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對(duì)于生物科研汪們來(lái)說(shuō),大白鼠、小白鼠們簡(jiǎn)直渾身是寶,從毛發(fā)、皮膚,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,都是我們重要的研究對(duì)象。尾巴,自然也是。所以耗子尾汁不僅存在,甚至是我們生物實(shí)驗(yàn)中必不可少的實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)對(duì)象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒(méi)有「耗子尾汁」,很多課題可能都沒(méi)辦法開(kāi)展。在以小鼠為模式生物進(jìn)行科學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)室中,日常和基本的一個(gè)實(shí)驗(yàn)就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進(jìn)行基因型鑒定,檢測(cè)這些小動(dòng)物的基因組中是否含有特定的DNA??梢岳斫鉃榻o小動(dòng)物做核酸檢測(cè)。使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。無(wú)錫鼠尾膠原廠家供應(yīng)
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見(jiàn)文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。寧波深圳鼠尾膠原可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過(guò)夜消毒。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):通過(guò)醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。1,在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng)。1mg/ml濃度以上,pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長(zhǎng)、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長(zhǎng)。使用方法:1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中。
鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值)。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí)、一般級(jí)、醫(yī)藥級(jí)。
膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見(jiàn)的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過(guò)夜。寧波深圳鼠尾膠原
它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。無(wú)錫鼠尾膠原廠家供應(yīng)
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥。它還可以用來(lái)制造一種凝膠,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基。此外,還可以把它當(dāng)膠水使用。在化妝品行業(yè),鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜。不過(guò),用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取。不過(guò),用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取。無(wú)錫鼠尾膠原廠家供應(yīng)