在分子生物學(xué)研究中,核酸染色是檢測(cè)DNA和RNA的關(guān)鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經(jīng)典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應(yīng)用于核酸電泳、熒光分析等領(lǐng)域。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性EB是一種多環(huán)芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度增強(qiáng),雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強(qiáng)度分別可增強(qiáng)21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測(cè)到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測(cè)。多種應(yīng)用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實(shí)驗(yàn)。此外,EB還可與吖啶橙聯(lián)合使用,用于區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預(yù)制的儲(chǔ)存液,使用時(shí)只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時(shí),每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩(wěn)定的儲(chǔ)存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達(dá)1-2年。這種儲(chǔ)存條件使得EB溶液在實(shí)驗(yàn)室中易于保存和管理。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I具有特異性識(shí)別能力,能夠識(shí)別雙鏈DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列。Recombinant Human PBK/TOPK Protein,His Tag
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進(jìn)的熱啟動(dòng)Taq酶技術(shù),通過化學(xué)修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應(yīng)的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴(kuò)增,顯著提高了反應(yīng)的靈敏度,即使對(duì)于低豐度的靶基因,也能實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。例如,在檢測(cè)稀有突變基因時(shí),其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準(zhǔn)確識(shí)別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨(dú)特的緩沖體系經(jīng)過優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結(jié)合過程。在反應(yīng)過程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時(shí)增強(qiáng)引物與目標(biāo)模板的特異性結(jié)合能力。這使得在復(fù)雜的基因組背景下,目標(biāo)基因得以高效擴(kuò)增,從而顯著提高了qPCR反應(yīng)的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測(cè)中,這種高特異性優(yōu)勢(shì)尤為明顯,能夠避免因引物錯(cuò)配導(dǎo)致的非目標(biāo)基因擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。TFLLR可以利用現(xiàn)有的計(jì)算工具,如CRISPR design tools,預(yù)測(cè)gRNA的活性和特異性,以輔助實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 。
NTP Set Solution(脫氧核糖核苷三磷酸溶液套裝)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的基礎(chǔ)試劑,包含四種高純度的dNTP(dATP、dCTP、dTTP和dGTP),每種濃度均為100 mM。這種高濃度的溶液套裝為DNA合成提供了高質(zhì)量的原料,廣泛應(yīng)用于PCR、DNA測(cè)序、克隆以及體外DNA合成等領(lǐng)域。產(chǎn)品特點(diǎn)dNTP Set Solution (100 mM each) 提供了四種脫氧核苷三磷酸,每種濃度均為100 mM,能夠滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。這種高濃度設(shè)計(jì)不僅減少了實(shí)驗(yàn)中試劑的添加量,還降低了污染風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)便于實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用。此外,該套裝經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保純度和穩(wěn)定性,能夠?yàn)镈NA合成提供可靠的保障。dNTP Set Solution中的四種核苷酸是DNA聚合酶合成DNA鏈時(shí)的關(guān)鍵底物,其純度和濃度直接影響DNA合成的效率和準(zhǔn)確性。高純度的dNTP能夠減少雜質(zhì)干擾,降低錯(cuò)誤摻入率,從而提高實(shí)驗(yàn)的成功率和重復(fù)性。應(yīng)用場(chǎng)景dNTP Set Solution是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的重要試劑,廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR反應(yīng):dNTP是PCR反應(yīng)的關(guān)鍵組分之一,為DNA鏈的延伸提供了必要的核苷酸。在常規(guī)PCR、多重PCR和實(shí)時(shí)定量PCR中,dNTP的純度和濃度直接影響擴(kuò)增效率和特異性。
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Taq PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,廣泛應(yīng)用于常規(guī)PCR擴(kuò)增。
高靈敏度與特異性該試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系和新一代TaqDNA聚合酶,結(jié)合高效的逆轉(zhuǎn)錄酶,能夠在低濃度RNA樣本中實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)。其特異性高,即使在復(fù)雜的樣本中,也能通過熔解曲線分析呈現(xiàn)單一峰,避免非特異性擴(kuò)增。防污染設(shè)計(jì)OneStepRT-qPCRSYBRGreenKit(UDGPlus)內(nèi)置dUTP/UDG防污染系統(tǒng),能夠有效降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。這一特性在病毒檢測(cè)和低豐度基因表達(dá)分析中尤為重要。操作簡(jiǎn)便該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)整合在同一管中完成,避免了多次開蓋操作,減少了人為誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),預(yù)混液的設(shè)計(jì)使得實(shí)驗(yàn)操作更加便捷,用戶只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng)。示蹤染料輔助試劑盒中的反應(yīng)緩沖液含有惰性示蹤染料,通過顏色變化(如藍(lán)色與黃色混合后變?yōu)榫G色)直觀判斷樣本是否加入,提高了實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性。兼容性該試劑盒適用于多種qPCR儀器,并提供不同濃度的ROX校正染料,以滿足不同儀器的需求。Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。Kisspeptin-10
將MAGE-A3基因序列克隆到一個(gè)表達(dá)載體中,該載體通常包含有抗生物質(zhì)抗性基因、啟動(dòng)子、核糖體結(jié)合位點(diǎn)。Recombinant Human PBK/TOPK Protein,His Tag
產(chǎn)品特點(diǎn)50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強(qiáng)度在PCR過程中保持穩(wěn)定,不會(huì)因擴(kuò)增反應(yīng)而發(fā)生變化,因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號(hào)。其激發(fā)波長(zhǎng)為575 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm,與多數(shù)qPCR儀器的光學(xué)系統(tǒng)兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能夠在-20℃避光保存長(zhǎng)達(dá)2年,短期使用時(shí)可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實(shí)驗(yàn)中能夠提供一致的熒光信號(hào),減少因試劑變質(zhì)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。性能優(yōu)勢(shì)校正孔間誤差:qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號(hào)可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過校正這些非PCR相關(guān)的變化,顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性:通過使用ROX染料對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,實(shí)驗(yàn)人員可以在較少的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中獲得更精確的結(jié)果,從而節(jié)省時(shí)間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、Recombinant Human PBK/TOPK Protein,His Tag