克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-23

紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后,精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,隨著時(shí)間的推移,卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極,進(jìn)而排出第二極體,再往后大約加精后9-16小時(shí),雌雄原核會(huì)出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗,發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI,往往錯(cuò)過了卵子的比較好受精時(shí)間,因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們?cè)诩泳蟮?-6小時(shí),通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救,實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個(gè)紡錘體,17.3%含有兩個(gè)紡錘體,并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI;而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體,只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。顯微鏡下的紡錘體,如同精密的分子機(jī)器,引導(dǎo)染色體分離。克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡

克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡,紡錘體

在有絲分裂過程中,紡錘體的形成和功能是高度協(xié)調(diào)的。從前期到中期,紡錘體逐漸成熟,染色體被精確排列在細(xì)胞的中間區(qū)域。到了后期和末期,紡錘體開始分解,將染色體拉向細(xì)胞的兩極,并完成胞質(zhì)分裂。這一過程中,紡錘體的微管通過縮短和伸長(zhǎng)來協(xié)調(diào)染色體的移動(dòng)和定位,確保遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞。雖然無絲分裂過程中不形成明顯的紡錘體結(jié)構(gòu),但紡錘體的相關(guān)成分(如微管和動(dòng)力蛋白)仍在細(xì)胞分裂中發(fā)揮作用。例如,在質(zhì)體分裂中,紡錘體成分同樣起到了精確定位和運(yùn)動(dòng)染色體的作用。在減數(shù)分裂過程中,紡錘體的形成和功能更加復(fù)雜。以人卵母細(xì)胞為例,其紡錘體在減數(shù)分裂過程中會(huì)經(jīng)歷一段較長(zhǎng)時(shí)間的“多極紡錘體”階段,而后才形成雙極狀紡錘體。這一過程需要多種關(guān)鍵蛋白(如HAUS6、KIF11和KIF18A)的參與和調(diào)控。紡錘體的正確組裝和雙極化對(duì)于保證卵母細(xì)胞的正常發(fā)育和受精至關(guān)重要。昆明輔助生殖紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)紡錘體的微管在細(xì)胞分裂后期會(huì)斷裂并重新組裝,形成新的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡,紡錘體

染色體非整倍性是指細(xì)胞中染色體數(shù)目異常,即染色體數(shù)目不是正常二倍體數(shù)目的整數(shù)倍。這種異常在多種疾病中都可見,包括遺傳性疾病和不孕不育等。紡錘體是細(xì)胞分裂過程中負(fù)責(zé)染色體分離的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),其功能缺陷可能導(dǎo)致染色體非整倍性的發(fā)生。紡錘體是由微管、動(dòng)力蛋白和調(diào)節(jié)蛋白等組成的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)在有絲分裂和減數(shù)分裂過程中確保染色體的正確分離和分配。紡錘體的主要功能包括:染色體捕捉:紡錘體通過動(dòng)粒微管(kinetochoremicrotubules)捕捉染色體的著絲粒,確保染色體在分裂中期排列在赤道板上。染色體分離:紡錘體通過極微管(polarmicrotubules)和動(dòng)粒微管的動(dòng)態(tài)變化,推動(dòng)染色體在分裂后期向兩極移動(dòng),實(shí)現(xiàn)染色體的均等分配。細(xì)胞分裂:紡錘體還參與細(xì)胞分裂的其他過程,如細(xì)胞質(zhì)分裂(cytokinesis)。

紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中形成的一種微管結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)精確分離染色體。然而,紡錘體對(duì)環(huán)境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感,在冷凍保存過程中容易發(fā)生損傷,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。因此,如何有效監(jiān)測(cè)和評(píng)估冷凍過程中紡錘體的變化,成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)的出現(xiàn),為這一問題的解決提供了可能。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù),對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的觀察和記錄。常用的熒光標(biāo)記方法包括使用綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記微管蛋白,以及利用特定抗體對(duì)紡錘體相關(guān)蛋白進(jìn)行染色。通過這些方法,研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài)、位置、動(dòng)態(tài)變化等信息,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍過程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性。紡錘體微管的排列方向決定了染色體分離的方向。

克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡,紡錘體

基因編輯技術(shù)是一種可以精確修改基因序列的方法,如CRISPR/Cas9、TALENs和ZFNs等。這些技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于基因領(lǐng)域,并取得了明顯的成果。在修復(fù)紡錘體異常方面,基因編輯技術(shù)可以通過精確修改導(dǎo)致紡錘體異常的致病基因,從而恢復(fù)紡錘體的正常功能。例如,針對(duì)某些遺傳性疾病中紡錘體相關(guān)基因的突變,基因編輯技術(shù)可以直接修復(fù)這些突變,從而來改善患者的病情。基因轉(zhuǎn)移是將正?;?qū)氲交颊呒?xì)胞中,以替代或補(bǔ)充致病基因的方法。紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的共同影響。深圳核移植紡錘體卵質(zhì)量評(píng)估

紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過收縮力推動(dòng)染色體分離。克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡

Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù),無需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行染色,即可實(shí)時(shí)、清晰、高對(duì)比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像,對(duì)ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評(píng)價(jià)等有很好的輔助作用。主要應(yīng)用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級(jí)卵母細(xì)胞,避免卵的破裂損傷,增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評(píng)估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。體外成熟評(píng)估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識(shí)別紡錘體,而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì),使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對(duì)冷凍的初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發(fā)育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測(cè)胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡)??梢詫?duì)染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測(cè)量卵母細(xì)胞的透明帶;準(zhǔn)確測(cè)量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài)克隆紡錘體兼容大部分顯微鏡