濟(jì)南RNA提取試劑

RNA提取注意事項(xiàng)：1、組織樣本要盡可能的新鮮，避免反復(fù)凍融。2、提取時(shí)組織要充分研磨，組織量不宜過(guò)少，更不宜過(guò)多。3、加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時(shí)間，使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時(shí)，分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸，不能多吸”，千萬(wàn)不能提取到中間層，否則會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的基因組DNA污染。5、洗滌時(shí)洗滌液應(yīng)充分浸潤(rùn)到管壁的四周，確保洗滌徹底。6、柱式提取法，洗滌完后除了對(duì)柱子進(jìn)行空離后，還應(yīng)當(dāng)將吸附柱置于超凈臺(tái)內(nèi)吹風(fēng)5~10min，使有機(jī)溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時(shí)候，當(dāng)加入DEPC水后還應(yīng)孵育3~5min，或者提前將DEPC水加熱至60℃，可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀，則應(yīng)當(dāng)給予適當(dāng)溶解時(shí)間，并用泵頭不斷吹吸離心管底部。RNA提取試劑注意事項(xiàng)：所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無(wú)RNA酶污染。濟(jì)南RNA提取試劑

與DNA不同，RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，但是很多RNA也需要通過(guò)堿基配對(duì)原則形成一定的二級(jí)結(jié)構(gòu)乃至三級(jí)結(jié)構(gòu)來(lái)行使生物學(xué)功能。RNA的堿基配對(duì)規(guī)則基本和DNA相同，不過(guò)除了A-U、G-C配對(duì)外，G-U也可以配對(duì)。在細(xì)胞中，根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉(zhuǎn)運(yùn)RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板，內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄；tRNA是mRNA上堿基序列（即遺傳密碼子）的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質(zhì)合成的工作場(chǎng)所。濟(jì)南RNA提取試劑總共可以使用該試劑盒進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)提取。

超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢(shì)：1、、無(wú)DNA污染可直接用于熒光定量PCR：目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會(huì)出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)。一些市面上單獨(dú)賣(mài)的去DNA污染的試劑，效果不穩(wěn)定，去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單，去除DNA徹底，得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR，反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過(guò)程中去除干擾物的技術(shù)，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開(kāi)發(fā)了糖類清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。3、適用材料普遍：尤其適合解決多醣多酚，色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。

總RNA提取試劑是一種快速?gòu)慕M織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過(guò)程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT－PCR、NorthernBlot、RNA酶保護(hù)、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。是一種快速?gòu)慕M織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過(guò)程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT－PCR、NorthernBlot、RNA酶保護(hù)、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。較佳方法是保證樣品完全裂解，但相同的裂解方案換了一個(gè)樣本可能就沒(méi)轍了。

總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分)，兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳，28S的位置大約在2kb，18S大約在1kb的位置，不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng)：樣品用總RNA提取試劑勻漿后，如果不即刻加入氯仿之前，置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短，容易降解，建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，如反轉(zhuǎn)錄成cDNA，NorthernBlot等。血漿/血清RNA提取試劑盒：普通植物總ＲＮＡ提取試劑盒：采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱。溫州RNA提取試劑廠家

RNA提取試劑：能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇。濟(jì)南RNA提取試劑

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學(xué)破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構(gòu)成細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細(xì)胞壁，此法對(duì)堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格，堿的濃度不可過(guò)濃，應(yīng)控制在1％，并且對(duì)提取溫度也有一定的要求，提取時(shí)間短。因?yàn)樵谶^(guò)分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細(xì)胞壁成分復(fù)雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細(xì)胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問(wèn)題?？俁NA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，不同的方法適用于不同類型的材料。濟(jì)南RNA提取試劑