南京Protein AG免疫沉淀實驗原理

免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是一種廣泛應用于分子生物學和生物化學實驗中的技術，主要用于從復雜混合物中分離和富集特定的目標蛋白或多肽。該技術基于抗原與抗體之間的特異性結合，通過抗體與目標蛋白的結合，再利用固相載體（如瓊脂糖珠或磁珠）將抗原-抗體復合物從溶液中分離出來。免疫沉淀技術不僅可用于蛋白質的純化，還可用于研究蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白質翻譯后修飾以及蛋白質功能分析等領域。免疫沉淀的基本步驟包括樣品制備、抗體孵育、復合物捕獲和洗脫。免疫沉淀操作中，合適抗體的選擇是決定能否成功捕獲目標抗原的重要前提。南京Protein AG免疫沉淀實驗原理

之后加入 Protein A/G 珠子，再次孵育，使抗原 - 抗體復合物與珠子結合。通過離心或磁力分離，將結合有蛋白質復合物的珠子收集起來，隨后進行多次洗滌，去除未結合的雜質。洗滌過程中，洗滌液的成分和洗滌次數(shù)同樣影響著實驗結果的純度和特異性。，使用洗脫液將蛋白質復合物從珠子上洗脫下來，用于后續(xù)的分析。Co-IP 免疫沉淀在生命科學研究的多個領域發(fā)揮著關鍵作用。在信號傳導通路研究中，通過 Co-IP 免疫沉淀可以鑒定出參與同一信號通路的蛋白質，明確它們之間的上下游關系，從而構建完整的信號傳導網(wǎng)絡。上海anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠的選擇利用 Protein A/G 免疫沉淀，可深入探究蛋白質在細胞內(nèi)的功能與相互作用。

例如在研究腫瘤細胞的增殖信號通路時，科研人員可以以某個關鍵的信號蛋白為誘餌，利用 Co-IP 免疫沉淀找出與之相互作用的其他蛋白，揭示腫瘤細胞異常增殖的分子機制。在神經(jīng)科學領域，Co-IP 免疫沉淀可用于研究神經(jīng)元中蛋白質的相互作用，了解神經(jīng)遞質釋放、突觸可塑性等過程的分子基礎。雖然 Co-IP 免疫沉淀技術有著諸多優(yōu)勢，如能夠在接近生理條件下研究蛋白質相互作用，結果更具生理相關性；可以同時檢測多個蛋白質之間的相互作用，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質復合物。

我們向裂解液中加入針對某個已知蛋白（誘餌蛋白）的特異性抗體，抗體與誘餌蛋白結合形成抗原 - 抗體復合物。如同 IP 免疫沉淀一樣，借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體，將抗原 - 抗體復合物從復雜的裂解液中分離出來。此時，與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質（獵物蛋白）也會隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來，從而實現(xiàn)對蛋白質復合物的富集和分析，幫助我們了解細胞內(nèi)蛋白質之間的相互作用關系。實驗流程上，首先同樣是細胞或組織的裂解。免疫共沉淀（Co-IP）是研究蛋白質-蛋白質相互作用的經(jīng)典方法，揭示分子網(wǎng)絡。

免疫沉淀技術自誕生以來，便在生命科學研究領域扮演著舉足輕重的角色。早期的免疫沉淀技術較為簡單，主要依賴于抗原抗體的基本結合原理。隨著研究的深入，科研人員不斷優(yōu)化，使得這一技術逐漸成熟。如今，它已成為研究生物分子相互作用的重要手段。免疫沉淀的原理基于抗原與抗體的特異性識別。在復雜的生物樣本中，抗體如同 “精確制導武器”，能靶向結合目標抗原，形成穩(wěn)定的抗原 - 抗體復合物。再利用固相載體的特性，將復合物從樣本中分離出來，從而實現(xiàn)對目標分子的富集與分析。免疫沉淀搭配其他技術，如 western blot，可對目標蛋白定性定量，豐富研究維度。杭州免疫沉淀磁珠多少錢

通過免疫共沉淀（Co-IP），可以研究蛋白質之間的相互作用網(wǎng)絡。南京Protein AG免疫沉淀實驗原理

免疫沉淀技術的成功關鍵在于抗體的選擇和質量。高特異性和高親和力的抗體能夠顯著提高目標蛋白的富集效率，并減少非特異性結合的干擾。此外，實驗條件的優(yōu)化（如緩沖液成分、孵育時間和溫度）也對實驗結果有重要影響。為了確保實驗的可靠性，通常會設置陰性對照（如使用非特異性抗體）以排除非特異性結合的干擾。免疫沉淀技術的應用非常。例如，在蛋白質-蛋白質相互作用研究中，免疫沉淀可以與質譜聯(lián)用（Co-IP/MS）來鑒定與目標蛋白相互作用的蛋白網(wǎng)絡。南京Protein AG免疫沉淀實驗原理