外泌體在肺病治病中的作用：有研究發(fā)現(xiàn)，使用外泌體運(yùn)載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細(xì)胞對(duì)PTX的吸收，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，加載至外泌體中的雷公藤紅素（Exo-CEL）比...

胞冷凍保存方法：選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸...

臨床意義：1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細(xì)胞PAS染色多呈陽性反應(yīng)，陽性率高，反應(yīng)強(qiáng)；成熟紅細(xì)胞有時(shí)亦可為陽性；急性淋巴細(xì)胞白血病的原、幼淋巴細(xì)胞PAS染色多為紅色顆?；驂K狀陽性反應(yīng)；急性粒細(xì)胞白血病的原粒細(xì)胞呈陰性或胞質(zhì)呈彌漫淡色陽性反應(yīng)；急性早幼粒...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染簡(jiǎn)介：轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因?qū)儆谕ㄟ^物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方...

由歐洲多國(guó)細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)（ISEV）于2014年在協(xié)會(huì)會(huì)刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見，也就是我們常說的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《...

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度，較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注：DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。...

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度，較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注：DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。...

注意事項(xiàng)：染色前：①切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。②撈片時(shí)，較好一張玻片撈一個(gè)組織，組織較好位于玻片的中間，美觀的同時(shí)也利于脫蠟（有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候，達(dá)不到脫蠟的目的）。③石蠟切片脫蠟到水時(shí)，一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率影響因素：1.細(xì)胞密度一般來說，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到60%～80%時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染可以取得較高的轉(zhuǎn)染效率，過低或過高都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果。2.細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)這點(diǎn)非常關(guān)鍵，很多時(shí)候傳代次數(shù)太少或者太多都將導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)染試劑敏感度的改變。因此，為了提高轉(zhuǎn)染效率以及轉(zhuǎn)染穩(wěn)...

可以通過pas染色計(jì)算糖原含量嗎：PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉：陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色；在正常血片中RBC不染色；PLT染成深紅色；中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽性顆粒；...

糖原染色生物技術(shù)優(yōu)勢(shì)：（1）擁有針對(duì)不同組織的特殊固定液；（2）擁有日本進(jìn)口的各種染料，保證切片染色效果；（3）擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊(duì)伍，保證實(shí)驗(yàn)快速、有效的完成。實(shí)驗(yàn)樣本要求：（1）植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分；（2）動(dòng)物材料取用時(shí)需...

糖原及粘液染色法注意事項(xiàng)：1、糖原的固定要及時(shí)，而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑，有它的弊病，因無水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化，（極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果較佳，其配法如下：苦味酸飽和于95%酒精85ml4...

糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng)：1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷，否則影響染色效果。需使用一張陽性對(duì)照片驗(yàn)證酶的活性。2、過碘酸氧化時(shí)間不宜過久，氧化時(shí)溫度以18～22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存，使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣，使用...

染色的原理和臨床意義：在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理，...

所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)，無論是研...

染色的一般原則：1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑，取用前請(qǐng)離心集液，以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后，分裝為小份避光保存于-20℃，即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測(cè)單細(xì)胞懸液，如使用組織樣本，首先必須制備成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推...

醫(yī)院檢驗(yàn)中心糖原染色操作規(guī)程：1．雪夫氏試劑：400m1蒸餾水煮沸除去C02，逐漸加堿性品紅2．08溶解后，待冷卻至60℃，加1mm01兒HCl40ml，再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO：)4g，次日加活性碳1．5g，放置半天后過濾。配好后液體為無色透明，保存于4...

特殊染色方法選擇應(yīng)遵循：染色結(jié)果對(duì)比鮮明、結(jié)果易保存、陽性突出的染色方法；突出的陽性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長(zhǎng)時(shí)間保存、不褪色對(duì)于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì)，甲基紫染色法雖然流程較為簡(jiǎn)單，但結(jié)果不易保存...

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化，產(chǎn)生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無色品紅結(jié)合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時(shí)過濾，加1mmol/L鹽...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法：轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因?qū)儆谕ㄟ^物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介...

PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解，形成水溶性的雙糖-麥芽糖，在...

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高...

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面：盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能較好地保存糖原，但有使糖原流動(dòng)到...

糖原染色的參考值及臨床意義：1.慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病，其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高；等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí)，淋巴細(xì)胞積分值正常。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS...

干細(xì)胞無血清凍存液操作事項(xiàng)：使用說明：1.細(xì)胞消化和計(jì)數(shù)，用胰酶對(duì)待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3.根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)的情況，加入適量的干細(xì)胞無血清凍存液，使細(xì)胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達(dá)到的...

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá)，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程。單個(gè)miRNA可能通過壓...

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致炸列。2.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜（DMSO）對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二...

無血清細(xì)胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿，請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積。1.在室溫（15-2...

RNA提取關(guān)鍵點(diǎn)：RNA的產(chǎn)量和質(zhì)量也是另無數(shù)人頭疼的問題，較佳方法是保證樣品完全裂解，但相同的裂解方案換了一個(gè)樣本可能就沒轍了。為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機(jī)械裂解步驟（研磨珠破碎）匹配，或者在裂解液上游加入酶裂解步驟（如蛋白酶K、溶菌酶等）。BIO...

細(xì)胞外基質(zhì)的化學(xué)組成包括3類：氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈性蛋白以及纖連蛋白和層粘連蛋白。主要功能表現(xiàn)在：對(duì)細(xì)胞組織起支持、保護(hù)、提供營(yíng)養(yǎng)，以及胚胎發(fā)育形態(tài)建成、細(xì)胞分裂、細(xì)胞分化、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移、細(xì)胞識(shí)別、細(xì)胞黏著和通信聯(lián)絡(luò)等方面。植物細(xì)胞的細(xì)胞壁相當(dāng)于植物體...