應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，**后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會(huì)有***的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項(xiàng)編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基在使用前通過(guò)高壓或過(guò)濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細(xì)菌、***及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果。證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。楊浦區(qū)特色臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基地方
且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、***、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或***生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。血清主要作用1．提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2．提供***和各種生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)***（氫化可的松、**）、類(lèi)固醇***（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3．提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。4．提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。5．對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被***用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí)，粘度起到重要作用。奉賢區(qū)常見(jiàn)臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無(wú)病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)。
培養(yǎng)基化學(xué)分類(lèi)編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指一類(lèi)利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如，高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類(lèi)鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養(yǎng)基半組合培養(yǎng)基指一類(lèi)主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基物理分類(lèi)編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基一類(lèi)配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。
血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖x***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題1．血清的成份可能有幾百種之多，對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子、***和脂類(lèi)等尚未充分認(rèn)識(shí)，這給研究工作帶來(lái)許多困難。2．血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。3．對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)（成纖維細(xì)胞）同時(shí)***另一類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)（表皮細(xì)胞）。4．血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來(lái)自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌***等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，甚至造成細(xì)胞死亡。5．動(dòng)物個(gè)體不同，血清產(chǎn)地、批號(hào)不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。7．大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來(lái)源越來(lái)越困難。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求。
價(jià)格昂貴，是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對(duì)象，二是取材過(guò)程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無(wú)病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：1．牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。2．有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。3．證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4．血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。5．無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。6．對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。我國(guó)在對(duì)牛血清的質(zhì)量2000年版《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。包括蛋白質(zhì)含量，細(xì)菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)***，支持細(xì)胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語(yǔ)音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬(wàn)歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。浦東新區(qū)提供臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基創(chuàng)新服務(wù)
血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。楊浦區(qū)特色臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基地方
然后在同樣溫度下有光照和全黑暗下培養(yǎng)3周直至愈傷組織形成（兩種情況各置3瓶）。觀察愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)率。***分化及植株再生培養(yǎng)將誘導(dǎo)的愈傷組織按類(lèi)型分別轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基上,置于連續(xù)光照，溫度20-22℃條件下培養(yǎng)3周，統(tǒng)計(jì)愈傷組織再生植株情況。愈傷組織誘導(dǎo)的總體情況***愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)4周后，愈傷組織基本形成，即排除因生長(zhǎng)時(shí)間不夠而未形成愈傷的情況。具體情況見(jiàn)表一中所示。6瓶培養(yǎng)物均有愈傷形成，且都未發(fā)生污染，但誘導(dǎo)率幾乎各不相同。其中，在光照條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為，在黑暗條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為。由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，外植體即***葉片取得偏小，接種時(shí)可能已有部分外植體的大部分細(xì)胞脫水死亡，使整個(gè)實(shí)驗(yàn)的愈傷組織誘導(dǎo)率偏低,愈傷塊偏小。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI1640培養(yǎng)基是一個(gè)全營(yíng)養(yǎng)型培養(yǎng)基，***應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，如人骨髓瘤細(xì)胞、鼠雜交瘤細(xì)胞、人白細(xì)胞以及B細(xì)胞和T細(xì)胞。**初設(shè)計(jì)用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和人白血病細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)基編輯語(yǔ)音選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。楊浦區(qū)特色臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基地方
上海申啟生物科技有限公司位于上海市普陀區(qū)綏德路118弄60號(hào)4層、62號(hào)4層，是一家專(zhuān)業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)研制、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)活?lèi)醫(yī)療器械的銷(xiāo)售，微生物干粉培養(yǎng)基的生產(chǎn)加工（限綏德路118弄62號(hào)4層），醫(yī)用體外診斷試劑（限綏德路118弄60號(hào)4層），從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)，。公司。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù)，以誠(chéng)信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨，以建醫(yī)療器械的銷(xiāo)售產(chǎn)品為目標(biāo)，努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不僅*提供專(zhuān)業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)研制、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)活?lèi)醫(yī)療器械的銷(xiāo)售，微生物干粉培養(yǎng)基的生產(chǎn)加工（限綏德路118弄62號(hào)4層），醫(yī)用體外診斷試劑（限綏德路118弄60號(hào)4層），從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)，。，同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系，為客戶(hù)提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。上海申啟始終以質(zhì)量為發(fā)展，把顧客的滿(mǎn)意作為公司發(fā)展的動(dòng)力，致力于為顧客帶來(lái)***的技術(shù)開(kāi)發(fā)，技術(shù)研發(fā)，技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)t(yī)療器材。