多光子激光掃描顯微鏡行業(yè)發(fā)展,世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要布局在德國和日本,德國是以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為,而日本以尼康和奧林巴斯公司為,2020年,上述企業(yè)占據(jù)著世界多光子激光掃描顯微鏡市場64.44%的市場份額,其發(fā)展戰(zhàn)略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,中國市場這方面的需求增長更快,未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將具有很大的發(fā)展?jié)摿?。滔博生物多光子顯微鏡廣應(yīng)用于生命科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)領(lǐng)域!美國熒光多光子顯微鏡系統(tǒng)
從產(chǎn)品類型及技術(shù)方面來看,正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場。2020年,全球多光子激光掃描正置顯微鏡市場達(dá)到87.30百萬美元,預(yù)計(jì)到2027年該部分市場將達(dá)到154.02百萬美元,年復(fù)合增長率(2021-2027)為8.48%。中國多光子激光掃描正置顯微鏡市場達(dá)到13.32百萬美元,預(yù)計(jì)到2027年該部分市場將達(dá)到25.21百萬美元,年復(fù)合增長率(2021-2027)為9.58%。從產(chǎn)品市場應(yīng)用情況來看,研究機(jī)構(gòu)為主要應(yīng)用領(lǐng)域,2020年約占全球市場46.28%。2020年,全球多光子激光掃描顯微鏡研究機(jī)構(gòu)應(yīng)用消費(fèi)量為174臺,預(yù)計(jì)2027年達(dá)到349臺,2021-2027年復(fù)合增長率(CAGR)為9.72%。離體多光子顯微鏡代理商與傳統(tǒng)的熒光顯微鏡相比,多光子顯微鏡具有更好的深度穿透能力和較低光損傷性,可以觀察更深層的組織結(jié)構(gòu)。
與傳統(tǒng)的單光子寬視野熒光顯微鏡相比,多光子顯微鏡具有光學(xué)切片和深層成像等功能,這兩個(gè)優(yōu)勢極大地促進(jìn)了研究者們對于完整大腦深處神經(jīng)的了解與認(rèn)識。2019年,JeromeLecoq等人從大腦深處的神經(jīng)元成像、大量神經(jīng)元成像、高速神經(jīng)元成像這三個(gè)方面論述了相關(guān)的MPM技術(shù)。想要將神經(jīng)元活動與復(fù)雜行為聯(lián)系起來,通常需要對大腦皮質(zhì)深層的神經(jīng)元進(jìn)行成像,這就要求MPM具有深層成像的能力。激發(fā)和發(fā)射光會被生物組織高度散射和吸收是限制MPM成像深度的主要因素,雖然可以通過增加激光強(qiáng)度來解決散射問題,但這會帶來其他問題,例如燒壞樣品、離焦和近表面熒光激發(fā)。增加MPM成像深度比較好的方法是用更長的波長作為激發(fā)光。
首代小型化雙光子顯微鏡在國際上獲得小鼠自由行為過程中大腦神經(jīng)元和突觸的動態(tài)圖像后,我們成功研制了第二代小型化雙光子顯微鏡。它具有更大的成像視野和三維成像能力,可以清晰穩(wěn)定地對自由活動小鼠三維腦區(qū)的數(shù)千個(gè)神經(jīng)元進(jìn)行成像,實(shí)現(xiàn)對同一批神經(jīng)元的一個(gè)月追蹤記錄。通過對微光學(xué)系統(tǒng)的重新設(shè)計(jì)系統(tǒng)的。微物鏡工作距離延長至1mm,實(shí)現(xiàn)無創(chuàng)成像。內(nèi)嵌可拆卸的快速軸向掃描模塊,可采集深度180微米的3D體成像和多平面快速切換的實(shí)時(shí)成像。該掃描模塊由一個(gè)快速的電動變焦透鏡和一對中繼透鏡組成,在不同深度成像時(shí)可保持放大倍率恒定。其變焦模塊重量,研究人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自由拆卸。此外,新版微型化成像探頭可整體即時(shí)拔插,極大地簡化了實(shí)驗(yàn)操作,避免了長周期實(shí)驗(yàn)時(shí)對動物的干擾。在重復(fù)裝卸探頭同一批神經(jīng)元時(shí),視場旋轉(zhuǎn)角小于,邊界偏差小于35微米。由于光的波長有限,光子顯微鏡的分辨率受到限制,無法觀察到更小的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器。
多光子顯微鏡成像深度深、對比度高,在生物成像中具有重要意義,但通常需要較高的功率。結(jié)合時(shí)間傳播的超短脈沖可以實(shí)現(xiàn)超快的掃描速度和較深的成像深度,但近紅外波段的光本身會導(dǎo)致分辨率較低。基于多光子上轉(zhuǎn)換材料和時(shí)間編碼結(jié)構(gòu)光顯微鏡的高速超分辨成像系統(tǒng)(MUTE-SIM)是由清華大學(xué)教授和北京大學(xué)彭研究員合作開發(fā)的??蓪?shí)現(xiàn)50MHz的超高掃描速度,突破衍射極限,實(shí)現(xiàn)超分辨率成像。與普通熒光顯微鏡相比,該顯微鏡經(jīng)過改進(jìn),只需要較低的激發(fā)功率。這種超快、低功耗、多光子超分辨率技術(shù)在高分辨率生物深層組織成像中具有長遠(yuǎn)的應(yīng)用前景。4tune光譜檢測器,實(shí)現(xiàn)多光子顯微鏡的光譜型檢測。美國熒光多光子顯微鏡系統(tǒng)
未來國產(chǎn)多光子激光掃描顯微鏡替代空間大。美國熒光多光子顯微鏡系統(tǒng)
以往我們認(rèn)識的光電效應(yīng)是單光子光電效應(yīng),即一個(gè)電子在極短時(shí)間內(nèi)能吸收到一個(gè)光子而從金屬表面逸出。強(qiáng)激光的出現(xiàn)豐富了人們對于光電效應(yīng)的認(rèn)識,用強(qiáng)激光照射金屬,由于其光子密度極大,一個(gè)電子在短時(shí)間吸收多個(gè)光子成為可能,從而形成多光子電效應(yīng),這已被實(shí)驗(yàn)證實(shí)。為什么一般討論的光電效應(yīng)都是指單光子光電效應(yīng)呢?這是因?yàn)?,在使用普通光源的情況下,電子吸收兩個(gè)以上光子能量的概率是非常非常小的,幾乎為零。事實(shí)上,愛因斯坦本人就考慮過在強(qiáng)光下發(fā)生光電效應(yīng)的可能性問題。對此,他有如下的論述:光電效應(yīng)中的一個(gè)電子吸收兩個(gè)光子的幾率不會大于下雨天兩個(gè)雨滴同事打在一個(gè)螞蟻上的幾率。因此,多光子光電效應(yīng)在實(shí)驗(yàn)上的研究成為可能,是二十世紀(jì)六十年代激光乃至強(qiáng)激光出現(xiàn)以后的事情。有了激光,對于雙光子光電效應(yīng),在實(shí)驗(yàn)上和理論上均取得了許多成果。利用強(qiáng)激光,人們不僅觀察到雙光子和三光子的光電效應(yīng),甚至觀察到金靶材吸收幾十個(gè)等效光子實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。美國熒光多光子顯微鏡系統(tǒng)