細(xì)胞凍存液的配置成分及比例: 細(xì)胞凍存液是含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液。在凍存前比較好換一次培養(yǎng)液。 配置方法: 1、將DMSO和小牛血清加入培養(yǎng)液中,各自含量占總體積的10%; 2、然后用濾膜過濾配置好的細(xì)胞凍存液; 3、用**保存瓶分裝保存?zhèn)溆眉纯?15%(常見為10%)的DMSO或甘油,含10%-20%血清的凍存培養(yǎng)液。一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞。有人親測(cè)10%血清凍存細(xì)胞,結(jié)果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有...
無血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清快速細(xì)胞凍存液:含動(dòng)物來源的血清...
無血清凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。該產(chǎn)品添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑,可延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降速率,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍存效果。另外,添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,能較大降低細(xì)胞...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細(xì)胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達(dá)到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲(chǔ)存時(shí)間一般比較短,不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求。且這樣人力和時(shí)間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動(dòng)物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低...
細(xì)胞凍存液的作用是什么?滲透性冷凍保護(hù)劑:可以滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是一些小分子物質(zhì),主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護(hù)劑:不能滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是些大分子物質(zhì),主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護(hù)劑同溶液中的水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,同時(shí)冷凍保護(hù)劑可以通過在細(xì)胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度,降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細(xì)胞免受溶質(zhì)的損傷。滲透性冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前,滲透到細(xì)胞內(nèi),在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,降...
無血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分。無血清細(xì)胞,無血清干細(xì)胞及MSC凍存液。保存條件:儲(chǔ)存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個(gè)月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細(xì)胞凍存液,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。無血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件:為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低。合肥天津無血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存經(jīng)...
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,目前慣用的就是4℃ 30min、-20℃ 1h30min、-80℃ 2h后轉(zhuǎn)入液氮中。2、正常情況下,經(jīng)過-20℃ 1h30min這一步后,凍存管內(nèi)的細(xì)胞已經(jīng)處于凝固狀態(tài),如果此時(shí)凍存管內(nèi)還是液體,很可能是DMSO或冰箱冷凍功能出現(xiàn)了問題。如若遇到這種情況,不能因?yàn)闀r(shí)間到了,就把把液體狀態(tài)的凍存管放置到液氮中,可以適當(dāng)延長(zhǎng)在-20℃環(huán)境下的冷凍時(shí)間30-60分鐘,直至凍存液凝固后再放到液氮中。在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提...
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106 cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混...
細(xì)胞凍存的基本原理:細(xì)胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作,低溫貯藏的目的是通過較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài),使細(xì)胞“不會(huì)老”,所以可以長(zhǎng)期保存。因?yàn)閮鋈谶^程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的,因此,需要開發(fā)出有效的技術(shù)來防止細(xì)胞死亡和損傷。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響,目前多采用DMSO,甘油,乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑。它們的作用機(jī)制包括:自由進(jìn)入細(xì)胞,取代水,使冰點(diǎn)下降,充當(dāng)鹽的二次溶劑,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí)、省錢)。...
新常態(tài)下細(xì)胞凍存指南:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍速融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。典型的細(xì)胞凍存液是在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些實(shí)驗(yàn)室中仍然采用這種自制自配的凍存液,優(yōu)點(diǎn)是成本低,適合自己的...
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí),必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑??焖賰龃婕床恍枰?jīng)過梯度降溫,直接將細(xì)胞放入-80 ℃冰箱24h。成都無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。無任何外源蛋白和血清,適用于各類動(dòng)物細(xì)胞株凍存。長(zhǎng)沙無血清細(xì)胞凍存液?jiǎn)蝺r(jià)無血清細(xì)胞凍存液的用途:無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶...
無血清細(xì)胞凍存液的操作規(guī)范:1、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期,顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等。選擇狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作(注:貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù))。2、500~1000g離心5min,棄上清。3、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10×106/ml,置于凍存管中密閉。4、采取逐級(jí)降溫保存:4℃放置20min,-20℃放置30min,-70℃?過夜,置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。注意:務(wù)必超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作,避免污染。雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇,以檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。在冰袋附近操作時(shí),低溫避免保護(hù)...
細(xì)胞凍存的操作步驟:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-...
無血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:1.高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級(jí)原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動(dòng)物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2.細(xì)胞存活率高,無批次差異。3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡(jiǎn)捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí)、省力、省錢)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)...
細(xì)胞凍存液的原理及配制方法:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。不同的凍存方法替代了不同的凍存體系。徐州無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商細(xì)胞凍存液的作用是什么?滲透性冷凍保護(hù)劑:可以滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是一些小分子物質(zhì),主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇...
無血清細(xì)胞凍存液:1. 逐滴加入5 - 7 mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15 mL的離心管中,加入的同時(shí)輕輕混勻。2. 室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘。3. 吸出培養(yǎng)基,使細(xì)胞沉淀完好無損。使用2 mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1 mL的培養(yǎng)基中。小心保持細(xì)胞作為聚集體。4. 將0.5 mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個(gè)冷凍管可以鋪板兩個(gè)孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細(xì)胞聚集體數(shù)量進(jìn)行調(diào)整。通常在復(fù)蘇后,要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細(xì)胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱。快速前后左右的搖晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細(xì)胞聚集體分布均勻。24小...
細(xì)胞凍存液的原理及配制方法:細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時(shí)候,細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時(shí)可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,如果沒有原始細(xì)胞的凍存,則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。無血清快速細(xì)胞凍存液:能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。南昌正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,...
無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢(shì):簡(jiǎn)單、方便、快捷。1.即用型,無需現(xiàn)配,可直接使用。2.可孔板原位凍存,可微量?jī)龃?,無需使用凍存管。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡(jiǎn)單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的方法:1.驗(yàn)證陽性克隆的細(xì)胞培養(yǎng)孔,將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈;2.加入適量Cellregen無血清細(xì)胞凍存液,充分浸潤(rùn)細(xì)胞(無需消化細(xì)胞);3.蓋上蓋板,直接放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:不含動(dòng)物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染。石家莊...
凍存方式:按照凍存保護(hù)液在凍結(jié)后是否形成冰晶來劃分,凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種。非玻璃化凍存是利用各種溫級(jí)的冰箱分階段降溫至-70℃~-80℃,然后直接投入液氮進(jìn)行保存;或者是利用電子計(jì)算機(jī)程控降溫儀以及利用液氮的氣、液,按一定的降溫速率從室溫降至-100℃以下,再直接投入液氮保存的方法。以該種方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護(hù)劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護(hù)液保護(hù)懸浮細(xì)胞,直接投入液氮進(jìn)行凍存的方法。以該中方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液沒有冰晶的形成。但目前細(xì)胞凍存較常用的仍是前一種方法。待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該...
無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡(jiǎn)便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長(zhǎng)期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測(cè),包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細(xì)胞毒性,動(dòng)物安全性非常高。無血清凍存液用途:細(xì)胞保藏中心,無血清細(xì)...
無血清細(xì)胞凍存:在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細(xì)胞治好、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍,標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2/℃ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5 ℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4 ℃30分鐘--->-20 ℃ 60分鐘--->-80 ℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時(shí)間又長(zhǎng),很容易遺忘。之后,人...
無血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),大部分的干細(xì)胞,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白,不含血清成分,可有效減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1、無需程序性降溫,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,凍存液無需稀釋。2、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存。3、凍存液不含血清等,較大降低細(xì)胞污染的可能性。保存方法:冰袋運(yùn)輸,4℃保存,保質(zhì)期一年。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí)、省...
復(fù)蘇方:法1)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。4)清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液,通用于人和各種動(dòng)物細(xì)胞株。溫州無血清細(xì)胞...
無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動(dòng)物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細(xì)胞,無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。無血清凍存液用途:無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng):1、各種細(xì)胞對(duì)凍存速度的要求也不一樣;上皮細(xì)胞和成纖維...
無血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),大部分的干細(xì)胞,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白,不含血清成分,可有效減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1、無需程序性降溫,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,凍存液無需稀釋。2、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存。3、凍存液不含血清等,較大降低細(xì)胞污染的可能性。保存方法:冰袋運(yùn)輸,4℃保存,保質(zhì)期一年。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可微量,原位凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時(shí)高效。成都無血清細(xì)胞凍...
如何提高細(xì)胞凍存成功率:無菌!無菌!無菌!要折騰嬌貴的細(xì)胞寶寶,必須要在無菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺(tái),所有的儀器用品提前滅菌,培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對(duì)細(xì)胞的影響經(jīng)常是開始的時(shí)候沒發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已經(jīng)結(jié)束了,所以千萬要小心。除了操作中的各種小細(xì)節(jié),還有一個(gè)實(shí)驗(yàn)雷區(qū),就是配制細(xì)胞凍存液。常見的凍存液配制要遵循培養(yǎng)基 + 血清 + DMSO 的成分要求,根據(jù)細(xì)胞實(shí)際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個(gè)不小心就又會(huì)影響細(xì)胞的存活效果。存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液。蕪湖重慶無血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞凍存液的配置成分及比例: 細(xì)胞凍存液是含10%DM...
細(xì)胞凍存秘籍:程序1.凍存前檢查凍存前,細(xì)胞應(yīng)處于指數(shù)生長(zhǎng)期,確保細(xì)胞處于健康狀態(tài)。理想情況下,應(yīng)在收獲細(xì)胞前24小時(shí)更換培養(yǎng)基。建議對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行微生物污染物,特別是支原體的檢測(cè),并通過適當(dāng)?shù)姆椒ǎ鏢TR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品,那么建議在冷凍前1到2周不使用物品,這樣如果出現(xiàn)污染,可以更容易地發(fā)現(xiàn)。2.收集細(xì)胞通常,您可以使用常規(guī)細(xì)胞傳代的實(shí)驗(yàn)程序來收獲細(xì)胞。細(xì)胞收獲期間盡可能溫和操作。本程序推薦的試劑量是針對(duì)為75平方厘米(T-75)培養(yǎng)瓶;若使用其他培養(yǎng)容器,請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整所用試劑量。A.使用無菌吸管,取出并丟棄培養(yǎng)基。請(qǐng)妥善處置與細(xì)胞接觸的任何材料和溶液。B.用5到10m...
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):不含血清,較大減少細(xì)胞污染。上海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家...
細(xì)胞凍存秘籍:1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進(jìn)展情況。一旦細(xì)胞變圓,輕輕敲擊細(xì)胞瓶使其脫離塑料表面。加入5 mL含血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基滅活胰酶。可能需要?jiǎng)×业囊埔翰僮鱽硎古囵B(yǎng)容器底部的剩余細(xì)胞脫落,或?qū)⒓?xì)胞團(tuán)塊分解成單細(xì)胞懸浮液。胰酶的去除或失活對(duì)于冷凍細(xì)胞至關(guān)重要。如果游離試劑不能直接滅活,可以通過下一步的離心去除。2.用15ml離心管收集細(xì)胞。取出樣本進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),剩余的細(xì)胞懸液以約100×g離心5分鐘以獲得細(xì)胞沉淀。離心時(shí),用細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。使用臺(tái)盼藍(lán)染液檢查細(xì)胞的活性。無血清細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品原理:無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。石家莊正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格...