重慶高靈敏度超微量分光光度計試用

來源: 發(fā)布時間:2023-05-09

分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學、生物學、醫(yī)學、材料學、環(huán)境科學等科學研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)***產(chǎn)與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有***而重要的應用。分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
由于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生。超微量分光光度計近年來已經(jīng)替換普通的分光光度計成為分子生物學實驗室的新寵,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質(zhì)組學和基因組學等領(lǐng)域。
超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。重慶高靈敏度超微量分光光度計試用

朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據(jù)的基本原理。當一束單色光(指路由一種顏色的光)通過一均勻的溶液時,一部分被吸收,一部分透過。
朗伯比爾定律:A = abc
其意義為:當一束單色光通過一均勻溶液時,溶液對單色光的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。
A =abc 中,吸光系數(shù)a,表征吸光物質(zhì)的 靈敏度。a值越大,靈敏度越高。如果濃度的單位為物質(zhì)的量濃度(單位為:mol/L),則吸光系數(shù)a可以寫成ε ,ε稱為摩爾吸光系數(shù)。
由上式可知,當溶液層厚度b和吸光系數(shù)a固定時,吸光度A與溶液的濃度成線性關(guān)系。在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定比較大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,這是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件。
廣東全光譜波長超微量分光光度計樣品檢測每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。

Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein BCA檢測類型:
BCA是一種通過比色來檢測非純蛋白的濃度的方法,它通常用于稀釋的蛋白濃度檢測,以及那些在紫外區(qū)域含有吸收光雜質(zhì)的蛋白的濃度檢測。BCA法需要在蛋白定量前構(gòu)建一個標準曲線。
BCA法是檢測Cu+1離子的方法,在堿性環(huán)境下,Cu+2離子會被蛋白還原為Cu+1離子。兩個聯(lián)喹啉二羧酸BCA分子和一個Cu+1離子會形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情況下,以750nm波長的吸光值為基線,Cu-BCA形成的螯合物在562nm處有比較大吸光值。
常規(guī)檢測使用試劑/蛋白樣品的體積比為20:1,檢測濃度范圍為0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA)。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和80μlBCA試劑。
微量檢測使用試劑/樣品的體積比為1:1,可以檢測蛋白濃度范圍從0.01mg/ml至0.20mg/ml。要準備足夠的樣品來做基座檢測,建議使用10μl樣品和10μlBCA試劑(使用PCR管)。 
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準備標準品和構(gòu)建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致。

Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein Pierce 660nm檢測方式:
Protein Pierce 660nm主要用來定量檢測那些含有還原劑或者去污劑的總蛋白濃度,使用的的試劑/樣品體積比例為15:1。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和60μl試劑。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準備標準品和和構(gòu)建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致??梢詮脑噭┖猩a(chǎn)廠家購買用于構(gòu)建標準曲線的蛋白標準品(BSA)。
當使用4μl樣品和60μl試劑時,Pierce 660nm可以檢測的濃度范圍為50ug/ml到125ug/ml。
不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產(chǎn)生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強,反應后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應,產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時,方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結(jié)果差異較大,無可比性。
Micro Drop為一款全光譜波長超微量分光光度計。云南雙檢測模式超微量分光光度計核酸檢測

A260/A280:是核酸純度的指示值。重慶高靈敏度超微量分光光度計試用

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應用領(lǐng)域的不同可以分為:
(1)可見光分光光度計:用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計??稍?00nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外分光光度計:紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器??梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。
(3)紅外分光光度計:一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物**常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
(4)熒光分光光度計:熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領(lǐng)域。
(5)原子吸收分光光度計:該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
現(xiàn)今生命科學領(lǐng)域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。
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