǎn)單，方便，無(wú)需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。該方法無(wú)需DNA變性，無(wú)需抗原修復(fù)，無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè)，尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無(wú)需DNA變性，完全適用于各種顯微成像技術(shù)，在10X，20X，40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用范圍。浙江EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法，能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果，但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測(cè)靈敏度不是很高，通常適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒