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Ultra-Long DNA Polymerase 是一種專為超長片段擴(kuò)增設(shè)計(jì)的耐熱DNA聚合酶,具有鏈延伸能力和高保真性,能夠高效擴(kuò)增長達(dá)數(shù)十千堿基(kb)的DNA片段。這種聚合酶在基因組學(xué)研究中具有重要意義,尤其是在復(fù)雜基因組的完整組裝和超長測序領(lǐng)域。特點(diǎn)Ultra-Long DNA Polymerase 的重要優(yōu)勢在于其超長擴(kuò)增能力。它能夠在單次反應(yīng)中合成超過100 kb的DNA片段,甚至在某些優(yōu)化條件下,比較大讀長可達(dá)數(shù)百萬堿基。這種能力使其在填補(bǔ)基因組組裝中的缺口(gap)和實(shí)現(xiàn)端粒到端粒(T2T)基因組組裝方面表現(xiàn)出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能夠降低擴(kuò)增過程中的錯(cuò)誤率,這對于需要高精度的基因組學(xué)研究至關(guān)重要。它還具備3'-5'外切酶活性,能夠進(jìn)一步提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和可靠性。應(yīng)用Ultra-Long DNA Polymerase 在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大潛力。例如,在植物基因組學(xué)中,它被用于優(yōu)化超長DNA片段的提取和擴(kuò)增,成功實(shí)現(xiàn)了多個(gè)植物物種的高質(zhì)量T2T基因組組裝。通過結(jié)合牛津納米孔(Oxford Nanopore)測序技術(shù),Ultra-Long DNA Polymerase 能夠生成超長讀長的測序數(shù)據(jù),明顯提高了基因組組裝的完整性和準(zhǔn)確性。
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus):高效、特異且防污染的qPCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料、低濃度ROX校正染料以及UDG防污染系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異且防污染的基因定量檢測。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測靈敏度。低濃度ROX校正:含有低濃度ROX染料,適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。UDG防污染系統(tǒng):預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止交叉污染。操作簡便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)??焖俜磻?yīng):優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測,提高實(shí)驗(yàn)效率。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過qPCR實(shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因。PSA1 (141-150)熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點(diǎn)。它能夠在PCR過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況。
racil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl):高效防污染的熱敏型酶Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) 是一種來源于鱈魚的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),能夠特異性地催化水解DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA無作用。其比較大特點(diǎn)是熱敏感性,可在55℃下10分鐘內(nèi)完全失活,避免了常規(guī)UDG酶滅活后可能殘留的活性對含dU擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用。這種特性使其在PCR和RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。應(yīng)用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。RT-qPCR防污染:在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物,避免假陽性。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在PCR反應(yīng)中,建議在反應(yīng)體系中加入1 U/50 μL的UDG/UNG,以確保完全去除含dU的模板。此外,該酶在多數(shù)PCR反應(yīng)緩沖液中均有活性,但在高離子強(qiáng)度(>200 mM)下會被抑制。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真、高效擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個(gè)便捷、可靠的實(shí)驗(yàn)平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯(cuò)誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實(shí)驗(yàn)的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實(shí)驗(yàn)效率。預(yù)混液的無染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔(dān)心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Pfu DNA Polymerase的高保真性:Pfu DNA Polymerase因其3'-5'外切酶活性,在PCR中具有極高的保真性。
Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計(jì)。它通過結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來實(shí)現(xiàn)熱啟動功能。在室溫下,抑制劑與酶結(jié)合,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯(cuò)配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時(shí),抑制劑釋放,酶活性被啟動,確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,同時(shí)減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無需額外的高溫啟動步驟,簡化了實(shí)驗(yàn)操作。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場景,包括常規(guī)PCR、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義??傊琀ot-Start Taq DNA Polymerase 通過其獨(dú)特的熱啟動機(jī)制,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。Pfu DNA Polymerase具有3′-5′外切酶活性,能夠在DNA擴(kuò)增過程中糾正堿基錯(cuò)配,是Taq DNA Polymerase的6-8倍。Substance P (7-11)
E1通常被認(rèn)為是泛素化過程中的限速步驟,因?yàn)樗婕暗椒核氐募て鸷虯TP的水解。Recombinant Human ICAM-3/CD50 Protein,His Tag
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴(kuò)增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Recombinant Human ICAM-3/CD50 Protein,His Tag