日本精子制動壓電

**近幾年來，Piezo-ICSI法（壓電顯微受精法）被高度重視。使用了Piezo-ICSI法，與常規(guī)的顯微受精技術(shù)相比，對卵子的損害更小。結(jié)果顯示，用Piezo法會提高受精率，之后受精卵的發(fā)育也更好。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法，與傳統(tǒng)ICSI顯微受精方式不同，采用平口而不是尖口的精子注射針，通過超音振動技術(shù)打開卵子透明帶再將精子注入卵子，從而一定程度上減少了注射過程對卵子產(chǎn)生的損害，使高齡女性胚胎養(yǎng)囊率有所提升。臨床數(shù)據(jù)顯示，特別是針對一些大齡及反復(fù)受精失敗的情況，Piezo-ICSI比常規(guī)ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%，受精以后的退化率（即停止分裂）從18.6%降低到11.9%。而妊娠率從14.9%提高到23.1%。操作穩(wěn)定性更強事實上相較Piezo法，常規(guī)的顯微受精方法從穩(wěn)定性上更難操作。用汽車來舉例的話，Piezo法相當于自動檔汽車，常規(guī)的顯微受精方法相當于手動檔汽車，Piezo法可以縮短培養(yǎng)師的培訓(xùn)時間。日本只有10家能做Piezo即使在日本，采用Piezo法的醫(yī)院也不太多。在日本有600家進行體外受精、顯微受精的醫(yī)院，而采用Piezo法的醫(yī)院或許也就10家左右。從現(xiàn)在起Piezo法的優(yōu)勢會得以重新評估，或許10年，20年后會在世界各地得以普及。PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。日本精子制動壓電

Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤；按照Piezo操作系統(tǒng)的要求，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處，在20-25℃室溫下，準備進行顯微操作。具體操作前，首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合；再將單個精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾；連續(xù)剪切5個精子后，將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細胞的操作滴中，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質(zhì)中。注射時，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞，使紡錘體保持在6點或12點的位置，從3點的方向輕輕進針，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時，將精子頭吹至針尖處，繼續(xù)進針，直至針尖插入卵母細胞深處，幾乎貼近對側(cè)質(zhì)膜時，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質(zhì)膜，將精子頭吐出，回吸注入卵內(nèi)多余的操作液，輕輕退針，完成一次注射。依次操作，盡快實現(xiàn)該批卵母細胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎，并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射，在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射。透明帶打孔壓電壓電注射PRIME TECH 公司生產(chǎn)的PMM 150FU為全世界較早的壓電破膜儀。

卵子***是人類胚胎發(fā)育的起始步驟，該過程主要由細胞內(nèi)的鈣釋放調(diào)控，當成熟的卵母細胞發(fā)育到MII期后，只有精子的PLCζ進入卵母細胞的胞漿，才能***鈣震蕩，促使卵母細胞完成完整的減數(shù)分裂。TFF(Totalfertilizationfailure，完全受精失敗)是指MII期卵母細胞無法完成受精的過程，有1-3%的ICSI失敗是源于IFF。TFF與精子及卵子的異常均有關(guān)，其中卵子***異常是主要因素。卵子因素主要是由蛋白合成不足或異常信號傳導(dǎo)導(dǎo)致的胞質(zhì)不成熟；精子因素主要是PLCζ蛋白的結(jié)構(gòu)、表達和定位異常。受精失敗與女方年齡、不育類型和取卵數(shù)目等因素?zé)o關(guān)。精子的解凝功能異常和魚精蛋白缺失與TFF密切相關(guān)。精子染色質(zhì)組裝異?；蚓覦NA損傷可導(dǎo)致精子的解凝異常，無法***卵子及合子形成。研究表明精子染色質(zhì)組裝異常的精子中精子解凝功能受阻的精子比例高于正常精子。精細胞染色質(zhì)的魚精蛋白的合成與組裝對于精細胞的基因組濃縮也是非常重要的。若魚精蛋白的量減少，精子在ICSI后提前解凝，導(dǎo)致受精失敗。當精子進入卵子后精子染色質(zhì)提前濃縮也導(dǎo)致其提前解凝，精子和卵子遺傳物質(zhì)的同步節(jié)奏被打破，也造成受精失敗。不過這種同步性異常主要還是卵子因素造成的。

下面我們利用壓電陶瓷測試壓電效應(yīng)和逆壓電效應(yīng)。常用的壓電陶瓷是由鋯鈦酸鉛（PZT）材料做成的。將PZT材料做成的壓電陶瓷片粘在圓形黃銅片上就構(gòu)成了壓電陶瓷元件。它具有明顯的壓電效應(yīng)。首先，將壓電陶瓷片A的兩根引線通過一個按鈕開關(guān)與信號發(fā)生器相聯(lián)。將壓電陶瓷片B的兩根引線與擴音器（帶喇叭）的輸入端相連。將A、B兩個壓電陶瓷片用黑封泥固定在同一個木板制成的箱子上。當觀察者將按鈕開關(guān)按下，接通信號發(fā)生器和壓電陶瓷A時，由于逆壓電效應(yīng)，A開始振動，并把振動傳給木箱，木箱的振動傳給壓電陶瓷B，由于壓電效應(yīng)，使B兩邊產(chǎn)生變化電信號，再傳給擴音器使喇叭發(fā)聲，所以這個實驗同時演示了壓電效應(yīng)和逆壓電效應(yīng)。壓電顯微操作儀PMM 6可用于豬卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗。

壓電打火機的電壓陶瓷元件產(chǎn)生的瞬間電壓用什么儀器可以測量呢？起初，我們試圖用普通指針式多用電表直流高壓擋測量，發(fā)現(xiàn)每次按動點火元件的黑色塑料壓桿時，由于兩個電極接出的電壓只能使指針略微抖動一下。分析原因是，因為電壓脈沖持續(xù)時間甚短，指針慣性較大，指針無法同步體現(xiàn)電壓的變化做大幅偏轉(zhuǎn)。換用數(shù)字顯示型多用電表，本以為其無指針慣性影響，應(yīng)該能讀出瞬間高電壓來，誰知事與愿違，我們根本看不到預(yù)想的高電壓讀數(shù)，只能看到一些變換不定的低電壓數(shù)據(jù)。分析起來，這是由于液晶顯示響應(yīng)速度較慢，點火電壓脈沖持續(xù)時間甚短，來不及顯示比較高瞬間電壓，只能顯示電壓降落（較平緩階段）過程中的某些隨機電壓讀數(shù)。***，我們搬出實驗室的“重磅武器”──示波器，再做一試。我們用的是實驗室**普通的J2459型學(xué)生示波器，連接線為兩條普通的帶終魚夾的導(dǎo)線。從理論上講，示波器是利用電子束偏轉(zhuǎn)后打在熒光屏上顯示光點移動的，電子束慣性極小，應(yīng)該能“跟蹤”上點火高壓脈沖的變化，實驗結(jié)果不出所料。PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。上海透明帶穿孔壓電油壓注射器

PMM與傳統(tǒng)尖頭針相比可促進ES細胞注射入胚泡,用于胚胎干細胞顯微注射（ES cell Microinjection）。日本精子制動壓電

雖然Piezo-ICSI對于大齡試管準媽媽們的***來說非常有意義，但這項技術(shù)的使用卻對生殖中心有著比較高的門檻。日本英醫(yī)院擁有三臺Piezo-ICSI儀器，儀器的顯微鏡來自日本精工企業(yè)，手動精密操作臺來自德國。作為**精密儀器，它的每一個組件成本都達百萬，整體造價超過千萬。使用Piezo-ICSI不單單是設(shè)備升級，對培養(yǎng)師的操作要求和難度也是直線升級的。具體說來，因為受精操作是在高倍顯微鏡下利用操作桿來進行的，需要培養(yǎng)師同時配合操作觀察操作桿、顯微鏡、受精針和顯示屏。這么聽起來是不是感覺難度似乎還可以？然而事實上，在操作的過程中，培養(yǎng)師需要不斷的進行距離判斷的「切換」：想象一下，**挪動1cm，鏡下實際只會挪動0.1mm，但出現(xiàn)在視野中的范圍，實際上會有5cm那么大！日本精子制動壓電