湖北華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

    細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。Eagle培養(yǎng)基由Harry Eagle在Eagle基本培養(yǎng)基（BEM）的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。湖北華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

    成份解釋：貨號L-谷氨酰胺L-丙氨酰-L-谷氨酰葡萄糖HEPES酚紅雙抗HCY-BCM07001★★★HCY-BCM07001A★★★★HCY-BCM07002★★★★HCY-BCM07002A★★★★★HCY-BCM07003★★★HCY-BCM07004★★HCY-BCM07005★★★HCY-BCM07006★★★★HCY-BCM07007★★HCY-BCM07008★★★HCY-BCM07009★★HCY-BCM07010★HCY-BCM07011★★HCY-BCM07012★★★HCY-BCM07013★★HCY-BCM07014★HCY-BCM07015★★HCY-BCM07016★★★HCY-BCM07017★HCY-BCM07018★★HCY-BCM07019★HCY-BCM07020HCY-BCM07021★★HCY-BCM07022★HCY-BCM07023ATCC改進(jìn)HCY-BCM07024Dutch改良HCY-BCM07025不含葉酸HCY-BCM07026不含蛋氨酸不含葡萄糖不含酚紅HCY-BCM07027SILACRPMI-1640FlexHCY-BCM07028SILACRPMI-1640RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種養(yǎng)分要素，但其在溶液中不安定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需隨意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在用到時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更有利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細(xì)胞培訓(xùn)添加劑，可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。重慶昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分。

干細(xì)胞研究同樣與 DMEM 培養(yǎng)基緊密相連。DMEM 培養(yǎng)基能夠為干細(xì)胞群體的維持和擴(kuò)增提供適宜環(huán)境。以胚胎干細(xì)胞為例，高糖型 DMEM 培養(yǎng)基憑借充足的能量供應(yīng)，助力胚胎干細(xì)胞保持良好的生長狀態(tài)，維持其多能性。在誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定細(xì)胞類型時，科研人員可根據(jù)需求對 DMEM 培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，添加特定的生長因子等成分，引導(dǎo)干細(xì)胞向目標(biāo)細(xì)胞分化。比如，在神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元細(xì)胞分化的研究中，通過調(diào)整 DMEM 培養(yǎng)基成分，促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化進(jìn)程，為神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡鹽溶液溶解）與合成培養(yǎng)基（如MEM細(xì)胞培養(yǎng)基）以1:1的比例混合使用。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。此外，血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體等都會影響細(xì)胞生長，甚至造成細(xì)胞死亡。目前，血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用，使用濃度一般為5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復(fù)雜，批間差異大及存在病毒等外源污染風(fēng)險，對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響，在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此，基于對血漿成份的分析，合成細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)運(yùn)而生。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM）。M199全稱Medium 199，廣泛應(yīng)用于各種動物細(xì)胞的培養(yǎng)，包括一些非哺乳類動物細(xì)胞。

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)踐中，選擇合適的 DMEM 培養(yǎng)基至關(guān)重要。對于生長較快、粘附性低的細(xì)胞，如某些腫瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，高糖型 DMEM 培養(yǎng)基是理想之選，其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細(xì)胞對能量的高需求，促進(jìn)細(xì)胞快速生長。而對于一些原代細(xì)胞，因其對培養(yǎng)環(huán)境更為敏感，可能需要低糖型 DMEM 培養(yǎng)基，并根據(jù)細(xì)胞來源和特性添加特定的生長因子、營養(yǎng)補(bǔ)充劑等，定制專屬培養(yǎng)方案，為原代細(xì)胞提供**適宜的生長條件，提高原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率。RPMI 1640 培養(yǎng)基含有生物素、 維生素 B12 以及 PABA，這些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具備的。四川實(shí)驗細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍。湖北華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

    門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細(xì)胞無毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn)，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時（如乳腺組織），**好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。湖北華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

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