美國(guó)數(shù)字PCR儀器

3D數(shù)字PCR為液體活檢提供技術(shù)支持液體活檢是一種非侵入性的檢測(cè)基因及臨床效果的一種方法，目前可能正在開展有關(guān)3D數(shù)字PCR在在液體活檢中的療效，為后期臨床提供更多可靠的指導(dǎo)作用。報(bào)道稱“無創(chuàng)傷性肺檢測(cè)技術(shù)即將登陸中國(guó)”。隨著基因檢測(cè)技術(shù)，如類似3D數(shù)字PCR技術(shù)的發(fā)展，推動(dòng)我們將進(jìn)入了“DNA的應(yīng)用商城”這樣的新時(shí)代，如23andme、華大基因等專業(yè)的檢測(cè)服務(wù)機(jī)構(gòu)，提供更加專業(yè)的基因檢測(cè)結(jié)果，經(jīng)基因報(bào)告解讀師或遺傳咨詢師進(jìn)行通俗的解讀，讓我們每一個(gè)人都能夠了解自己的基因，擁有自己的“生命之書”，讓我們更加健康的生活。精細(xì)醫(yī)療其實(shí)本質(zhì)是應(yīng)用生物學(xué)信息與大數(shù)據(jù)科學(xué)的交叉發(fā)展的新型醫(yī)學(xué)概念與醫(yī)療模式。對(duì)于精細(xì)醫(yī)療，重點(diǎn)在于“精細(xì)”，不僅只是簡(jiǎn)單的基因測(cè)序如此簡(jiǎn)單，更需要精細(xì)的診斷與精細(xì)的。從市場(chǎng)規(guī)模來看，目前數(shù)字PCR市場(chǎng)規(guī)模并不大，全球約1.5億至2.5億美元。美國(guó)數(shù)字PCR儀器

根據(jù)泊松分布的定義和適用條件可知，如果我們?cè)O(shè)微液滴總數(shù)為N，投入的靶序列拷貝數(shù)為M，那么“每個(gè)微液滴中的靶序列拷貝數(shù)”的概率分布是近似滿足泊松分布的。理解之前，首先要明確一點(diǎn)，在檢測(cè)的過程中，并不是說一個(gè)樣本中檢測(cè)到了幾個(gè)亮點(diǎn)，這個(gè)反應(yīng)當(dāng)中就有幾個(gè)目標(biāo)基因的拷貝。因?yàn)槟繕?biāo)基因的片段，在微滴當(dāng)中的分布，是符合泊松分布的（也就是說進(jìn)不進(jìn)的概率相等，并且相互獨(dú)立）。所以，一個(gè)發(fā)光的微滴中，可能有一個(gè)或者三個(gè)四個(gè)，甚至更多個(gè)目標(biāo)基因的拷貝。因此，發(fā)光的微滴數(shù)與原始的基因拷貝數(shù)并不是一對(duì)一的對(duì)應(yīng)關(guān)系。美國(guó)數(shù)字PCR儀器臻準(zhǔn)推出新款數(shù)字PCR產(chǎn)品：AccuONE2.0數(shù)字PCR系統(tǒng)。

使用ddPCR的一個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)在于，定量不是相對(duì)的。微滴式數(shù)字PCR計(jì)算事件的數(shù)量，因此可以確定檢測(cè)極限和比較低起始量，以便達(dá)到所需的靈敏度。在連續(xù)監(jiān)控或比較不同患者的效果時(shí)，這可以更準(zhǔn)確地比較負(fù)荷，因?yàn)樗鶞y(cè)得的豐度不是相對(duì)的。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，ddPCRKRASG12/G13ScreeningKit也能夠檢測(cè)患者cfDNA樣品中的KRAS突變（圖2）。這些患者的血漿樣品購(gòu)自ConversantBio和ProMedDx，之前已通過FFPE基因分型被分為KRAS突變陽(yáng)性或陰性。歡迎咨詢廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司。

dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結(jié)果偏差。體積誤差對(duì)于測(cè)量拷貝數(shù)濃度會(huì)產(chǎn)生偏差。目前dPCR中體積優(yōu)化方法以光學(xué)顯微鏡觀測(cè)為主。分散體積的差異會(huì)增加拷貝數(shù)結(jié)果的不確定性，Emslie等使用光學(xué)顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異，考察了數(shù)字PCR系統(tǒng)中每個(gè)微孔內(nèi)和孔與孔間的體積差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響程度。Corbisier等使用微滴數(shù)字PCR對(duì)6種不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)棉籽粉質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[ERM-AD623a-f，濃度范圍（10~10）copies/ul]進(jìn)行分析，優(yōu)化了液滴體積得到相應(yīng)校正因子，并使用該校正因子發(fā)現(xiàn)并校準(zhǔn)了運(yùn)行軟件中液滴體積不變的假設(shè)而引起的數(shù)據(jù)偏離，數(shù)據(jù)結(jié)果的一致性有明顯提高。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊，可用于病原微生物檢測(cè)、基因檢測(cè)、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證等領(lǐng)域。

數(shù)字PCR平臺(tái)的評(píng)價(jià)指標(biāo)有：分割單元數(shù)，熒光通道數(shù)，操作復(fù)雜性和污染風(fēng)險(xiǎn)。但是重要的是檢測(cè)準(zhǔn)確性，評(píng)估數(shù)字PCR平臺(tái)的一種方法是使用多個(gè)數(shù)字PCR平臺(tái)互相驗(yàn)證，另一種方法是使用定值準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。目前的三代的PCR技術(shù)各有各的優(yōu)缺點(diǎn)，也各有各的應(yīng)用領(lǐng)域，并不是一代取代一代的關(guān)系。技術(shù)的不斷進(jìn)步給PCR技術(shù)注入了新的活力，使其能解鎖一個(gè)又一個(gè)的應(yīng)用方向，使核酸檢測(cè)更方便、更準(zhǔn)確。目前dPCR儀器的價(jià)格仍然十分昂貴，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進(jìn)以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價(jià)格將會(huì)不斷的降低，使其應(yīng)用到更多的檢測(cè)中。數(shù)字PCR在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場(chǎng)前景

數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣，除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測(cè)以外，也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測(cè)。美國(guó)數(shù)字PCR儀器

作為時(shí)下的熱點(diǎn)技術(shù)，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨(dú)、平行的微反應(yīng)單元（nL，納升級(jí)別）中，使得每個(gè)反應(yīng)單元中盡可能含有1個(gè)模板分子，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測(cè)和分布統(tǒng)計(jì)，從而實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)分子的比較 計(jì)數(shù)。（圖：數(shù)字PCR技術(shù)原理）根據(jù)微反應(yīng)單元的不同形式，數(shù)字PCR產(chǎn)品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場(chǎng)上主要的數(shù)字PCR產(chǎn)品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統(tǒng)和ThermoFisher公司的QuantStudio系統(tǒng)等。與一、二代PCR技術(shù)相比，數(shù)字PCR具有很多優(yōu)勢(shì)：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內(nèi)參和標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提下，可直接得到比較 量化指標(biāo)；三是微反應(yīng)單元相互獨(dú)立、封閉，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物間的相互干擾，準(zhǔn)確度和可重復(fù)性較高。美國(guó)數(shù)字PCR儀器

廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司致力于精細(xì)化學(xué)品，以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求。雙螺旋科學(xué)儀器作為精細(xì)化學(xué)品的企業(yè)之一，為客戶提供良好的數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀。雙螺旋科學(xué)儀器不斷開拓創(chuàng)新，追求出色，以技術(shù)為先導(dǎo)，以產(chǎn)品為平臺(tái)，以應(yīng)用為重點(diǎn)，以服務(wù)為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值，提供更優(yōu)服務(wù)。雙螺旋科學(xué)儀器創(chuàng)始人姜艷，始終關(guān)注客戶，創(chuàng)新科技，竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。