在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，選擇合適的培養(yǎng)條件非常重要，以下是一些選擇培養(yǎng)條件的建議：1.培養(yǎng)基：選擇適合肝細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，如William'sE培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基等。不同的培養(yǎng)基成分可能會(huì)影響肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。2.溫度和濕度：肝細(xì)胞的培養(yǎng)溫度通常為37°C，濕度為95%左右。在培養(yǎng)過(guò)程中，需要保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度和濕度穩(wěn)定。3.氧氣含量：肝細(xì)胞需要充足的氧氣供應(yīng)，因此需要選擇透氣性好的培養(yǎng)容器，并保持培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣含量充足。4.細(xì)胞密度：肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō)，肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度不宜過(guò)高，以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。5.細(xì)胞因子：在培養(yǎng)過(guò)程中，...

原代肝細(xì)胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養(yǎng)板上，原代肝細(xì)胞可貼壁培養(yǎng)，同樣高密度培養(yǎng)有助于肝細(xì)胞分化狀態(tài)的維持。但原代肝細(xì)胞在體外的培養(yǎng)時(shí)間較短，人原代肝細(xì)胞在體外培養(yǎng)3天內(nèi)可保持乙肝病毒易感性，培養(yǎng)兩周發(fā)生明顯的去分化以及細(xì)胞凋亡情況。北京大學(xué)鄧宏魁教授發(fā)表在《科學(xué)》上的數(shù)據(jù)顯示，通過(guò)添加5種小分子化合物抑制原代肝細(xì)胞去分化進(jìn)程，可在體外長(zhǎng)期維持肝細(xì)胞的分化狀態(tài)，維持時(shí)間長(zhǎng)達(dá)八周。那為什么原代肝細(xì)胞在體外容易去分化呢？肝細(xì)胞在體外缺乏了肝細(xì)胞與肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的交流，又或者缺乏了肝臟的三維結(jié)構(gòu)。基于以上問(wèn)題與分析，我在碩士期間開展了肝細(xì)胞與肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)工作。結(jié)果顯示...

在新藥研發(fā)的過(guò)程中，原代肝細(xì)胞是不可或缺的體外模型，這是因?yàn)楦闻K能夠代謝大部分藥物。因此，通過(guò)使用原代肝細(xì)胞，可以更加準(zhǔn)確地模擬藥物在人體內(nèi)的代謝和毒理反應(yīng)，為新藥研發(fā)提供更加可靠的數(shù)據(jù)支持。 在藥物代謝實(shí)驗(yàn)中，原代肝細(xì)胞可以幫助研究人員了解藥物在體內(nèi)的代謝途徑、代謝產(chǎn)物以及代謝速率等信息。這些信息對(duì)于藥物的研發(fā)和臨床應(yīng)用都具有重要意義。同時(shí)，在藥物毒理實(shí)驗(yàn)中，原代肝細(xì)胞也能夠幫助研究人員評(píng)估藥物的毒性和安全性，為藥物的臨床應(yīng)用提供保障。 除此之外，原代肝細(xì)胞還可以用于藥物靶向誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行特定的處理，可以使其表達(dá)特定的蛋白質(zhì)或基因，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物靶向的調(diào)控。這種方法可以幫助研...

原代肝細(xì)胞還廣泛應(yīng)用于構(gòu)建移植人肝組織的小鼠模型。為了研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和開發(fā)新的解決方法，科學(xué)家們開發(fā)了小鼠模型來(lái)模擬人類肝臟疾病。其中，將人原代肝細(xì)胞移植于鼠可建立移植人肝組織的高度免疫缺陷的小鼠模型。這種模型可以用于研究肝炎、livercancer、肝纖維化等肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和治療方法。常用的小鼠模型為HBV三聚體小鼠模型。該模型首先對(duì)BALB/c鼠進(jìn)行全身致命性照射以去除正常小鼠的免疫系統(tǒng)，然后用SCID小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行免疫重構(gòu)，然后將已經(jīng)受HBV影響的人原代肝細(xì)胞移植到鼠肝內(nèi)。大約80％的鼠出現(xiàn)病毒血癥，這意味著該模型可以用于研究HBV的發(fā)病機(jī)制和克服方法。盡管血漿中病毒滴度比...

在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，是否需要添加血清？在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加血清。血清是一種含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的液體，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。血清中含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以為細(xì)胞提供能量和營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。此外，血清中還含有多種生長(zhǎng)因子，如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等，可以促進(jìn)肝細(xì)胞的分化和增殖。然而，血清中也含有一些雜質(zhì)和微生物，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能產(chǎn)生不利影響。因此，在使用血清時(shí)，需要選擇高質(zhì)量的血清，并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè)，以確保血清的質(zhì)量和安全性。此外，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，也可以使用...

原代肝細(xì)胞的體外擴(kuò)增不是一件容易的事。原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型，具有豐富的酶系和多種特異性功能，因此被大量用于生物化學(xué)、實(shí)驗(yàn)性肝損傷、藥代動(dòng)力學(xué)、毒理學(xué)和cancer等研究。然而，這些細(xì)胞在體外的存活能力非常有限，所以分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細(xì)胞并不是一件容易的事情。 分離高質(zhì)量的原代肝細(xì)胞，需要采用一系列復(fù)雜的技術(shù)和方法。首先，需要選擇合適的動(dòng)物模型，以獲得足夠數(shù)量的肝組織。然后，需要對(duì)肝組織進(jìn)行消化和分離，通常使用的方法包括機(jī)械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過(guò)程中，需要注意避免對(duì)細(xì)胞的損傷，以保證細(xì)胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細(xì)胞也需要按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培育...

原代肝細(xì)胞是一種來(lái)源于肝臟組織的細(xì)胞，具有很高的酶水平和重現(xiàn)性，是進(jìn)行肝臟相關(guān)研究的重要材料。我們公司的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù)，能夠保持細(xì)胞的原始性，具有很高的可再生性和穩(wěn)定性，可以廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的研究和藥物篩選。我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用關(guān)鍵技術(shù)的培養(yǎng)方法，能夠保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，同時(shí)不會(huì)影響細(xì)胞的穩(wěn)定性和功能。我們的產(chǎn)品具有以下特點(diǎn)：1.高質(zhì)量：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品來(lái)源于健康的人體肝臟組織，具有很高的生物學(xué)活性和穩(wěn)定性，可以保證研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。2.易于培養(yǎng)：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù)，能夠保持細(xì)胞的原始性，同時(shí)不需要復(fù)雜的培養(yǎng)條件，可以方便地進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)...

在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，如何避免污染？在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，避免污染是非常重要的，以下是一些避免細(xì)胞污染的方法：1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前，需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌處理，并在操作過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無(wú)菌技術(shù)：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要使用無(wú)菌技術(shù)，例如使用無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌吸管、無(wú)菌手套等，以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔：培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備，并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng)：在培養(yǎng)過(guò)程中，需要控制人員流動(dòng)，盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室，以避免污染。5.使用...

保存溫度是影響原代肝細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來(lái)說(shuō)，原代肝細(xì)胞的保存溫度為4℃，但是在這種溫度下，細(xì)胞的代謝活動(dòng)仍然會(huì)繼續(xù)進(jìn)行，導(dǎo)致細(xì)胞的壽命有限。因此，為了延長(zhǎng)原代肝細(xì)胞的壽命，可以將其保存在低溫下，如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細(xì)胞的代謝活動(dòng)，延長(zhǎng)細(xì)胞的壽命，但是在保存過(guò)程中需要注意加入凍存液，防止細(xì)胞凍結(jié)損傷。 原代肝細(xì)胞的運(yùn)輸也是一個(gè)重要的問(wèn)題。在運(yùn)輸過(guò)程中，細(xì)胞可能會(huì)受到振動(dòng)、溫度變化、氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響，導(dǎo)致細(xì)胞失活或功能受損。為了保證細(xì)胞的完整性和功能性，可以采用液氮運(yùn)輸?shù)姆绞?，即在低溫下運(yùn)輸細(xì)胞。在運(yùn)輸前給細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣，也可...

原代肝細(xì)胞的分離方法有很多種，以下是其中四種常見的方法：1.膠原酶消化法：膠原酶是一種使用廣的細(xì)胞分離酶，可以消化肝細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白，從而使肝細(xì)胞分離出來(lái)。該方法通常使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過(guò)離心和過(guò)濾等步驟分離肝細(xì)胞。2.機(jī)械分離法：機(jī)械分離法是一種通過(guò)物理方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法通常使用攪拌器、濾網(wǎng)或離心等設(shè)備將肝臟組織中的肝細(xì)胞分離出來(lái)。3.酶消化結(jié)合機(jī)械分離法：這種方法是將膠原酶消化和機(jī)械分離相結(jié)合的方法。該方法通常先使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過(guò)機(jī)械分離的方法將肝細(xì)胞分離出來(lái)。4.密度梯度離心法：密度梯度離心法是一種通過(guò)離心的方法分離肝細(xì)胞的方法。該方法...

在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，選擇合適的培養(yǎng)條件非常重要，以下是一些選擇培養(yǎng)條件的建議：1.培養(yǎng)基：選擇適合肝細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，如William'sE培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基等。不同的培養(yǎng)基成分可能會(huì)影響肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。2.溫度和濕度：肝細(xì)胞的培養(yǎng)溫度通常為37°C，濕度為95%左右。在培養(yǎng)過(guò)程中，需要保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度和濕度穩(wěn)定。3.氧氣含量：肝細(xì)胞需要充足的氧氣供應(yīng)，因此需要選擇透氣性好的培養(yǎng)容器，并保持培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣含量充足。4.細(xì)胞密度：肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō)，肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度不宜過(guò)高，以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。5.細(xì)胞因子：在培養(yǎng)過(guò)程中，...

肝細(xì)胞是人體內(nèi)重要的細(xì)胞之一，扮演著重要的代謝作用。然而，由于肝細(xì)胞的特殊性質(zhì)，使得它們?cè)隗w外的培養(yǎng)和研究變得非常困難。為了解決這個(gè)問(wèn)題，科學(xué)家們開發(fā)了許多不同的肝細(xì)胞培養(yǎng)方法，其中包括貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。 隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的出現(xiàn)，原代肝細(xì)胞的應(yīng)用范圍也進(jìn)一步得到了擴(kuò)展。3D培養(yǎng)是一種將細(xì)胞培養(yǎng)在三維空間中的方法，可以更好地模擬體內(nèi)的情況。在3D培養(yǎng)中，肝細(xì)胞可以形成復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，從而更好地模擬體內(nèi)的情況。此外，3D培養(yǎng)還可以使原代肝細(xì)胞更好地保持其原有的形態(tài)和功能，從而更好地研究肝細(xì)胞的生理和病理過(guò)程。 原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)和研究對(duì)于了解肝臟的生理和病理過(guò)程至關(guān)重要。不同的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法各有優(yōu)...

貓作也是原代肝細(xì)胞的常用供體，近年來(lái)在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來(lái)越重要的角色。相對(duì)于小鼠和大鼠等試驗(yàn)用動(dòng)物，貓的體型更大，便于試驗(yàn)操作和觀察，因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢疫局（APHIS）的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，在2017年，美國(guó)就使用了約萬(wàn)只貓進(jìn)行試驗(yàn)研究。而在中國(guó)，試驗(yàn)用貓的年使用量也在不斷增加，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測(cè)就需要使用400-500只試驗(yàn)用貓。貓的原代肝細(xì)胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過(guò)對(duì)貓的肝細(xì)胞進(jìn)行體外研究，可以更加準(zhǔn)確地評(píng)估藥物的代謝和毒性，為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外，貓的原代肝細(xì)胞還可以用于疾病模型的建立和藥...

原代肝細(xì)胞由于其敏感性和易受外界環(huán)境影響，細(xì)胞活率較低，成為制約其應(yīng)用的瓶頸之一。 適當(dāng)?shù)姆椒梢蕴岣咴渭?xì)胞培養(yǎng)活率。首先，選擇合適的動(dòng)物或人體來(lái)源是提高原代肝細(xì)胞細(xì)胞活率的關(guān)鍵。一般來(lái)說(shuō)，年齡較小、健康狀態(tài)良好的動(dòng)物或人體組織中的原代肝細(xì)胞活性較高，因此應(yīng)盡可能選擇這些來(lái)源。 其次，分離和培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)胞處理方法也會(huì)影響原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率。在分離過(guò)程中，應(yīng)盡可能減少機(jī)械或化學(xué)損傷，避免對(duì)細(xì)胞造成不可逆的傷害。在培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)注意細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)環(huán)境，包括培養(yǎng)基的配方、溫度、濕度、氧氣濃度等因素，以保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和代謝。 此外，添加適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)因子和細(xì)胞因子也可以提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活...

原代肝細(xì)胞是簡(jiǎn)單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系，原代肝細(xì)胞在造模的同時(shí)不需要復(fù)雜的對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程，以及誘導(dǎo)分化，可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實(shí)情況，有數(shù)據(jù)表明，原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍，同時(shí)這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于，原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨(dú)特的肝毒模型，因?yàn)樵?xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈(zèng)者特有的生理特性，同時(shí)也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)...

在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，如何避免污染？在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，避免污染是非常重要的，以下是一些避免細(xì)胞污染的方法：1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前，需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌處理，并在操作過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無(wú)菌技術(shù)：在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要使用無(wú)菌技術(shù)，例如使用無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌吸管、無(wú)菌手套等，以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔：培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備，并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng)：在培養(yǎng)過(guò)程中，需要控制人員流動(dòng)，盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室，以避免污染。5.使用...

原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法，但在培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染，這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中，endotoxin可能來(lái)自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此，需要采取一些措施來(lái)去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑，例如聚陽(yáng)離子樹脂（Polyclonal Cationic Resin，PCR）或聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）。這些去除劑可以吸附endotoxin，從而...

貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng)，形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn)： 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞：從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后，需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè)，確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng)，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng)：將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需...

原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果，它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng)，其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系，為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā)，是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法，但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如，動(dòng)物...

肝臟是人體內(nèi)重要的organ之一，它不僅是人體的化學(xué)工廠，還是藥物代謝的重要organ。藥物在體內(nèi)的代謝過(guò)程中，肝臟扮演著至關(guān)重要的角色。因此，研究肝臟的代謝功能對(duì)于藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究具有重要的意義。 在體外藥物代謝研究中，肝臟是常用的模型之一。常用的體外模型包括肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片和重組人代謝酶等。其中，原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性，基本維持了肝臟的代謝功能，特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平，成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。 原代肝細(xì)胞的研究對(duì)于藥物代謝和毒理學(xué)研究具有重要的意義。它可以模擬體內(nèi)肝臟的代謝過(guò)程，研究...

原代肝細(xì)胞有三種常用的分離方法，每種方法都有對(duì)應(yīng)的原理。原代肝細(xì)胞是從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的未經(jīng)過(guò)傳代的肝細(xì)胞，具有很高的生物學(xué)活性和生理功能，是研究肝臟生理和病理的重要材料。目前，分離原代肝細(xì)胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中，兩步膠原酶灌流法是一種比較常用的方法，因?yàn)樗鼘?duì)肝細(xì)胞的損傷作用較小，可以提高肝細(xì)胞的產(chǎn)量和活力。 在兩步膠原酶灌流法中，首先需要使用螯合劑來(lái)螯合肝臟中的鐵離子，以避免膠原酶的活性受到抑制。然后，將肝臟灌注膠原酶，使其分解膠原纖維，從而釋放出肝細(xì)胞。這種方法可以分離出數(shù)量多且活力好的肝細(xì)胞，適用于各種動(dòng)物的肝臟，包括小鼠、大鼠、豬等。 直接剪切法是...

原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學(xué)者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過(guò)程，學(xué)者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞的方法。 一般來(lái)說(shuō)，原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右，7天以后細(xì)胞的狀態(tài)和活率會(huì)逐漸開始下降。 為了克服這些局限性，科學(xué)家們開始嘗試將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章，將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí)，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞可以相互作用，形成更加復(fù)雜的細(xì)胞群體，從而更好地模擬肝臟的生理和病理過(guò)程，通過(guò)這種方法可以將原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)128天。 當(dāng)然，共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性，比如如何控制細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、如何保持細(xì)胞的穩(wěn)定性等。...

肝細(xì)胞是人體內(nèi)重要的細(xì)胞之一，扮演著重要的代謝作用。然而，由于肝細(xì)胞的特殊性質(zhì)，使得它們?cè)隗w外的培養(yǎng)和研究變得非常困難。為了解決這個(gè)問(wèn)題，科學(xué)家們開發(fā)了許多不同的肝細(xì)胞培養(yǎng)方法，其中包括貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。 隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的出現(xiàn)，原代肝細(xì)胞的應(yīng)用范圍也進(jìn)一步得到了擴(kuò)展。3D培養(yǎng)是一種將細(xì)胞培養(yǎng)在三維空間中的方法，可以更好地模擬體內(nèi)的情況。在3D培養(yǎng)中，肝細(xì)胞可以形成復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，從而更好地模擬體內(nèi)的情況。此外，3D培養(yǎng)還可以使原代肝細(xì)胞更好地保持其原有的形態(tài)和功能，從而更好地研究肝細(xì)胞的生理和病理過(guò)程。 原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)和研究對(duì)于了解肝臟的生理和病理過(guò)程至關(guān)重要。不同的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法各有優(yōu)...

原代肝細(xì)胞是簡(jiǎn)單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系，原代肝細(xì)胞在造模的同時(shí)不需要復(fù)雜的對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程，以及誘導(dǎo)分化，可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實(shí)情況，有數(shù)據(jù)表明，原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍，同時(shí)這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于，原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨(dú)特的肝毒模型，因?yàn)樵?xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈(zèng)者特有的生理特性，同時(shí)也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)...

原代肝細(xì)胞的研究一直是科學(xué)家們關(guān)注的焦點(diǎn)之一。原代肝細(xì)胞作為肝臟的主要細(xì)胞類型，對(duì)于肝臟生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究具有重要的意義。 原代肝細(xì)胞的研究需要多學(xué)科的合作，包括生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和化學(xué)等。生物學(xué)家們需要對(duì)肝臟的解剖結(jié)構(gòu)、生理功能和細(xì)胞分化等方面進(jìn)行深入研究，以便更好地理解原代肝細(xì)胞的生物學(xué)特性。醫(yī)學(xué)家們則需要將原代肝細(xì)胞的研究與臨床實(shí)踐相結(jié)合，探索其在肝臟疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。而化學(xué)家們則需要開發(fā)出更加高效的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)和分離技術(shù)，以便更好地保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 原代肝細(xì)胞的研究還需要不斷地更新和改進(jìn)技術(shù)和方法。隨著科技的不斷進(jìn)步，越來(lái)越多的高通量技術(shù)和基因編輯技術(shù)被應(yīng)用到原代肝細(xì)胞的研...

原代肝細(xì)胞的分離凍存技術(shù)是一項(xiàng)非常復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和高超的技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室中，必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制的要求，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。同時(shí)，由于涉及到人體組織的使用，還需要遵守倫理和法律規(guī)定，確保實(shí)驗(yàn)的合法性和道德性。在實(shí)驗(yàn)室中，分離原代肝細(xì)胞需要使用一系列的試劑和設(shè)備，如胰蛋白酶、膽汁酸、離心機(jī)等。這些試劑和設(shè)備必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保其純度和有效性。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件也必須符合要求，如溫度、濕度、潔凈度等，以保證實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。在分離原代肝細(xì)胞的過(guò)程中，還需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞鑒定等步驟。這些步驟需要高超的技術(shù)和經(jīng)驗(yàn)，以確保細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和增殖。...

原代肝細(xì)胞研究歷史可以追溯到20世紀(jì)初。當(dāng)時(shí)，科學(xué)家們開始對(duì)肝臟的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行深入研究，并嘗試從肝臟中分離出原代肝細(xì)胞進(jìn)行研究。早期的研究方法是通過(guò)肝臟切片的方式來(lái)分離出肝細(xì)胞，但是這種方法存在很多局限性，比如細(xì)胞的存活率很低，細(xì)胞的數(shù)量也很有限。 隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，科學(xué)家們開始嘗試使用酶解法來(lái)分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的存活率和數(shù)量，但是由于酶的質(zhì)量和濃度的不同，細(xì)胞的質(zhì)量和純度也存在很大的差異。 在20世紀(jì)50年代，科學(xué)家們開始使用離心法來(lái)分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的純度和數(shù)量，但是由于離心過(guò)程中細(xì)胞受到的力的不同，細(xì)胞的形態(tài)和功能也會(huì)發(fā)生改變。 隨著細(xì)...

原代肝細(xì)胞的分類是非常多樣化的，每種類型的細(xì)胞都具有不同的形態(tài)和功能，它們共同構(gòu)成了肝臟。接下來(lái)我們就來(lái)看看肝臟的構(gòu)成。首先是肝細(xì)胞，也稱為肝細(xì)胞主細(xì)胞，它們占據(jù)了肝臟細(xì)胞總數(shù)的80%以上。肝細(xì)胞是肝臟重要的細(xì)胞類型，它們具有多種重要的生理功能，如合成和分泌膽汁、代謝和儲(chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。 其次是肝星狀細(xì)胞，也稱為伊氏細(xì)胞。肝星狀細(xì)胞是肝臟中的一種非常重要的細(xì)胞類型，它們具有多種功能，如調(diào)節(jié)肝臟免疫反應(yīng)、維持肝臟微環(huán)境穩(wěn)定等。 還有肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞，它們是肝內(nèi)膽管的主要細(xì)胞類型，具有分泌和排泄膽汁的功能。此外，還有肝內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞、肝內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞等。 總之，原代肝細(xì)胞的分類是非常多樣化的，每種類型的...

原代肝細(xì)胞有三種常用的分離方法，每種方法都有對(duì)應(yīng)的原理。原代肝細(xì)胞是從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的未經(jīng)過(guò)傳代的肝細(xì)胞，具有很高的生物學(xué)活性和生理功能，是研究肝臟生理和病理的重要材料。目前，分離原代肝細(xì)胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中，兩步膠原酶灌流法是一種比較常用的方法，因?yàn)樗鼘?duì)肝細(xì)胞的損傷作用較小，可以提高肝細(xì)胞的產(chǎn)量和活力。 在兩步膠原酶灌流法中，首先需要使用螯合劑來(lái)螯合肝臟中的鐵離子，以避免膠原酶的活性受到抑制。然后，將肝臟灌注膠原酶，使其分解膠原纖維，從而釋放出肝細(xì)胞。這種方法可以分離出數(shù)量多且活力好的肝細(xì)胞，適用于各種動(dòng)物的肝臟，包括小鼠、大鼠、豬等。 直接剪切法是...

貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型，也是藥物代謝實(shí)驗(yàn)的重要模型。這種模型可以通過(guò)倍數(shù)變化方法來(lái)評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來(lái)說(shuō)，研究人員可以使用已知的陽(yáng)性和陰性對(duì)照藥物來(lái)校準(zhǔn)體外系統(tǒng)，然后將研究藥物與細(xì)胞共孵育，測(cè)定孵育后CYP酶的mRNA表達(dá)水平倍數(shù)變化，以評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機(jī)制，從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象，指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性，從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快，使得原藥的血藥濃度下降，進(jìn)而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見，因?yàn)樵S多藥物都需要通過(guò)肝臟代謝酶來(lái)進(jìn)行代謝，而...