上海紡錘體Oosight Basic

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時間的推移，卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗，發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4-6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體的研究對于開發(fā)新的抗病毒藥物具有重要意義。上海紡錘體Oosight Basic

紡錘體的精密導(dǎo)航作用主要體現(xiàn)在以下幾個方面：微管的動態(tài)生長與縮短：紡錘體微管的動態(tài)生長和縮短是紡錘體形態(tài)變化的基礎(chǔ)。這種動態(tài)變化不僅使紡錘體能夠適應(yīng)不同階段的細(xì)胞分裂需求，還能夠確保染色體在分裂過程中的精確定位。動粒微管與染色體的結(jié)合：動粒微管與染色體動粒的結(jié)合是紡錘體牽引染色體的關(guān)鍵步驟。動粒微管通過驅(qū)動蛋白和動力蛋白的介導(dǎo)，與染色體動粒緊密結(jié)合，從而實現(xiàn)了染色體在紡錘體中的精確定位和牽引。紡錘體微管的極性排列：紡錘體微管的極性排列決定了染色體分裂的方向和胞質(zhì)分裂面的位置。紡錘體微管從兩極向中心區(qū)域延伸，形成類似紡錘的形狀，確保了染色體在分裂過程中能夠沿著正確的方向分離。同時，紡錘中心體的形成也決定了胞質(zhì)分裂面的位置，使細(xì)胞分裂更加對稱和穩(wěn)定。紡錘體組裝檢查點的調(diào)控：紡錘體組裝檢查點是細(xì)胞周期調(diào)控中的重要環(huán)節(jié)，它確保了紡錘體在分裂過程中的完整性和準(zhǔn)確性。當(dāng)紡錘體組裝不完全或染色體動粒未能被所有動粒微管捕獲時，紡錘體組裝檢查點會被激發(fā)，阻止細(xì)胞進(jìn)入分裂后期。這種調(diào)控機制避免了染色體分離錯誤導(dǎo)致的遺傳異常和細(xì)胞死亡。昆明無需染色紡錘體卵冷凍研究紡錘體微管的動態(tài)變化是細(xì)胞對外界刺激響應(yīng)的一部分。

冷凍與解凍過程中涉及多個環(huán)節(jié)，包括溫度控制、時間控制、冷凍保護(hù)劑的添加與去除等。這些環(huán)節(jié)中的任何一步操作不當(dāng)都可能導(dǎo)致紡錘體損傷。因此，需要不斷優(yōu)化冷凍與解凍技術(shù)，以減少對紡錘體的不良影響。近年來，研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方，取得了進(jìn)展。例如，甘油、二甲基亞砜（DMSO）等滲透性保護(hù)劑被用于哺乳動物卵母細(xì)胞的冷凍保存中，它們能夠迅速降低細(xì)胞內(nèi)水分含量，減少冰晶形成。同時，一些非滲透性保護(hù)劑如蔗糖、海藻糖等也被發(fā)現(xiàn)對紡錘體具有一定的保護(hù)作用。

紡錘體功能分解在細(xì)胞分裂中，其主要作用有兩個部分。其一為排列與分裂染色體。紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。紡錘體的正常生成是染色體排列的必要條件。紡錘體生成完畢后一般會有5-20分鐘的延遲，以供細(xì)胞調(diào)整著絲點上微管束的極性，以及決定是否所有的著絲點都附著正確。此后細(xì)胞進(jìn)入分裂后期，染色體分裂為兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。同樣，紡錘體的完整性決定這個分裂過程在時間和空間上的準(zhǔn)確性。紡錘體另一功能為決定胞質(zhì)分裂的分裂面。染色體分裂的同時，紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極，而停弛在紡錘體**，形成紡錘**體(centralspindle)。在紡錘中體的**為兩組極性相反的微管交疊的區(qū)域，稱為紡錘**區(qū)(spindlemidzone).此**區(qū)就是接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期。胞質(zhì)分裂一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時，此期間兩個子細(xì)胞由中心顆粒體(midbody)連接。一般認(rèn)為紡錘體的分解發(fā)生在細(xì)胞分裂末期。紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過微管切割機制實現(xiàn)染色體分離。

秋水仙素為什么會使有絲分裂的細(xì)胞停滯于中期如果用秋水仙素處理有絲分裂的細(xì)胞，紡錘體會迅速消失，細(xì)胞停滯在有絲分裂中期，染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進(jìn)行誘導(dǎo)，從而將細(xì)胞阻斷在細(xì)胞分裂中期，也是誘導(dǎo)細(xì)胞周期同步化的重要方法之一。真核細(xì)胞周期可分為4個時期，分別是G1期、S期、G2期和M期。在細(xì)胞周期調(diào)控中主要有3個控制點，***個控制點在G1期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入S期；第二個控制點在G2期，決定細(xì)胞能否進(jìn)入有絲分裂期；第三個控制點在M期，決定細(xì)胞是否已經(jīng)準(zhǔn)備好將復(fù)制好的染色體拉向兩極。CDK（周期蛋白依賴性蛋白激酶）對細(xì)胞周期運行起著**性調(diào)控作用，CDK與不同時期的周期蛋白結(jié)合會在特定周期起調(diào)節(jié)作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調(diào)節(jié)功能的兩種主要周期蛋白。細(xì)胞周期運轉(zhuǎn)到分裂中期后，在后期促進(jìn)復(fù)合物(APC)的作用下，M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解，Cdkl活性喪失，細(xì)胞周期便從M期中期向后期轉(zhuǎn)化。APC活性變化是細(xì)胞周期由分裂中期向后期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因素，其活性受到多種因素的綜合調(diào)節(jié)，紡錘體組裝檢查點是其重要的調(diào)控因素。紡錘體組裝不完全，或所有動粒不能被動粒微管全部捕捉，則APC不能被***。顯微鏡下的紡錘體，如同精密的分子機器，引導(dǎo)染色體分離。深圳輔助生殖紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極，負(fù)極則靠近染色體。上海紡錘體Oosight Basic

Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù)，無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行染色，即可實時、清晰、高對比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像，對ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評價等有很好的輔助作用。主要應(yīng)用ICSI：在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細(xì)胞，避免卵的破裂損傷，增強胚胎的發(fā)育潛能。卵評估：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。體外成熟評估：在未成熟卵催化（IVM）過程判斷成熟期，判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識別紡錘體，而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制：利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級，改善對胚胎的選擇。核移植：顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì)，使得核移植的成功率增加了80%，并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究：對冷凍的初級卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析，從而判斷卵的發(fā)育力，改善妊娠率。紡錘體研究：檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程，確定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡）?？梢詫θ旧w非正常的或非整倍體的胚胎成像，從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究：測量卵母細(xì)胞的透明帶；準(zhǔn)確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化，判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài)上海紡錘體Oosight Basic