Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein

來源: 發(fā)布時間:2024-11-22

pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實驗中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在免疫沉淀后切割染色質(zhì)DNA,以分析特定蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合位點。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質(zhì)-基因組互作研究技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在目標蛋白質(zhì)被抗體識別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標蛋白質(zhì)相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術(shù)相比傳統(tǒng)的ChIP-Seq具有實驗周期短、信噪比高、可重復(fù)性好以及細胞投入量低的優(yōu)勢,尤其適用于早期胚胎發(fā)育、干細胞、**以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。3.**染色質(zhì)免疫沉淀實驗**:pA-MNase在染色質(zhì)免疫沉淀實驗中用于染色質(zhì)片段化,它在核小體間DNAlinker上進行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質(zhì)乳化所帶來的負面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析實驗尤為重要。

泛素從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2的活性位點半胱氨酸殘基上,形成E2-泛素硫酯中間體。Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag

Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag,標準物質(zhì)

Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個步驟:1.**識別與結(jié)合**:-Cre重組酶首先識別并分別結(jié)合兩個LoxP序列的兩個反向重復(fù)序列,形成一個二聚體。2.**四聚體形成**:-兩個二聚體互相靠近,形成由四個Cre分子與兩個LoxP位點結(jié)合形成的四聚體復(fù)合物。3.**DNA切割與交換**:-Cre重組酶在每個LoxP位點的間隔序列中引導(dǎo)單鏈切割,產(chǎn)生帶有3’端羥基的斷裂。每個LoxP位點的兩個單鏈分別被切割。切割產(chǎn)生的自由3’端與對側(cè)的3’端進行交換和重連,形成Holliday交叉結(jié)構(gòu)。4.**分子重組與解旋**:-Holliday交叉結(jié)構(gòu)通過Cre酶的作用被解旋并重組,形成新的重組產(chǎn)物。這個過程導(dǎo)致兩個LoxP位點之間的DNA序列被刪除、反轉(zhuǎn)或易位,具體效果取決于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**條件性基因編輯**:-通過建立特異性Cre小鼠,該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動子驅(qū)動,可在特定細胞或組織或全身表達Cre重組酶。與帶有Lox位點的Flox小鼠雜交,子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠,實現(xiàn)條件性基因打靶(表達或敲除靶基因)。Recombinant Human Jagged 1/JAG1 Protein,His TagUBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶,其在蛋白質(zhì)降解、信號傳導(dǎo)、細胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。

Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag,標準物質(zhì)

磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**PCR產(chǎn)物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類等雜質(zhì),回收率高,產(chǎn)物純度好,可以直接應(yīng)用于PCR、連接、測序、NGS建庫等下游實驗。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合高通量工作站的自動化提取。3.**質(zhì)粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA,通過精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測序協(xié)議進行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來分離片段。5.**自動化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現(xiàn)高通量操作。6.**分子生物學(xué)研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,為遺傳病研究、篩查等提供了強有力的技術(shù)支持。

使用BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads(血液基因組DNA提取試劑盒,磁珠法)進行血液樣本中基因組DNA的提取,主要步驟如下:1.**實驗準備**:準備抗凝全血樣本(如EDTA抗凝血),移液器及無菌,15ml離心管,無水乙醇,70%乙醇,干凈的吸水紙,渦旋振蕩器,金屬浴/水浴,臺式離心機等。2.**樣本處理**:取適量血液樣本,根據(jù)試劑盒要求,可能需要將血液體積調(diào)整至特定量,例如200μl,并可能需要加入PBS緩沖液。3.**裂解血液細胞**:向血液樣本中加入蛋白酶K和細胞裂解液,渦旋混勻后,置于金屬浴或水浴中進行裂解,通常在65°C孵育10-15分鐘,并在此期間定期混勻。4.**DNA與磁珠結(jié)合**:向裂解后的樣本中加入異丙醇和磁珠懸浮液,渦旋混勻后,室溫放置一段時間,以便于基因組DNA與磁珠結(jié)合。5.**磁珠分離**:將樣本置于磁力架上,待磁珠聚集后,小心移除上清液,去除雜質(zhì)。6.**洗滌磁珠**:向磁珠中加入漂洗液和洗滌液,進行洗滌以去除殘留的蛋白質(zhì)和鹽分,然后再次使用磁力架分離磁珠,移除洗滌液。

泛素蛋白是一種在真核細胞中存在的小分子蛋白質(zhì),由76個氨基酸殘基組成,具有高度的保守性。

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蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**融合表達產(chǎn)物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產(chǎn)物,因此它同時具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結(jié)合,通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內(nèi)切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸,減少細胞裂解液的粘度,以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測序。5.**反應(yīng)條件**:MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學(xué)級,并在37°C下孵化。許多Probe qPCR Mix (2×)產(chǎn)品采用熱啟動DNA聚合酶,能減少非特異性擴增,提高反應(yīng)的靈敏度和特異性 。Recombinant Human SIRP alpha V4 Protein,His-Avi Tag

泛素蛋白的C末端通常通過酰胺鍵與靶蛋白的氨基團連接在一起,最常見的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團相連。Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag

BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種經(jīng)過改造的酶,它來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)DNA聚合酶I,通過重組技術(shù)在大腸桿菌中表達并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性,但不具有5'→3'的核酸外切酶活性,因此它在等溫擴增反應(yīng)中非常有用,如環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增(LAMP)和滾環(huán)擴增(RCA)等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**等溫擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強的鏈置換能力,適用于多種等溫擴增反應(yīng),這些反應(yīng)通常在50-68°C之間進行,比較好反應(yīng)溫度為65°C。2.**快速測序**:由于其高聚合酶活性,BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測序,特別是對于高GC含量的DNA模板或微量(納克量級)DNA模板的測序。3.**全基因組擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴增(WGA),這是一種在不需要熱循環(huán)儀的情況下擴增整個基因組DNA的技術(shù)。4.**高dUTP耐受性**:與BstDNAPolymerase2.0相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment在進行等溫擴增時不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力,這使得它在某些應(yīng)用中更具優(yōu)勢。Recombinant Human BCHE/ButyrylcholinesteraseProtein,His Tag