貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型,也是藥物代謝實(shí)驗(yàn)的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準(zhǔn)體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細(xì)胞共孵育,測定孵育后CYP酶的mRNA表達(dá)水平倍數(shù)變化,以評估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機(jī)制,從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進(jìn)而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見,因?yàn)樵S多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進(jìn)行代謝,而酶誘導(dǎo)會影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。酶誘導(dǎo)的機(jī)制是通過影響肝臟細(xì)胞內(nèi)的CYP酶的表達(dá)和活性來實(shí)現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細(xì)胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當(dāng)某些化合物進(jìn)入體內(nèi)后,它們會與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達(dá),從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。原代肝細(xì)胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。立沃生物的原代肝細(xì)胞提供多種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)等。惠州牛原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞可能會受到endotoxin的污染,這會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來減少endotoxin的污染。例如,使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。河北樹鼩原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基立沃生物的原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)門檻很高,需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù),以及嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制。
原代肝細(xì)胞是一種非常重要的體外細(xì)胞模型。原代肝細(xì)胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的,具有高度的生物學(xué)活性和功能性,可以用于許多不同的應(yīng)用,包括藥物代謝和毒性測試、肝細(xì)胞疾病研究、肝細(xì)胞移植等。原代肝細(xì)胞與其他肝細(xì)胞模型相比具有許多優(yōu)勢。原代肝細(xì)胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來,具有更高的生物學(xué)活性和功能性,這意味著原代肝細(xì)胞可以更好地模擬人體肝臟的生理和代謝過程,因此更適合用于藥物代謝和毒性測試。這些細(xì)胞可以幫助研究人體對藥物的反應(yīng),以及藥物對肝臟的影響。原代肝細(xì)胞可以用于研究肝細(xì)胞疾病,如肝病、肝硬化等。這些疾病對人類健康造成了極大的威脅,因此研究這些疾病的機(jī)制非常重要。原代肝細(xì)胞可以提供一個(gè)更真實(shí)的模型,幫助科學(xué)家更好地理解這些疾病的發(fā)生和發(fā)展過程。此外,原代肝細(xì)胞還可以用于肝細(xì)胞移植。肝細(xì)胞移植是一種克服肝臟疾病的方法,可以幫助患者恢復(fù)肝臟功能。原代肝細(xì)胞可以用于移植,以幫助患者恢復(fù)健康。原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型,可以用于藥物代謝和毒性測試、肝細(xì)胞疾病研究、肝細(xì)胞移植等,為人類健康做出了重要的貢獻(xiàn)。
原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細(xì)胞懸浮生長時(shí)可以呈單個(gè)細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán),胞體為圓形。其優(yōu)點(diǎn)是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時(shí)間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細(xì)胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細(xì)胞相互接觸后可抑制細(xì)胞的運(yùn)動,因此細(xì)胞不會相互重疊于其上面生長。細(xì)胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細(xì)胞分裂停止,稱為密度抑制。 當(dāng)肝細(xì)胞被分離后,可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞在開始的4~6h內(nèi)細(xì)胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,隨時(shí)間的延長而迅速下降,故懸浮肝細(xì)胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞有足夠的時(shí)間從損傷中恢復(fù)過來,保持了正常肝細(xì)胞的生物學(xué)特征及代謝活性,一般用于酶誘導(dǎo)研究、藥物細(xì)胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。立沃生物的原代肝細(xì)胞來源于不同的動物品系,以滿足客戶的個(gè)性化需求。
原代肝細(xì)胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動物,還有一些哺乳動物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外,也會根據(jù)細(xì)胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學(xué)的研究;②預(yù)測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細(xì)胞毒性等。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室哪家好?推薦立沃生物!中山雞原代肝細(xì)胞購買
人原代肝細(xì)胞保留了細(xì)胞在體內(nèi)環(huán)境里的功能與特性,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)模型?;葜菖T渭?xì)胞分離培養(yǎng)
肝臟是人體內(nèi)重要的organ之一,它不僅是人體的化學(xué)工廠,還是藥物代謝的重要organ。藥物在體內(nèi)的代謝過程中,肝臟扮演著至關(guān)重要的角色。因此,研究肝臟的代謝功能對于藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究具有重要的意義。 在體外藥物代謝研究中,肝臟是常用的模型之一。常用的體外模型包括肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片和重組人代謝酶等。其中,原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性,基本維持了肝臟的代謝功能,特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平,成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。 原代肝細(xì)胞的研究對于藥物代謝和毒理學(xué)研究具有重要的意義。它可以模擬體內(nèi)肝臟的代謝過程,研究藥物在體內(nèi)的代謝途徑和代謝產(chǎn)物,為藥物研發(fā)提供重要的參考。同時(shí),原代肝細(xì)胞還可以用于毒理學(xué)研究,研究藥物的毒性和副作用,為藥物的安全性評價(jià)提供重要的依據(jù)。 肝臟是藥物代謝的重要organ,原代肝細(xì)胞作為體外藥物代謝研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”,在藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究中具有重要的意義。未來,隨著科技的不斷發(fā)展,原代肝細(xì)胞的研究將會更加深入,為藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究提供更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和依據(jù)。惠州牛原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)