作為時(shí)下的熱點(diǎn)技術(shù)，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨(dú)、平行的微反應(yīng)單元（nL，納升級(jí)別）中，使得每個(gè)反應(yīng)單元中盡可能含有1個(gè)模板分子，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測和分布統(tǒng)計(jì)，從而實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)分子的比較 計(jì)數(shù)。（圖：數(shù)字PCR技術(shù)原理）根據(jù)微反應(yīng)單元的不同形式，數(shù)字PCR產(chǎn)品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前，市場上主要的數(shù)字PCR產(chǎn)品主要是基于微滴式和芯片式，如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統(tǒng)和ThermoFisher公司的QuantStudio系統(tǒng)等。與一、二代PCR技術(shù)相比，數(shù)字PCR具有很多優(yōu)勢：一是特異性、靈敏性均有顯著提高；二是在不依賴內(nèi)參和標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提下，可直接得到比較 量化指標(biāo)；三是微反應(yīng)單元相互獨(dú)立、封閉，避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物間的相互干擾，準(zhǔn)確度和可重復(fù)性較高。三重ddPCR檢測體系存在的問題：不同位點(diǎn)檢測體系之間的cross-reactivity。蘇州雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場前景
在使用dPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測時(shí)，通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術(shù)對(duì)相同樣品檢測時(shí)，兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關(guān)注的問題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765（12板，每板765個(gè)微單元）芯片數(shù)字PCR分析儀測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-AD413檢測轉(zhuǎn)基因玉米MON810。該小組應(yīng)用dPCR技術(shù)評(píng)估在qPCR定義下的靈敏度數(shù)值，在拷貝數(shù)200-700之間，dPCR與qPCR的測量結(jié)果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比，dPCR在低于拷貝數(shù)200時(shí)有被低估的風(fēng)險(xiǎn)，在高于拷貝數(shù)1000時(shí)有被高估的風(fēng)險(xiǎn)。dPCR在同一陣列上同時(shí)測量轉(zhuǎn)基因和內(nèi)源性靶點(diǎn)時(shí)，需要稀釋內(nèi)源性靶點(diǎn)和轉(zhuǎn)基因靶點(diǎn)在合理拷貝數(shù)范圍內(nèi)以保證dPCR測量結(jié)果的準(zhǔn)確性。蘇州雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場前景數(shù)字PCR主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法。
引物設(shè)計(jì)（DesignPrimers）：引物長度（PrimerLength）：18-25個(gè)堿基之間。短的引物更易于同靶序列結(jié)合，但過短的引物也更可能同基因組上的多個(gè)區(qū)域相結(jié)合而產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。更長的引物會(huì)提高同靶序列結(jié)合的特異性，但過長的引物（>30bp）同靶序列結(jié)合速度變慢，降低結(jié)合率。引物長度和組成直接影響引物Tm值（PrimerMeltingTemperature）和退火溫度（AnnealingTemperatures）。引物的組成——GC%含量（GCContent）：指引物總堿基中G和C堿基數(shù)量的百分比，該值應(yīng)在40-60%之間。如果模板序列的GC含量較高，推薦使用較高Tm值的引物。
數(shù)字PCR平臺(tái)的評(píng)價(jià)指標(biāo)有：分割單元數(shù)，熒光通道數(shù)，操作復(fù)雜性和污染風(fēng)險(xiǎn)。但是重要的是檢測準(zhǔn)確性，評(píng)估數(shù)字PCR平臺(tái)的一種方法是使用多個(gè)數(shù)字PCR平臺(tái)互相驗(yàn)證，另一種方法是使用定值準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。目前的三代的PCR技術(shù)各有各的優(yōu)缺點(diǎn)，也各有各的應(yīng)用領(lǐng)域，并不是一代取代一代的關(guān)系。技術(shù)的不斷進(jìn)步給PCR技術(shù)注入了新的活力，使其能解鎖一個(gè)又一個(gè)的應(yīng)用方向，使核酸檢測更方便、更準(zhǔn)確。目前dPCR儀器的價(jià)格仍然十分昂貴，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進(jìn)以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價(jià)格將會(huì)不斷的降低，使其應(yīng)用到更多的檢測中。臻準(zhǔn)推出新款數(shù)字PCR產(chǎn)品：AccuONE2.0數(shù)字PCR系統(tǒng)。
數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術(shù)，而是更好的補(bǔ)充和完善現(xiàn)有技術(shù)平臺(tái)。數(shù)字PCR為不同應(yīng)用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路，尤其是在臨床檢測方面，在 性疾病早期檢測、 疾病的伴隨診斷、生殖遺傳篩查等領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應(yīng)用方面，也不斷“攻城略地”。新羿生物在檢測及 疾病伴隨診斷方面開發(fā)了一系列試劑盒，并積極推進(jìn)注冊(cè)臨床試驗(yàn)；領(lǐng)航基因聚焦在血流 （膿毒癥）及呼吸道 領(lǐng)域，相繼推出了多款病原菌檢測試劑盒；銳訊生物聚焦于檢測，2020年其產(chǎn)品獲得FDA緊急授權(quán)。除此之外，在公共衛(wèi)生領(lǐng)域，國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)針對(duì)食源性致病菌、鼠疫、蟲媒病毒等，也推出多種檢測試劑盒。影響dPCR定量結(jié)果的因素：儀器采用的分散方式與數(shù)量、溶液稀釋方法、分散體積的準(zhǔn)確性以及結(jié)果表達(dá)方式。華南地區(qū)微滴式數(shù)字PCR生命科學(xué)用品
數(shù)字PCR的兩大應(yīng)用場景在于基因檢測、無創(chuàng)出生缺陷篩查。蘇州雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場前景
近年來，全球各個(gè)地區(qū)特別是工業(yè)發(fā)達(dá)地區(qū)都把發(fā)展精細(xì)化學(xué)品作為傳統(tǒng)化工產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)升級(jí)調(diào)整的重點(diǎn)發(fā)展戰(zhàn)略之一， 其化工產(chǎn)業(yè)均向著“多元化”及“精細(xì)化”的方向發(fā)展。精細(xì)化學(xué)品是指能增進(jìn)或賦予一種（類）產(chǎn)品以特定功能或本身擁有特定功能的小批量制造和應(yīng)用的、技術(shù)密度高、附加值高，純度高的化學(xué)品，是基礎(chǔ)化學(xué)品進(jìn)一步深加工的產(chǎn)物。伴隨著我國國民經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，作為為多個(gè)行業(yè)服務(wù)的儀器儀表批發(fā);商品批發(fā)貿(mào)易（許可審批類商品除外）;商品零售貿(mào)易（許可審批類商品除外）;教學(xué)設(shè)備的研究開發(fā);辦公設(shè)備耗材批發(fā);生物技術(shù)開發(fā)服務(wù);生物技術(shù)推廣服務(wù);計(jì)算機(jī)批發(fā);生物技術(shù)轉(zhuǎn)讓服務(wù);農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;水處理設(shè)備的研究、開發(fā);食品科學(xué)技術(shù)研究服務(wù);環(huán)保設(shè)備批發(fā);辦公設(shè)備批發(fā);行業(yè)，在過去的幾十年間得到了飛速發(fā)展。精細(xì)化工總產(chǎn)值占化工行業(yè)總產(chǎn)值的比例為精細(xì)化率，精細(xì)化率的高低在一定程度上體現(xiàn)了一個(gè)地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平、高科技進(jìn)步程度等諸多方面。精細(xì)化工產(chǎn)品生產(chǎn)的主要原料是基礎(chǔ)化工產(chǎn)品。我國化工有限責(zé)任公司（自然）經(jīng)過多年發(fā)展，已建立了較為完整的化工產(chǎn)業(yè)體系，化工產(chǎn)品品種齊全，一些重要原材料具備了較大的生產(chǎn)能力和產(chǎn)量基數(shù)，并有十余種主要化工產(chǎn)品產(chǎn)量居世界前列。蘇州雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR市場前景
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司是國內(nèi)一家多年來專注從事數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀的老牌企業(yè)。公司位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號(hào)617房，成立于2015-04-17。公司的產(chǎn)品營銷網(wǎng)絡(luò)遍布國內(nèi)各大市場。公司業(yè)務(wù)不斷豐富，主要經(jīng)營的業(yè)務(wù)包括：{主營產(chǎn)品或行業(yè)}等多系列產(chǎn)品和服務(wù)?？梢愿鶕?jù)客戶需求開發(fā)出多種不同功能的產(chǎn)品，深受客戶的好評(píng)。公司秉承以人為本，科技創(chuàng)新，市場先導(dǎo)，和諧共贏的理念，建立一支由數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀**組成的顧問團(tuán)隊(duì)，由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員組成的研發(fā)和應(yīng)用團(tuán)隊(duì)。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司依托多年來完善的服務(wù)經(jīng)驗(yàn)、良好的服務(wù)隊(duì)伍、完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)和強(qiáng)大的合作伙伴，目前已經(jīng)得到精細(xì)化學(xué)品行業(yè)內(nèi)客戶認(rèn)可和支持，并贏得長期合作伙伴的信賴。