上海無損觀察紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

    盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中的作用有所不同，但兩者也存在一些共性。首先，紡錘體的形成都依賴于中心體的復(fù)制和分離，以及微管的動態(tài)生長和縮短。其次，在有絲分裂和減數(shù)分裂的中期，染色體都排列在赤道板上，形成了清晰的紡錘體結(jié)構(gòu)。此外，在有絲分裂和減數(shù)分裂的后期，染色體的著絲點都一分為二，導(dǎo)致姐妹染色單體或同源染色體分離，分別移向細(xì)胞的兩極。這一過程確保了每個子細(xì)胞都能獲得完整的染色體組。盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中存在共性，但兩者也存在明顯的差異。 紡錘體在細(xì)胞分裂后期推動染色體向細(xì)胞兩極移動。上海無損觀察紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

玻璃化冷凍技術(shù)因其快速冷凍和解凍的特點，在哺乳動物紡錘體卵冷凍保存中展現(xiàn)出巨大優(yōu)勢。該技術(shù)通過極快的降溫速率和高濃度的冷凍保護劑，使細(xì)胞內(nèi)溶液在冷凍過程中呈玻璃態(tài)而非結(jié)晶態(tài)，從而避免了冰晶對紡錘體的損傷。此外，研究者們還嘗試將微流控技術(shù)、激光輔助冷凍等新技術(shù)應(yīng)用于卵母細(xì)胞的冷凍保存中，以進一步提高冷凍效果。為了準(zhǔn)確評估冷凍對紡錘體的影響，研究者們開發(fā)了多種紡錘體穩(wěn)定性評估技術(shù)。例如，通過偏光顯微鏡觀察紡錘體的形態(tài)變化；利用免疫熒光染色技術(shù)檢測紡錘體相關(guān)蛋白的分布和表達；以及通過分子生物學(xué)方法檢測紡錘體相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平等。這些技術(shù)的應(yīng)用為深入研究冷凍過程中紡錘體的變化提供了有力支持。香港紡錘體Oosight Basic紡錘體微管的動態(tài)變化是細(xì)胞分裂周期的重要標(biāo)志。

    微管重組技術(shù)是體外構(gòu)建紡錘體模型的基礎(chǔ)。通過在體外重組微管蛋白，可以形成類似于細(xì)胞內(nèi)紡錘體的微管結(jié)構(gòu)。常見的方法包括：從牛腦或其他來源中純化微管蛋白，確保其純度和活性。在體外條件下，通過控制溫度、離子濃度等參數(shù)，誘導(dǎo)微管蛋白組裝成微管。使用微管穩(wěn)定劑（如紫杉醇）或調(diào)節(jié)蛋白（如MAPs）穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，模擬細(xì)胞內(nèi)的微管動態(tài)變化。動力蛋白和調(diào)節(jié)蛋白是紡錘體功能的重要組成部分。通過在體外模型中添加這些蛋白，可以模擬紡錘體的動力學(xué)行為。常見的方法包括：添加動力蛋白（如dynein、kinesin）以模擬微管的運動和動力學(xué)行為。添加調(diào)節(jié)蛋白（如AuroraB、Mad2）以模擬紡錘體檢查點的功能。

    紡錘體成像技術(shù)的中心在于提高成像的分辨率和速度，以捕捉紡錘體的精細(xì)結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。以下是幾種主要的紡錘體成像技術(shù)的技術(shù)原理：結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡（SIM）：SIM通過引入已知的空間調(diào)制光場，使樣品發(fā)出具有特定空間頻率的熒光信號。通過采集多個不同空間頻率的熒光圖像，并利用算法進行重建，SIM可以實現(xiàn)超越傳統(tǒng)熒光顯微鏡分辨率的成像。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還保持了較快的成像速度和較好的細(xì)胞活性。受激輻射損耗顯微鏡（STED）：STED利用一束聚焦的激光束（稱為STED束）來抑制樣品中特定區(qū)域的熒光信號。通過精確控制STED束的位置和強度，STED可以實現(xiàn)超越衍射極限的成像分辨率。這種方法特別適用于觀測紡錘體等復(fù)雜結(jié)構(gòu)中的精細(xì)細(xì)節(jié)。單分子定位顯微鏡（SMLM）：SMLM通過檢測樣品中單個熒光分子的位置來實現(xiàn)高分辨率成像。由于熒光分子的隨機閃爍特性，SMLM可以在時間域上分離不同分子的熒光信號，從而實現(xiàn)對單個分子的精確定位。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還提供了對紡錘體中單個微管和蛋白質(zhì)分子的動態(tài)變化的觀測能力。 紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過微管切割機制實現(xiàn)染色體分離。

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞含有1個極體，也就是***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進入卵子，隨著時間的推移，～6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進而排出第二極體，再往后大約加精后9～16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4～6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進行補救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進行補救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進行補救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體在細(xì)胞分裂中的穩(wěn)定性對于細(xì)胞存活至關(guān)重要。昆明成熟卵母細(xì)胞紡錘體廠家

紡錘體形成過程中的任何錯誤都可能影響細(xì)胞的命運。上海無損觀察紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

    細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，紡錘體作為有絲分裂過程中的主要結(jié)構(gòu)，發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。它不僅確保了染色體的精確分離，還決定了胞質(zhì)分裂的分裂面，從而保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞和細(xì)胞增殖的準(zhǔn)確性。紡錘體是一種在細(xì)胞分裂前期形成的臨時性細(xì)胞器，由微管、微管結(jié)合蛋白以及多種調(diào)節(jié)蛋白組成。微管是紡錘體的主干，由α、β微管蛋白異源二聚體及少量微管結(jié)合蛋白聚合而成，呈現(xiàn)出動態(tài)生長和縮短的特性。在動物細(xì)胞中，紡錘體由星體微管、極間微管和動粒微管構(gòu)成，這些微管在中心體的引導(dǎo)下，從兩極向中心區(qū)域延伸，形成一個類似紡錘的形狀。而在植物細(xì)胞中，紡錘體則是由細(xì)胞兩極發(fā)出的紡錘絲直接構(gòu)成，不含有星體微管，因此被稱為無星紡錘體。 上海無損觀察紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)