熒光色素:四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC),其結(jié)構(gòu)式如下所示,比較大吸收光波長為 550nm,比較大發(fā)射光波長為 620nm,呈現(xiàn)出橙紅色熒光。和 FITC 的翠綠色熒光形成鮮明對比,能夠配合用于雙重標記或者對比染色。它的異硫氰基能夠和蛋白質(zhì)相結(jié)合,不過熒光效率比較低。免疫熒光技術也被稱作熒光抗體技術,屬于標記免疫技術中發(fā)展相對較早的一種。很早的時候就有一些學者嘗試把抗體分子與某些示蹤物質(zhì)進行結(jié)合,借助抗原抗體反應來對組織或細胞內(nèi)的抗原物質(zhì)進行定位,而該技術就是在此基礎上建立起來的一項技術。我們的免疫熒光試劑適用于活細胞成像。CK7即用免疫檢測
**微環(huán)境是一個復雜的生態(tài)系統(tǒng),包含腫瘤細胞、免疫細胞、血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等多種成分,以及細胞因子、趨化因子等多種生物分子。利用多重免疫熒光和多色免疫熒光技術,我們可以對**微環(huán)境中的多種成分進行標記。例如,用綠色熒光標記腫瘤細胞,紅色熒光標記**相關巨噬細胞(TAMs),藍色熒光標記**血管內(nèi)皮細胞。這樣,在**組織切片上就可以直觀地看到腫瘤細胞與周圍免疫細胞和血管的空間關系。同時,我們還可以標記與腫瘤免疫逃逸相關的分子。比如,用黃色熒光標記腫瘤細胞表面的程序性死亡配體-1(PD-L1),紫色熒光標記浸潤在**組織中的T細胞表面的程序性死亡受體-1(PD-1)。通過觀察這些標記分子的表達情況以及它們之間的相互作用,能夠深入了解腫瘤細胞是如何通過與免疫細胞的相互作用來逃避免疫監(jiān)視的。這對于開發(fā)基于**微環(huán)境的免疫治療方法,如免疫檢查點抑制劑的應用,具有重要的指導意義。CK7即用免疫檢測免疫熒光染色服務提供多種圖像銳化選項。
在腫瘤免疫***中,如免疫檢查點抑制劑***。我們可以用不同顏色的熒光標記腫瘤細胞表面的免疫檢查點分子,如程序性死亡受體-1(PD-1)及其配體(PD-L1),同時用其他顏色標記**微環(huán)境中的免疫細胞,如T細胞、NK細胞等。在***前,通過觀察這些標記分子和細胞的初始狀態(tài),可以了解**微環(huán)境的免疫抑制情況。在***過程中及***后,再次進行多色免疫熒光檢測,對比前后的變化。如果看到PD-L1在腫瘤細胞上的表達降低,T細胞和NK細胞在**組織中的浸潤增加且活性增強,這表明免疫檢查點抑制劑可能正在發(fā)揮作用,改善了**微環(huán)境的免疫狀態(tài),提高了機體對**的免疫應答能力。在自身免疫性疾病的免疫調(diào)節(jié)***中,多重免疫熒光也能發(fā)揮作用。例如,在類風濕關節(jié)炎的***評估中,用不同顏色標記關節(jié)滑膜組織中的炎癥細胞、自身抗體以及與關節(jié)修復相關的分子。通過觀察這些標記成分在***前后的變化,如炎癥細胞數(shù)量的減少、自身抗體結(jié)合的減弱以及關節(jié)修復分子的增加,可以判斷免疫調(diào)節(jié)***是否有效,從而為調(diào)整***方案提供依據(jù)。
免疫熒光在眼科疾病研究中具有重要的意義,為眼科疾病的診斷和研究提供了有力支持。在視網(wǎng)膜疾病的研究中,例如年齡相關性黃斑變性(AMD),免疫熒光可用于標記視網(wǎng)膜色素上皮細胞和光感受器細胞中的特定蛋白。通過觀察這些蛋白在AMD患者視網(wǎng)膜中的變化,如某些蛋白的缺失或異常表達,可以深入了解AMD的發(fā)病機制。同時,免疫熒光還可以檢測視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達情況,這對于研究AMD的血管新生機制以及評估抗VEGF***的效果具有重要價值。在青光眼的研究中,免疫熒光可以標記視神經(jīng)**處的神經(jīng)纖維和細胞外基質(zhì)成分。通過觀察這些標記物在青光眼患者中的變化,如神經(jīng)纖維的損傷和細胞外基質(zhì)的重塑,可以了解青光眼的視神經(jīng)損傷機制,為青光眼的早期診斷和***提供依據(jù)。免疫熒光染色服務提供多種圖像格式輸出。
免疫組化在消化系統(tǒng)疾病的研究和診斷中猶如一把神秘的鑰匙,能夠解開許多疾病之謎。消化系統(tǒng)包含多個***,如胃、腸、肝臟和胰腺等,每個***都可能發(fā)生各種各樣的病變。在胃*的診斷中,免疫組化可以檢測胃*細胞中的多種標志物,如*胚抗原(CEA)、細胞角蛋白(CK)等。這些標志物不僅有助于確定**的性質(zhì),還能判斷胃*的分化程度。例如,高分化的胃*細胞可能表達特定類型的細胞角蛋白,而低分化的胃*細胞其標志物表達可能有所不同。此外,免疫組化還能檢測胃*細胞是否存在微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI),這對于判斷患者是否適合免疫***具有重要意義。在肝臟疾病方面,免疫組化可用于檢測肝炎病毒相關抗原在肝臟組織中的分布,了解病毒***對肝臟細胞的影響。同時,在肝臟**的診斷中,免疫組化可以區(qū)分肝細胞*和膽管細胞*等不同類型的**,為制定個性化的***方案提供依據(jù)。免疫熒光染色技術可用于共定位研究。CD31免疫熒光
免疫熒光染色技術可用于亞細胞定位研究。CK7即用免疫檢測
免疫熒光在揭示細胞信號網(wǎng)絡方面發(fā)揮著重要作用,它能夠?qū)碗s的信號傳導過程可視化。在細胞生長因子信號通路的研究中,生長因子與細胞表面受體結(jié)合后會啟動一系列的信號轉(zhuǎn)導事件。通過免疫熒光標記信號通路中的關鍵分子,如受體酪氨酸激酶及其下游的信號分子,如絲裂原活化蛋白激酶(MAPK),可以觀察到這些分子在細胞受到生長因子刺激時的磷酸化狀態(tài)和空間分布變化。這有助于構(gòu)建完整的細胞生長因子信號網(wǎng)絡,理解不同信號分子之間的相互作用和調(diào)控關系。在細胞應激反應信號通路的研究中,例如細胞在缺氧狀態(tài)下的信號傳導。免疫熒光可以標記缺氧誘導因子(HIF-1α)等關鍵分子,觀察它們在細胞內(nèi)的定位和表達變化。這對于研究細胞如何適應缺氧環(huán)境以及在疾病狀態(tài)下(如**缺氧微環(huán)境)這些信號通路的異常具有重要意義。CK7即用免疫檢測