貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長，形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn)： 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞：從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后，需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測，確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng)：將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是，原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。懸浮肝細(xì)胞主要應(yīng)用于藥物代謝研究，一般使用多供體混合懸浮肝細(xì)胞，適用于試驗(yàn)周期比較短的實(shí)驗(yàn)。上海貓?jiān)渭?xì)胞培養(yǎng)基
原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究領(lǐng)域非常重要的體外模型。原代肝細(xì)胞作為藥物代謝研究的經(jīng)典模型，在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學(xué)的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細(xì)胞共孵育，不但可對化合物在肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性進(jìn)行研究，而且還可得到相對多量的高純度的代謝產(chǎn)物，在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征，尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當(dāng)有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候，原代肝細(xì)胞更為不可替代的體外模型。上海小鼠原代肝細(xì)胞提取原代肝細(xì)胞作為體外藥物代謝研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”，在藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究中具有重要的意義。
原代肝細(xì)胞是一種從新鮮肝臟組織中分離出來的細(xì)胞，具有高度的生物學(xué)活性和生理功能。它們是肝臟的主要細(xì)胞類型，能夠執(zhí)行多種生理功能，如合成和分泌膽汁、代謝藥物和有害物質(zhì)、合成和分泌蛋白質(zhì)等。 原代肝細(xì)胞具有以下特點(diǎn)： 1. 高度的生物學(xué)活性：原代肝細(xì)胞具有高度的生物學(xué)活性，能夠執(zhí)行多種生理功能，如代謝藥物和有害物質(zhì)、合成和分泌蛋白質(zhì)等。 2. 優(yōu)異的細(xì)胞生長和增殖能力：原代肝細(xì)胞具有優(yōu)異的細(xì)胞生長和增殖能力，能夠在體外長期培養(yǎng)，為研究肝臟生理和病理提供了重要的工具。 3. 高度的細(xì)胞純度：原代肝細(xì)胞可以通過多種方法從新鮮肝臟組織中分離出來，具有高度的細(xì)胞純度，可以用于多種實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用。 4. 易于操作和應(yīng)用：原代肝細(xì)胞可以在體外進(jìn)行多種實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用，如藥物代謝和毒性測試、病毒研究和基因轉(zhuǎn)染等。 5. 廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域：原代肝細(xì)胞在藥物研發(fā)、毒性測試、疾病研究等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，是肝臟生理和病理研究的重要工具。 原代肝細(xì)胞是一種具有高度生物學(xué)活性和生理功能的細(xì)胞類型，具有優(yōu)異的細(xì)胞生長和增殖能力，易于操作和應(yīng)用，多方面應(yīng)用于藥物研發(fā)、毒性測試、疾病研究等領(lǐng)域。
分離原代肝細(xì)胞時的消化酶選擇是需要格外注意的。原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型，可以用于許多不同的研究領(lǐng)域，例如肝臟疾病的研究和藥物篩選。在進(jìn)行原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)和處理時，選擇合適的酶消化方法非常關(guān)鍵。 目前，常用的原代肝細(xì)胞消化方法有dispase和ACC。這兩種酶都具有溫和的消化效果，可以有效地分離肝細(xì)胞，同時不會對細(xì)胞造成太大的損傷，可以更好地保護(hù)細(xì)胞的完整性和生命力。相比之下，胰酶的消化效果更為強(qiáng)烈，但是也存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，容易導(dǎo)致原代肝細(xì)胞的老化和死亡。因此，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞的消化處理時，我們應(yīng)該盡量避免使用胰酶。 選擇合適的酶消化方法對于原代肝細(xì)胞的處理非常重要，防止在分離細(xì)胞時一個不小心浪費(fèi)了寶貴的實(shí)驗(yàn)材料。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套提供液氮運(yùn)輸服務(wù)，以及發(fā)貨細(xì)胞的定位跟蹤，全力保護(hù)客戶所需細(xì)胞安全。
近年來，隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，原代肝細(xì)胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用的作用越來越重要，取得了一系列重要進(jìn)展。 首先，原代肝細(xì)胞在肝臟發(fā)育和再生方面的研究中發(fā)揮了重要作用。研究表明，原代肝細(xì)胞可以分化為多種肝細(xì)胞類型，如肝細(xì)胞、膽管細(xì)胞和星形細(xì)胞等，從而為肝臟發(fā)育和再生提供了重要的細(xì)胞來源。此外，原代肝細(xì)胞還可以通過體外培養(yǎng)和移植等方法促進(jìn)肝臟再生和修復(fù)。 其次，原代肝細(xì)胞在肝臟疾病的研究中也有重要應(yīng)用。研究表明，原代肝細(xì)胞可以模擬肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展過程，如肝纖維化、liver cancer等，從而為疾病的機(jī)制研究和新藥開發(fā)提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀４送?，原代肝?xì)胞還可以用于篩選和評價(jià)肝臟疾病的藥物開發(fā)。 原代肝細(xì)胞在藥物代謝和毒性研究中也有重要作用。研究表明，原代肝細(xì)胞可以模擬肝臟對藥物的代謝和毒性反應(yīng)，從而為藥物的安全性評價(jià)和藥代動力學(xué)研究提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。此外，原代肝?xì)胞還可以用于篩選和評價(jià)藥物的代謝和毒性。 原代肝細(xì)胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用前景廣闊，將為肝臟生理和病理的研究以及藥物開發(fā)和安全性評價(jià)等方面提供重要支持人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難，且存在批次差異和有限的增殖能力，因此在實(shí)際應(yīng)用中受到了一定的限制。湛江牛原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞是一種重要的研究工具，可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。上海貓?jiān)渭?xì)胞培養(yǎng)基
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學(xué)者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過程，學(xué)者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞的方法。 一般來說，原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右，7天以后細(xì)胞的狀態(tài)和活率會逐漸開始下降。 為了克服這些局限性，科學(xué)家們開始嘗試將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章，將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞可以相互作用，形成更加復(fù)雜的細(xì)胞群體，從而更好地模擬肝臟的生理和病理過程，通過這種方法可以將原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)128天。 當(dāng)然，共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性，比如如何控制細(xì)胞的生長和分化、如何保持細(xì)胞的穩(wěn)定性等。但是，隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，相信這種方法將會越來越成熟，為研究肝臟生理和病理提供更加有效的手段。上海貓?jiān)渭?xì)胞培養(yǎng)基