原代肝細胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應用范圍。原代肝細胞(Primaryhepatocytes)是指從動物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點：1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致，酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度，可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性；2.較好保留酶水平和維持了肝細胞的完整形態(tài)和肝細胞體外代謝活性，真實反應了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究：4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究；5.評價藥物和外源性物質(zhì)對肝臟中細胞色素P450酶誘導作用并探討其誘導機制；6.預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用；7.研究藥物的細胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細胞體外培養(yǎng)和研究的相關技術對于提升相關試驗的成功率非常有幫助。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)質(zhì)量控制服務，包括細胞培養(yǎng)質(zhì)量檢測、細胞培養(yǎng)質(zhì)量評估等。北京獼猴原代肝細胞
原代肝細胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導產(chǎn)生的肝臟細胞或是cancer細胞系，原代肝細胞在造模的同時不需要復雜的對細胞進行重編程，以及誘導分化，可以更方便更快速的進行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細胞能夠更準確的反應體內(nèi)的真實情況，有數(shù)據(jù)表明，原代肝細胞比iPSC誘導產(chǎn)生的肝細胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍，同時這些細胞還保留了捐獻者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個優(yōu)勢在于，原代肝細胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型，因為原代細胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性，同時也具備其他兩種肝細胞在應對病原體時的生理反應。深圳羅非魚原代肝細胞培養(yǎng)原代肝細胞作為體外藥物代謝研究的“金標準”，在藥物代謝和毒理學研究中具有重要的意義。
貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞是酶誘導研究的重要模型，也是藥物代謝實驗的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評估藥物是否為酶的誘導劑。具體來說，研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準體外系統(tǒng)，然后將研究藥物與細胞共孵育，測定孵育后CYP酶的mRNA表達水平倍數(shù)變化，以評估藥物是否為酶的誘導劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機制，從而更好地指導臨床用藥。酶誘導是一種藥物相互作用的現(xiàn)象，指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性，從而導致合用的藥物代謝速率加快，使得原藥的血藥濃度下降，進而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見，因為許多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進行代謝，而酶誘導會影響這些代謝酶的活性，從而影響藥物的代謝。酶誘導的機制是通過影響肝臟細胞內(nèi)的CYP酶的表達和活性來實現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一，它能夠代謝許多藥物和毒物，從而使它們被代謝出體外。當某些化合物進入體內(nèi)后，它們會與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達，從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物，使其被代謝出體外。原代肝細胞依舊是目前理想的體外模型，是藥物代謝研究的重要組成部分。
原代肝細胞是指從肝臟中直接分離出來的細胞，這些細胞具有肝臟的特定功能，如合成膽汁、代謝藥物等。然而，原代肝細胞在體外培養(yǎng)時很難保持其原有的特性，而且無法傳代。這是因為原代肝細胞在體外培養(yǎng)時會失去其特定的細胞形態(tài)和功能，逐漸失活。 為了解決原代肝細胞無法傳代的問題，科學家們研究出了一種新的細胞類型，即肝祖細胞。肝祖細胞是一種可以傳代的細胞，它們可以分化成多種肝細胞類型，如肝細胞、膽管細胞等。這些細胞可以在體外培養(yǎng)中保持其特定的細胞形態(tài)和功能，從而成為一種重要的研究工具。 除了肝祖細胞，干細胞也被認為是一種可以傳代的細胞類型。干細胞具有自我更新和分化成多種細胞類型的能力，包括肝細胞。然而，干細胞在分化成肝細胞時，可能會失去一些肝臟的特定功能，因此在臨床應用中還需要進一步研究和改進。 原代肝細胞來自于新鮮肝臟，可以保持原有的特性和性狀，但是體外培養(yǎng)難度系數(shù)較大；干細胞培育分化較為容易，但是分化時會有特性的丟失。相信隨著技術的不斷改進，體外培育高質(zhì)量穩(wěn)定的肝細胞將不再是困擾技術人員的難題。立沃生物的原代肝細胞的分離技術門檻很高，需要特定的實驗室條件和技術，以及嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。
解決人工肝臟合成難題，原代肝細胞是理想的肝細胞源。目前，常用的肝細胞源有人原代肝細胞、動物原代肝細胞、liver cancer細胞系HepG2、HepaRG、永生化細胞以及干細胞等。其中，人原代肝細胞是理想的肝細胞源，因為它們具有完整的肝功能和生理特性，能夠更好地模擬人體肝臟的生理狀態(tài)。但是，由于人原代肝細胞的獲取和保存非常困難，且存在批次差異和有限的增殖能力，因此在實際應用中受到了一定的限制。 相比之下，動物原代肝細胞則具有更好的增殖能力和更便捷的獲取方式，但是由于動物肝臟與人肝存在一定的差異，因此其在模擬人體肝臟生理狀態(tài)方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG則是常用的liver cancer細胞系，它們具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性，但是存在致瘤風險，因此在臨床應用中需要謹慎使用。 永生化細胞則是通過基因工程技術將原代肝細胞轉(zhuǎn)化為無限增殖的細胞系，如HepG2.2.15和Huh7等。這些細胞系具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性，但是存在一定的局限性和風險。 綜上所述，原代肝細胞是理想的肝細胞源，選擇合適的肝細胞源需要綜合考慮其功能、增殖能力、安全性等因素，以期達到想要的生物人工肝效果。原代肝細胞能模擬肝臟對藥物的代謝和毒性反應，是藥物的安全性評價和藥代動力學研究的重要的實驗模型。湛江樹鼩原代肝細胞貼壁
人原代肝細胞的獲取和保存非常困難，且存在批次差異和有限的增殖能力，因此在實際應用中受到了一定的限制。北京獼猴原代肝細胞
原代肝細胞的體外擴增不是一件容易的事。原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型，具有豐富的酶系和多種特異性功能，因此被大量用于生物化學、實驗性肝損傷、藥代動力學、毒理學和cancer等研究。然而，這些細胞在體外的存活能力非常有限，所以分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細胞并不是一件容易的事情。 分離高質(zhì)量的原代肝細胞，需要采用一系列復雜的技術和方法。首先，需要選擇合適的動物模型，以獲得足夠數(shù)量的肝組織。然后，需要對肝組織進行消化和分離，通常使用的方法包括機械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過程中，需要注意避免對細胞的損傷，以保證細胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細胞也需要按照嚴格的標準進行培育。原代肝細胞需要在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中進行培養(yǎng)，以提供必要的營養(yǎng)和生長因子。在培養(yǎng)過程中，需要注意細胞的密度、溫度、氧氣濃度、pH值等因素，以保證細胞的正常生長和分化。此外，還需要添加適當?shù)乃幬锖突衔?，以模擬體內(nèi)的生理環(huán)境和病理狀態(tài)，以便進行相關研究。 分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細胞是進行肝臟相關研究的關鍵步驟之一。雖然這個過程非常復雜和困難，但是通過不斷的努力和創(chuàng)新，我們相信會有更多的突破和進展。北京獼猴原代肝細胞