斑馬魚研究院所

測驗斑馬魚的行為和認(rèn)知才能：在多孔板試驗中，能夠測驗斑馬魚在多孔板試驗中，能夠測驗斑馬魚的行為和認(rèn)知才能，經(jīng)過記載它們的行為和反應(yīng)來評價其學(xué)習(xí)和回憶才能，以及對環(huán)境的感知才能。例如，能夠記載斑馬魚幼魚經(jīng)過多孔板的時刻、路徑、錯誤次數(shù)和成功率等數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)能夠用來評價幼魚對迷宮的回憶才能和學(xué)習(xí)才能。經(jīng)過屢次試驗，還能夠評價幼魚的長期學(xué)習(xí)和回憶才能。一起，能夠在多孔板的不同方位放置食物，以測驗斑馬魚對環(huán)境的感知才能。此外，多孔板試驗還可以用于評價斑馬魚的心情和行為反響。例如，在試驗中加入一些壓力因素，例如模擬掠食者等，以測驗斑馬魚的心情和應(yīng)激反響。這些數(shù)據(jù)可以用來研究斑馬魚的神經(jīng)生物學(xué)和行為?？偟膩碚f，多孔板試驗是一種有效的辦法，可用于測驗斑馬魚幼魚的行為和認(rèn)知能力。它可以用于研究斑馬魚的學(xué)習(xí)、記憶、感知和心情等方面，為研究斑馬魚的神經(jīng)生物學(xué)和行為供給了一個有用的工具。CRISPR-Cas9 系統(tǒng)實現(xiàn)斑馬魚基因準(zhǔn)確編輯，構(gòu)建疾病模型。斑馬魚研究院所

當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損害因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時，其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞，在細(xì)胞裂解液作用下，細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴(kuò)散到細(xì)胞裂解液中，而核DNA因為分子量太大只能留在原位。在中性條件下，DNA可進(jìn)入凝膠發(fā)生搬遷，而在堿性電解質(zhì)的作用下，DNA發(fā)生解螺旋，損害的DNA斷鏈及片段被釋放出來。因為這些DNA的分子量小且堿變性為單鏈，所以在電泳過程中帶負(fù)電荷的DNA會離開核DNA向正極搬遷構(gòu)成“彗星”狀圖像，而未受損害的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重，發(fā)生的斷鏈和斷片越多，長度也越小，在相同的電泳條件下搬遷的DNA量就愈多，搬遷的距離就愈長。通過測定DNA搬遷部分的光密度或搬遷長度就可以測定單個細(xì)胞DNA損害程度，然后確認(rèn)受試物的作用劑量與DNA損害效應(yīng)的聯(lián)系。彗星試驗檢測低濃度基因毒物具有高靈敏性，研究的細(xì)胞不需處于有絲分裂期。一起，這種技術(shù)只需要少數(shù)細(xì)胞。斑馬魚染毒實驗報價利用斑馬魚模型，研究人員可以快速評估藥物對神經(jīng)系統(tǒng)的影響，篩選出具有潛在療效的藥物。

利用斑馬魚模型點評皮膚肌肉毒性，【點評原理】斑馬魚皮膚結(jié)構(gòu)與功能與人類是高度類似的，斑馬魚皮膚含有基底層、棘層、顆粒層、透明層和表皮角質(zhì)細(xì)胞層；另外還有與人皮膚結(jié)構(gòu)相同的固有層、半橋粒、黑色素細(xì)胞、血管和皮下脂肪細(xì)胞等。斑馬魚皮膚間質(zhì)結(jié)締組織、膠原及其接近的纖維母細(xì)胞及皮膚基因表達(dá)亦與人類皮膚類似。我們點評斑馬魚皮膚肌肉毒性是有4個目標(biāo)：1.皮膚影響；2.肌肉紋路；3.皮膚凋亡細(xì)胞定量；4.皮膚色素的變化。

【點評原理】關(guān)節(jié)軟骨遭到急性外傷和慢性磨損，出現(xiàn)不同程度的損害，導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼、活動受限，乃至功能喪失。關(guān)節(jié)軟骨的修正首要靠軟骨細(xì)胞的增殖分化，生產(chǎn)滿足的細(xì)胞外基質(zhì)修正軟骨缺損。人軟骨細(xì)胞通常是停止的，血管化程度低，營養(yǎng)首要來源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨，修正再生則顯得十分有限，需求外源性的手法來輔佐修正。DXMS破壞軟骨細(xì)胞的代謝平衡，引起軟骨細(xì)胞的逝世或凋亡，從而引起軟骨損害。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動物骨骼發(fā)育進(jìn)程極其類似，因此，可用于軟骨修正功效點評。斑馬魚的軟骨首要散布于頭部，包括七對咽顱軟骨弓（下頜弓、舌弓及五對鰓弓）和腦顱軟骨。根據(jù)轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性，患有軟骨損害的斑馬魚的軟骨熒光強度會顯著比正常斑馬魚的軟骨熒光強度要暗許多，能夠顯著被觀察到。斑馬魚基因保守性主要體現(xiàn)在與人類和其他脊椎動物基因的相似性上，包括與神經(jīng)系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等相關(guān)基因。

斑馬魚為tumor研究開辟了新的途徑，其獨特的生物學(xué)特性使tumor發(fā)生的發(fā)展機制的研究更加直觀和深入。斑馬魚的免疫系統(tǒng)和tumor微環(huán)境與人類具有一定的相似性，并且能夠通過基因編輯技術(shù)構(gòu)建多種tumor模型，如黑色素瘤、白血病等。在斑馬魚黑色素瘤模型中，通過將人類黑色素瘤相關(guān)基因?qū)氚唏R魚胚胎，能夠誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生黑色素瘤，研究人員可以實時觀察tumor細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲過程。此外，斑馬魚胚胎透明的特點使得利用活的體成像技術(shù)追蹤tumor細(xì)胞的動態(tài)變化成為可能，能夠清晰地看到tumor細(xì)胞與周圍組織的相互作用以及血管生成等過程。通過對斑馬魚tumor模型的研究，發(fā)現(xiàn)了許多參與tumor發(fā)生的發(fā)展的關(guān)鍵信號通路和調(diào)控因子，為tumor的診斷和醫(yī)療提供了新的靶點和思路，同時也有助于評估新型抗tumor藥物的療效和毒性。胚胎顯微注射技術(shù)可向斑馬魚導(dǎo)入外源基因，開展基因功能研究。斑馬魚 武漢水生所

斑馬魚肝臟與人同源性高，用于研究藥物肝毒性及肝病發(fā)病機制。斑馬魚研究院所

以下是多孔板實驗的具體進(jìn)程：1、準(zhǔn)備實驗設(shè)備和資料多孔板實驗需求一個容器、一個多孔板、一些食物和一些斑馬魚幼魚。容器應(yīng)足夠大，以包容多個斑馬魚幼魚，但不要太大，以免影響幼魚的行為。多孔板應(yīng)該適合幼魚的大小，而且可以放置在容器中。食物可以是小顆粒狀的魚食或其他恰當(dāng)大小的食物。2、練習(xí)斑馬魚幼魚在開端實驗之前，需求練習(xí)斑馬魚幼魚，以確保它們知道怎樣通過多孔板來獲得食物。為此，可以先將幼魚放置在一個沒有孔的板上，讓它們學(xué)會在板上找到食物。之后，可以逐步增加孔的數(shù)量和大小，以練習(xí)幼魚學(xué)會通過多孔板獲取食物獎賞。3、開始試驗：一旦幼魚學(xué)會了如何經(jīng)過多孔板獲取食物獎賞，就能夠開始正式的試驗了。首先，將多孔板放置在容器的一端，并將食物放在多孔板的對面。然后將幼魚放置在容器的另一端。幼魚會測驗經(jīng)過多孔板來獲得食物獎賞。如果幼魚成功經(jīng)過多孔板到達(dá)食物，則它們將獲得食物獎賞。斑馬魚研究院所