EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo?熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗...
按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:染色反應(yīng)液組分500μl1ml2ml5ml1×反應(yīng)緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測(cè)混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘;4、棄染色反應(yīng)液,加入100μlTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;5、棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoech...
EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡(jiǎn)單易行。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。山東如何使用EdU細(xì)胞增殖...
EdU細(xì)胞増殖檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)使用說(shuō)明產(chǎn)品簡(jiǎn)介細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步...
EdU細(xì)胞増殖檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)使用說(shuō)明產(chǎn)品簡(jiǎn)介細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步...
BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體,由于空間位阻,雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide),無(wú)需DNA變性,操作更便捷,兼容性好,檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測(cè)快速。相對(duì)于BrdU法,本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測(cè)新合成的DNA,所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后,增殖的細(xì)胞呈棕色,可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果參見(jiàn)圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果圖。無(wú)EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列);EdU(10μM)...
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定...
避免反復(fù)凍融。如短時(shí)間內(nèi)需多次重復(fù)使用,請(qǐng)于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實(shí)驗(yàn)步驟(以96孔...
4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃預(yù)冷20min)。d,封閉液。e,/LPBS緩沖液。2、染色方法a,取出培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛試問(wèn)固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗兩次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室溫封閉30min-1h。e.去封閉液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃過(guò)夜。抗體以mo/LPBS稀釋(理想的抗體濃度需經(jīng)試驗(yàn)而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用濾紙吸干。(PBS配制)封片。j.免疫熒光顯微鏡下觀察,或于4℃避光保存...
EdU-488細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488),是一種利用核苷滲入法對(duì)細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡(jiǎn)單、高靈敏檢測(cè)的試劑盒。其原理為:試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類(lèi)似物,EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過(guò)Cu+的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱(chēng)作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA...
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解(圖1B)。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度(圖2)。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒實(shí)測(cè)效果圖。,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí),顯微鏡下可見(jiàn)大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同...
搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測(cè)混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液,加入300ulTritonX-1...
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過(guò)基于EdU與Apollo?熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性,通過(guò)檢測(cè)EdU標(biāo)記便能準(zhǔn)確地反映細(xì)胞的增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測(cè)染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測(cè),可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒怎樣使用?上海東寰告訴您。江西咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的...
EdU細(xì)胞增殖方法簡(jiǎn)單,方便,無(wú)需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開(kāi)展細(xì)胞功能方面的研究。使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒...
與BrdU方法相比,EdU檢測(cè)方法無(wú)需DNA變性,無(wú)需抗原修復(fù),無(wú)需抗原抗體反應(yīng),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確,是細(xì)胞增殖檢測(cè)的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他...
保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng):由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面,由于96孔板周?chē)蝗θ菀渍舭l(fā),可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固,使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固,可以2...
EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試...
EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡(jiǎn)單易行。”細(xì)胞增殖檢測(cè)方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測(cè)新合成的DNA,簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測(cè)方法非常快速,且只需簡(jiǎn)單的幾個(gè)步驟,因此也適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞的活力。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)...
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類(lèi)似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問(wèn)題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無(wú)放射性污染。簡(jiǎn)單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測(cè)。無(wú)需DNA變性和孵育抗體。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家。山東EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的...
建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性上海東寰告訴您什么是Ed...
以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過(guò)免疫熒光檢測(cè),后者通過(guò)熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記,且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè),操作安全簡(jiǎn)便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測(cè)法不同,EdU-Click檢測(cè),如EdU-Click594(BCK-EDU594)無(wú)需進(jìn)行DNA變性來(lái)檢測(cè)摻入的EdU,而是通過(guò)一次快速、高度特異性的點(diǎn)擊反應(yīng),將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過(guò)EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性,從而確地反映細(xì)胞...
按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:染色反應(yīng)液組分500μl1ml2ml5ml1×反應(yīng)緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測(cè)混合液,以覆蓋細(xì)胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘;4、棄染色反應(yīng)液,加入100μlTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;5、棄細(xì)胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoech...
EdU法中的點(diǎn)擊反應(yīng)原理圖。摻入到細(xì)胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標(biāo)記的疊氮化物,在銅離子的催化下發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),使細(xì)胞DNA標(biāo)記上熒光探針或生物素。細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。細(xì)胞增殖檢測(cè)的方法按照原理通常可以分為五類(lèi):膜損傷檢測(cè)、代謝活性檢測(cè)、ATP水平測(cè)定、DNA合成檢測(cè)和細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測(cè)法。目前公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒?江蘇哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶...
注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)孵育時(shí)間至少2小時(shí),可延長(zhǎng)至24小時(shí)后再檢測(cè)也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來(lái)進(jìn)行細(xì)胞固定;2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來(lái)配置,避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlT...
現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。有哪些領(lǐng)域...
EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒的功能和實(shí)驗(yàn)建議中文名稱(chēng)細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光)貨號(hào)KTA2030規(guī)格¥500/50T背景資料:細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測(cè)試劑盒是Brdu方法的性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類(lèi)似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。實(shí)驗(yàn)建議細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),是BrdU方法的**性突破試劑盒組分:EdU(10mM)、AbFluor488疊氮化物上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。浙江提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試...
快速—–無(wú)需過(guò)夜,省卻抗原抗體反應(yīng)。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需2.5小時(shí),縮短實(shí)驗(yàn)周期。準(zhǔn)確—–標(biāo)記率高且無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完。靈敏—–無(wú)需抗體,檢測(cè)染料為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)。兼容—–對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,允許與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。本試劑盒適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也適用于組織切片,可以檢測(cè)到細(xì)胞或組織樣本中的單個(gè)增殖細(xì)胞,也可以對(duì)細(xì)胞或組織樣本總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量分析。使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒能給人們帶來(lái)便利嗎?湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)...
EdU細(xì)胞增殖方法簡(jiǎn)單,方便,無(wú)需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒發(fā)揮的重要作用。湖北哪家...
直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的準(zhǔn)確方法之一,的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類(lèi)似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比(圖1),更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高...
EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測(cè)與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過(guò)程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時(shí),可以通過(guò)快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測(cè)到它,并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡(jiǎn)便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同,Click-iTEdU檢測(cè)法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測(cè)摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí),Click-iTEdU和InvitrogenCl...