“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的結(jié)合蛋白，進(jìn)行小規(guī)模的蛋白質(zhì)親和純化的實(shí)驗(yàn)。更確切地說(shuō)，IP是采用固定在微珠支持物(一般是瓊脂糖樹脂)上的特定抗體，從復(fù)雜的混合物中，純化單一抗原的實(shí)驗(yàn)。固定化蛋白質(zhì)復(fù)合物的組裝既可以分步進(jìn)行，也可以一步完成。 ...

免疫共沉淀分析（Co-IP）與IP十分類似，基本的技術(shù)都是采用目標(biāo)抗原特異性的固相化抗體；但I(xiàn)P的目標(biāo)是純化單一抗原，而Co-IP旨在分離抗原及與抗原結(jié)合的蛋白質(zhì)或配體。 在Co-IP實(shí)驗(yàn)中，已知抗原稱為誘餌蛋白，與之結(jié)合的蛋白則稱為靶蛋白。靶蛋白可能是一...

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體檢測(cè)出現(xiàn)假陰性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 樣本質(zhì)量問(wèn)題：如果采集的樣本中含有抑制劑或者樣本在處理、存儲(chǔ)過(guò)程中出現(xiàn)問(wèn)題，可能會(huì)影響PCR反應(yīng)，導(dǎo)致假陰性。 2. 技術(shù)或操作問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)操作中的誤差，如樣本處理不當(dāng)、試劑配制錯(cuò)誤、...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation，簡(jiǎn)稱IP）是一種生物化學(xué)方法，它利用特異性抗體對(duì)抗原進(jìn)行親和純化。在含有目的抗原的細(xì)胞裂解液中加入特定的抗體以及Protein A/G-Beads（預(yù)先將Protein A/G固定結(jié)合在磁珠上），根據(jù)抗...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation，簡(jiǎn)稱IP）是一種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，用于從細(xì)胞或組織裂解物中分離和純化特定蛋白質(zhì)。這項(xiàng)技術(shù)依賴于抗體的高度特異性，通過(guò)抗體與目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的富集和純化。 具體操作步驟通常包括以下幾...

支原體污染的來(lái)源主要包括以下幾個(gè)方面： 1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。 2. 實(shí)驗(yàn)操作人員的手部、衣物或皮膚表面可能攜帶支原體，造成細(xì)胞培養(yǎng)的污染。 3. 培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料如果受...

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點(diǎn)： 1. 無(wú)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)：支原體是沒(méi)有細(xì)胞壁的微生物，這使得許多作用于細(xì)胞壁的抗*素對(duì)支原體無(wú)效。 2. 微小體積：支原體體積小，能夠穿過(guò)常規(guī)的除菌濾膜，例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜...

細(xì)胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測(cè)的原因主要有以下幾點(diǎn)： 1. 支原體污染率高：常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染率保守估計(jì)在15-35%之間。 2. 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果：支原體污染會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，影響培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)和生理特征。 3. 難以用光學(xué)顯...

RIP技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于： 1. 特異性：利用特異性抗體，可以精確地捕獲目標(biāo)RNA結(jié)合蛋白及其相互作用的RNA。 2. 應(yīng)用場(chǎng)景多：適用于研究RNA結(jié)合蛋白、miRNA、lncRNA等非編碼RNA與蛋白質(zhì)的相互作用。 3. 技術(shù)結(jié)合：RIP后...

檢測(cè)新鮮培養(yǎng)基是否有支原體污染，可以采用以下五種方案： 1. 培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)且可靠的方法，通過(guò)將培養(yǎng)基接種到適宜支原體生長(zhǎng)的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上，觀察是否有支原體生長(zhǎng)。這種方法較為耗時(shí)，但成本較低。 2. 熒光染色法：使用特定的熒光染...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation，簡(jiǎn)稱IP）是一種生物化學(xué)方法，它利用特異性抗體對(duì)抗原進(jìn)行親和純化。在含有目的抗原的細(xì)胞裂解液中加入特定的抗體以及Protein A/G-Beads（預(yù)先將Protein A/G固定結(jié)合在磁珠上），根據(jù)抗...

qPCR法，即定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Quantitative Polymerase Chain Reaction）法，是一種高度靈敏和特異的分子生物學(xué)技術(shù)，用于檢測(cè)和定量DNA序列。在支原體檢測(cè)中，qPCR法的原理主要包括以下幾個(gè)步驟： 1. DNA提...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)大的技術(shù)，用于研究蛋白質(zhì)與DNA之間的相互作用，尤其是在轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、復(fù)制以及表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域。然而，像所有實(shí)驗(yàn)技術(shù)一樣，ChIP實(shí)驗(yàn)也有其優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。 ChIP實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)： 1. 體內(nèi)反應(yīng)的反映：C...

方法 靈敏度 優(yōu)勢(shì) 劣勢(shì) ...

ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）實(shí)驗(yàn)是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的技術(shù)。以下是ChIP實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法概述： 1. 交聯(lián)：將細(xì)胞與交聯(lián)劑（如1%甲醛）孵育，通常在室溫下進(jìn)行10-15分鐘。 2. 終止交聯(lián)：添加甘氨酸以終止交聯(lián)反應(yīng)，孵育5分鐘。...

支原體預(yù)防的策略主要包括以下幾個(gè)方面： 1. 控制污染源：通過(guò)定期檢測(cè)和去除細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)無(wú)支原體存在，從而獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 2. 改善無(wú)菌操作技術(shù)：通過(guò)提高實(shí)驗(yàn)人員的操作技術(shù)和意識(shí)，避免在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中引入...

支原體污染的來(lái)源主要包括以下幾個(gè)方面： 1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。 2. 實(shí)驗(yàn)操作人員的手部、衣物或皮膚表面可能攜帶支原體，造成細(xì)胞培養(yǎng)的污染。 3. 培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料如果受...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）在生物醫(yī)學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用，以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域： 1. 蛋白質(zhì)相互作用研究：IP技術(shù)可以用來(lái)研究蛋白質(zhì)之間的相互作用，揭示蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò)。 2...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟： 1. 目標(biāo)蛋白質(zhì)的選擇： 2. 抗體的選擇：選擇特異性強(qiáng)、親和力高的抗體來(lái)捕獲目標(biāo)蛋白質(zhì) 3. 樣本的準(zhǔn)備：收集和準(zhǔn)備細(xì)胞或組織...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進(jìn)行的核酸擴(kuò)增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測(cè)有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在...

支原體去除的原理通常涉及以下幾個(gè)方面： 1. 抗*素作用：使用特定的抗*素制劑來(lái)抑制支原體的生長(zhǎng)和繁殖。例如，含有喹諾酮類、四環(huán)素衍生物類和大環(huán)內(nèi)酯類抗*素的混合制劑，這些抗*素能夠抑制支原體的DNA和蛋白合成。 2. 破壞細(xì)胞膜：支原體去...

支原體污染和黑膠蟲污染是兩種不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)污染，它們具有各自的特點(diǎn)和區(qū)別： 支原體污染：在相差顯微鏡下，支原體呈暗色微小顆粒位于細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。 黑膠蟲污染：在高倍鏡下，被黑膠蟲污染的細(xì)胞膜會(huì)變得模糊不清，邊界不清晰，有粗糙感。 ...

支原體去除試劑在清*支原體的過(guò)程中可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過(guò)與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過(guò)...

RIP 技術(shù)的原理（RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay，RNA 結(jié)合蛋白免疫沉淀）主要是運(yùn)用針對(duì)目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來(lái)，經(jīng)過(guò)分離純化就可以對(duì)結(jié)合在復(fù)合物上的RNA 進(jìn)行q-PCR...

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，可以采取以下一些方法嘗試去除污染： 1. 抗*素治*：使用針對(duì)支原體有效的抗*素，如四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類等。根據(jù)搜索結(jié)果，可以加入高濃度抗*素進(jìn)行沖擊治*，例如慶大霉素 200ug/ml，四...

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 擴(kuò)增產(chǎn)物污染：PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理，極微量的污染就可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。 2. 引物設(shè)計(jì)不當(dāng)：引物設(shè)計(jì)不夠特異性，可能會(huì)與非目標(biāo)序列發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。 ...

免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實(shí)驗(yàn)步驟通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)： 1. 細(xì)胞裂解：首先需要收集細(xì)胞并裂解它們，以釋放細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。這通常通過(guò)添加含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液來(lái)完成，以防止蛋白質(zhì)降解。 2. 裂...

免疫沉淀（immunoprecipitation）是指利用抗體可與抗原特異性結(jié)合的特性，將抗原（常為靶蛋白）從混合體系沉淀下來(lái)，初步分離靶蛋白的一種方法。免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一種在體外探測(cè)兩個(gè)蛋白分子間是否存在...

需要定期檢測(cè)支原體污染的客戶主要包括以下幾類： 1. 生物醫(yī)藥企業(yè)：生產(chǎn)涉及細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品的公司，包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。 2. 細(xì)胞公司：進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè)，需要確保所用細(xì)胞的安全性和有效性。 3. 科研機(jī)...

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點(diǎn)： 1. 無(wú)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)：支原體是沒(méi)有細(xì)胞壁的微生物，這使得許多作用于細(xì)胞壁的抗*素對(duì)支原體無(wú)效。 2. 微小體積：支原體體積小，能夠穿過(guò)常規(guī)的除菌濾膜，例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜...