通用細胞凍存液(無血清)的簡介:隨著實驗室細胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,人工開發(fā)出來的細胞系的保存越來越重要。細胞冷凍的原理在于盡可能降低細胞內(nèi)的晶體形成,減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細胞造成的低溫損傷,從提高細胞復蘇時的存活率。細胞凍存的數(shù)量應保證復蘇時低溫保護劑獲得稀釋,稀釋后的細胞濃度扔高于正常傳代的細胞濃度為宜,這是因為當?shù)蜏乇Wo劑稀釋以后,該濃度一般不會對細胞造成毒性損傷。通用細胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基、DMSO等組成,不含血清,是一種經(jīng)典的無菌凍存液。用于各種哺乳動物原代細胞、傳代細胞系、雜交瘤細胞等的凍存。一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家
無血清細胞凍存液復蘇細胞實驗步驟:1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。重慶正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。
干細胞無血清凍存液操作事項:使用說明:1.細胞消化和計數(shù),用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3.根據(jù)細胞計數(shù)的情況,加入適量的干細胞無血清凍存液,使細胞密度在1×106左右(或根據(jù)自己希望達到的細胞密度)。4.輕輕地重懸細胞(務必重懸均勻)。5.將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標記或者貼上標簽)中,旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項:1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中,請務必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。反復吹吸混勻后,分裝于細胞凍存管中,每管500ul-1000ul。
無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清細胞凍存液:一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子。金華無血清細胞凍存液哪里買
無血清細胞凍存液:凍存細胞,無需程序降溫。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家
產(chǎn)品簡介我們經(jīng)過長期的實驗研究與反復驗證,研發(fā)出一系列新型細胞凍存產(chǎn)品,能有效地提高常規(guī)細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法,專注于后續(xù)實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細胞凍存液,所含化學成分明確,無動物源性成分,可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,適用于大多數(shù)常規(guī)細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家